anahtar kelimeler

KARACİĞER / İTO YILDIZ HÜCRELERİ/ MORFOLOJİ / KARAKTERİSTİK / A VİTAMİNİ / FİBROZİS

dipnot temel tıp üzerine bilimsel makale, bilimsel çalışmanın yazarı - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

Giriiş. İto stellat hücrelerinin (ISC'ler) rolü, karaciğerde fibrozis gelişiminde önde gelenlerden biri olarak tanımlanır, ancak ITO'ların yapısının intravital görselleştirilmesi klinik uygulama minimal olarak kullanılır. Çalışmanın amacı: intravital karaciğer biyopsi örneklerinin sitolojik tanımlama sonuçlarına dayanarak HCI'nin yapısal ve fonksiyonel özelliklerini sunmaktır. Malzemeler ve yöntemler. Biyopsi örneklerinin klasik ışık ve elektron mikroskobu yöntemleri ve ultra ince kesitler, fiksasyon ve boyama kullanan orijinal teknikler kullanıldı. Sonuçlar. Hastaların karaciğer biyopsilerinin ışık ve elektron mikroskopisinin fotoğraf illüstrasyonları üzerinde kronik hepatit C, HSC'lerin yapısal özelliklerini farklı aşamalarda (dinlenme, aktivasyon) ve miyofibroblastlara dönüşüm sürecinde sunar. Sonuçlar. Orijinal klinik morfolojik tanımlama yöntemlerinin kullanılması ve HCI'nin fonksiyonel durumunun değerlendirilmesi, karaciğer fibrozunun teşhis ve tahmin kalitesini artıracaktır.

İlgili konular temel tıp üzerine bilimsel çalışmalar, bilimsel çalışmanın yazarı - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

• Klinik Karaciğer Sitolojisi: Kupffer hücreleri

  2017 / Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Prokopchik N.I.

• Viral sirozda karaciğere nakledilen otolog mezenkimal kök hücrelerin morfolojik etkilerinin izlenmesi (klinik gözlem)

  2018 / Aukashnk S.P., Alenikova O.V., Tsyrkunov V.M., Isaykina Ya.I., Kravchuk R.I.

• Karaciğerin klinik morfolojisi: nekroz

  2017 / Tsyrkunov V.M., Prokopchik N.I., Andreev V.P., Kravchuk R.I.

• Karaciğer yıldız hücrelerinin polimorfizmi ve fibrogenezdeki rolleri

  2008 / Aidagulova S.V., Kapustina V.I.

• HIV/hepatit C virüsü ile koenfeksiyonlu hastalarda sinüzoidal karaciğer hücrelerinin yapısı

  2013 / Matievskaya N.V., Tsyrkunov V.M., Kravchuk R.I., Andreev V.P.

• Karaciğer fibrozu/siroz tedavisinde umut verici bir yöntem olarak mezenkimal kök hücreler

  2013 / Lukashik S.P., Aleinikova O.V., Tsyrkunov V.M., Isaykina Ya.I., Romanova O.N., Shimansky A.T., Kravchuk R.I.

• Eksplantasyon yoluyla sıçan karaciğer miyofibroblastlarının izolasyonu ve ekimi

  2012 / Miyanovich O., Shafigullina A.K., Rizvanov A.A., Kiyasov A.P.

• HCV enfeksiyonu ve diğer karaciğer lezyonlarında karaciğer fibrozu oluşumunun patolojik yönleri: modern kavramlar

  2009 / Lukashik S.P., Tsyrkunov V.M.

• Eksplantasyon yoluyla karaciğerin portal yollarının yapılarından elde edilen sıçan miyofibroblastlarının analizi

  2013 / Miyanovich O., Katina M.N., Rizvanov A.A., Kiyasov A.P.

• Nakledilen karaciğer stellat hücreleri, karaciğer fibrozu gelişme riski olmadan kısmi hepatektomi sonrası organ rejenerasyonunda yer alır.

  2012 / Shafigullina A.K., Gumerova A.A., Trondin A.A., Titova M.A., Gazizov I.M., Burganova G.R., Kaligin M.S., Andreeva D.I., Rizvanov A.A., Mukhammedov A.R., Kiyasov A.P.

giriiş. Ito stellate hücrelerinin (Hepatik Stellat Cells, HSC) rolü, karaciğer fibrozunun gelişiminde önde gelenlerden biri olarak tanımlanmıştır, ancak klinik uygulamada HSC yapılarının intravital görselleştirilmesinin kullanımı minimaldir. Çalışmanın amacı, intravital karaciğer biyopsi örneklerinin sitolojik tanımlama bulgularına dayanarak HSC'nin yapısal ve fonksiyonel özelliklerini sunmaktır. Malzemeler ve yöntemler. Biyopsi örneklerinin klasik ışık ve elektron mikroskobu yöntemleri, orijinal teknik içinde ultra ince kesitler, fiksasyon ve boyama uygulandı. Sonuçlar. Kronik hepatit C'li hastalardan alınan karaciğer biyopsi örneklerinin HSC'sinin yapısal özellikleri, ışık ve elektron mikroskobunun fotoğraf çizimlerinde sunulmaktadır. HSC'ler farklı aşamalarda (dinlenme, aktivasyon) ve miyofibroblastlara dönüşüm süreci sırasında tasvir edilir. Sonuçlar. Orijinal klinik ve morfolojik tanımlama yöntemlerinin kullanılması ve HSC'nin fonksiyonel durumunun değerlendirilmesi, karaciğer fibrozisinin tanı ve prognozunun kalitesini iyileştirmeye izin verir.

Bilimsel çalışmanın metni "Klinik Karaciğer Sitolojisi: Ito stellate hücreleri" konusunda

UDC 616.36-076.5

KLİNİK KARACİĞER SİTOLOJİSİ: İTO Yıldız Hücreleri

Tsyrkunov V.M. ( [e-posta korumalı]), Andreev V.P. ( [e-posta korumalı]), Kravchuk R.I. ( [e-posta korumalı]), Kondratovich I.A. ( [e-posta korumalı]) EE "Grodno Devlet Tıp Üniversitesi", Grodno, Beyaz Rusya

Giriiş. İto yıldız hücrelerinin (ISC'ler) rolü, karaciğerde fibroz gelişiminde önde gelenlerden biri olarak tanımlanır, ancak klinik uygulamada İTO'ların yapısının intravital görselleştirilmesi minimal olarak kullanılır.

Çalışmanın amacı: İntravital karaciğer biyopsi örneklerinin sitolojik tanımlama sonuçlarına dayanarak HCI'nin yapısal ve fonksiyonel özelliklerini sunmak.

Malzemeler ve yöntemler. Biyopsi örneklerinin klasik ışık ve elektron mikroskobu yöntemleri ve ultra ince kesitler, fiksasyon ve boyama kullanan orijinal teknikler kullanıldı.

Sonuçlar. Kronik hepatit C'li hastalardan alınan karaciğer biyopsi örneklerinin ışık ve elektron mikroskopisi foto-illüstrasyonları, farklı aşamalarda (dinlenme, aktivasyon) ve miyofibroblastlara dönüşüm sürecinde HSC'lerin yapısal özelliklerini göstermektedir.

Sonuçlar. Klinik morfolojik tanımlama ve HCI'nin fonksiyonel durumunun değerlendirilmesi için orijinal yöntemlerin kullanılması, karaciğer fibrozisinin tanı ve tahmin kalitesini iyileştirecektir.

Anahtar kelimeler: karaciğer, Ito yıldız hücreleri, morfoloji, özellikler, A vitamini, fibrozis.

giriiş

Kronik hepatit C (CHC) dahil olmak üzere çeşitli etiyolojilerdeki kronik yaygın karaciğer lezyonlarının çoğunun olumsuz bir sonucu, ana katılımcıların aktifleştirilmiş fibroblastlar olduğu, ana kaynağı aktif Ito stellat hücreleri (SSC'ler) olan karaciğer fibrozisidir. .

HSC, eşanlamlı - karaciğer yıldız hücreleri, yağ depolayan hücreler, perisinüzoidal lipositler, yıldız hücreler (İngiliz Hepatik Yıldız Hücresi, HSC, İto Hücresi, İto hücresi). ZKI ilk olarak 1876'da K. Kupffer tarafından tanımlanmış ve onun tarafından yıldız hücreleri (“Stemzellen”) olarak adlandırılmıştır. T. Ito, içlerinde yağ damlaları bulduktan sonra, onları önce yağ emici (“shibo-sesshusaibo”) olarak adlandırdı ve daha sonra, yağın hücrelerin kendileri tarafından glikojen, yağ depolayan hücrelerden (“shibo”) üretildiğini belirledi. -chozosaibo") . 1971'de K. Wake, Kupffer yıldız hücrelerinin ve yağ depolayan Ito hücrelerinin kimliğini ve bu hücrelerin A vitamini "depoladığını" kanıtladı.

Vücuttaki A vitamininin yaklaşık %80'i karaciğerde birikir ve tüm karaciğer retinoidlerinin %80'e kadarı HKI yağ damlalarında birikir. Şilomikronların bileşimindeki retinol esterler, hepatositlere girerler, burada retinole dönüştürülürler ve hücreler tarafından biriktiği perisinüzoidal boşluğa salgılanan retinol bağlayıcı protein (RBP) ile bir A vitamini kompleksi oluştururlar.

HCI'nin K. Popper tarafından kurulan karaciğer fibrozu ile yakın bağlantısı, statik fonksiyondan ziyade dinamik olduğunu gösterdi - intralobüler perihepatoselüler matrisin yeniden şekillenmesine doğrudan katılma yeteneği.

İntravital biyopsi örneklerindeki değişiklikleri değerlendirmek için gerçekleştirilen karaciğerin morfolojik incelemesinin ana yöntemi, klinik uygulamada üreme aktivitesinin kurulmasını mümkün kılan ışık mikroskobudur.

yanma ve kronikleşme aşaması. Yöntemin dezavantajı, hücrelerin yapısal özelliklerinin, hücre içi organellerin, inklüzyonların ve fonksiyonel özelliklerinin değerlendirilmesine izin vermeyen düşük çözünürlüktür. Karaciğerdeki ultrastrüktürel değişikliklerin ömür boyu elektron mikroskobik incelemesi, ışık mikroskobu verilerini tamamlamayı ve teşhis değerlerini artırmayı mümkün kılar.

Bu bağlamda, hepatik HSC'lerin tanımlanması, transdiferansiasyon sürecinde fenotiplerinin incelenmesi ve proliferasyonlarının yoğunluğunun belirlenmesi, karaciğer hastalıklarının sonuçlarının tahmin edilmesinin yanı sıra patomorfoloji ve fibrogenezin patofizyolojisi.

Amaç - intravital karaciğer biyopsi örneklerinin sitolojik tanımlama sonuçlarına dayanarak HCI'nin yapısal ve fonksiyonel özelliklerini sunmak.

Malzemeler ve yöntemler

tarafından intravital karaciğer biyopsisi alındı. aspirasyon biyopsisi Yazılı bilgilendirilmiş onam alınan KHC (HCV+ RNA) hastalarında karaciğer.

Yarı ince kesitlerin ışık mikroskobu için, 0,5 x 2 mm boyutlarındaki hastaların karaciğer biyopsi örnekleri çift fiksasyon ile sabitlendi: önce Sato Taizan yöntemine göre, daha sonra doku örnekleri ek olarak 1 saat boyunca %1 oranında fikse edildi. 0.1 M fosfat Sorensen tamponu, pH 7.4 üzerinde hazırlanan osmiyum fiksatif. Potasyum dikromat (K2Cr2O7) veya kromik anhidrit kristalleri (1 mg/mL) %1 osmiyum tetroksite ilave edilerek yarı ince kesitlerde hücre içi yapıları ve interstisyel maddeyi daha iyi ortaya çıkardı. Bir serideki numunelerin dehidrasyonundan sonra alkol çözeltileri artan konsantrasyon ve aseton ile önceden polimerize edilmiş bir butil metakrilat ve stiren karışımına yerleştirildiler ve 55°C'de polimerize edildiler. Yarı ince kesitler (1 µm kalınlığında) sırayla boyandı

masmavi II-temel fuksin. Mikrograflar bir dijital video kamera (Leica FC 320, Almanya) kullanılarak elde edildi.

0,1 M Millonig tamponu, pH 7.4, +40C'de 2 saat boyunca %1'lik bir osmiyum tetroksit çözeltisi ile sabitlenmiş, 0.5x1.0 mm boyutundaki karaciğer biyopsi numunelerinin numunelerinde elektron mikroskobik bir çalışma gerçekleştirilmiştir. Artan alkoller ve asetonda dehidrasyondan sonra numuneler araldite döküldü. Elde edilen bloklardan bir Leica EM VC7 ultramikrotomu (Almanya) üzerinde yarı ince kesitler (400 nm) hazırlandı ve metilen mavisi ile boyandı. Preparatlar bir ışık mikroskobu altında incelendi ve ultrastrüktürel değişikliklerin daha ileri çalışması için tek tip bir bölge seçildi. Ultra ince kesitler (35 nm), E.S. Reynolds'a göre %50 metanol ve kurşun sitrat içinde %2 uranil asetat ile zıt boyandı. Elektron mikroskobik preparasyonlar, bir JEM-1011 elektron mikroskobu (JEOL, Japonya) kullanılarak, 80 kW'lık bir hızlanma voltajında ​​10.000–60.000 büyütmede incelenmiştir. Görüntü elde etmek için bir Olympus MegaViewIII dijital kameradan (Almanya) ve iTEM görüntü işleme yazılımından (Olympus, Almanya) bir kompleks kullanıldı.

sonuçlar ve tartışma

HSC'ler, hepatositler ve endotel hücreleri arasındaki ceplerde perisinüzoidal boşlukta (Disse) bulunur; hepatositler arasında derinlemesine nüfuz eden uzun süreçlere sahiptirler. Bu HSC popülasyonuna adanan yayınların çoğunda, yalnızca HSC'lerin karaciğerdeki "bölgesel" ilişkisini ve çevredeki "komşuları" ile ilgili olarak belirlemeye izin veren şematik gösterimleri verilmiştir (Şekil 1).

HSC'ler, tamamlanmamış bir bazal membranın bileşenleri ve interstisyel kollajen lifleri yoluyla endotel hücreleri ile yakın temas halindedir. Sinir uçları, SC ve parankimal hücreler arasına nüfuz eder, bu nedenle Disse boşluğu, parankimal hücrelerin plakaları arasındaki boşluk olarak tanımlanır ve

HCI ve endotel hücrelerinin bir kompleksi.

HSC'lerin enine septumun zayıf farklılaşmış mezenkimal hücrelerinden kaynaklandığına inanılmaktadır. karaciğer geliştirmek. Deney, hematopoietik kök hücrelerin HSC'lerin oluşumunda rol oynadığını ve bu sürecin hücre füzyonundan kaynaklanmadığını buldu.

Sinüzoidal hücreler (SC'ler), öncelikle HSC'ler, her türlü karaciğer rejenerasyonunda lider bir rol oynar. Karaciğerin fibroz rejenerasyonu, HSC ve kök hücrelerin kök fonksiyonlarının inhibisyonu sonucu oluşur. kemik iliği. İnsan karaciğerinde, HSC'ler, mezenkimal kökenli 4 çeşit SC'den biri olan %5-15'ini oluşturur: Kupffer hücreleri, endoteliyositler ve Pb hücreleri. SC havuzu ayrıca %20-25 lökosit içerir.

HCI sitoplazmasında retinol, trigliseritler, fosfolipidler, kolesterol, serbest yağ içeren inklüzyonlar vardır. yağ asidi, a-aktin ve desmin. ZKI, altın klorür boyaması kullanılarak görselleştirilir. Deneyde, diğer miyofibroblastlardan HKI farklılaşmasının belirtecinin, onların reelin proteininin ifadesi olduğu bulundu.

HSC'ler, her biri gen ekspresyonu ve fenotip (a-IgMA, ICAM-1, kemokinler ve sitokinler) ile karakterize edilen, hareketsiz ("aktif olmayan HSC"), geçici ve uzun süreli aktif durumda bulunur.

Aktif olmayan bir durumdaki HSC'ler yuvarlak, hafif uzun veya düzensiz bir şekle, büyük bir çekirdeğe ve parlak bir görsel işarete sahiptir - retinol içeren lipit kapanımları (damlalar) (Şekil 2).

Aktif olmayan bir HSC'deki lipid damlacıklarının sayısı 30'a veya daha fazlasına ulaşır, boyutları birbirine yakındır, birbirine bitişiktir, çekirdeğe baskı yapar ve onu çevreye doğru iter (Şekil 2). Büyük damlalar arasında küçük kapanımlar bulunabilir. Damlaların rengi fiksatife ve malzemenin rengine bağlıdır. Bir durumda açık renklidirler (Şekil 2a), diğerinde koyu yeşildirler (Şekil 2b).

Şekil 1. Disse'nin perisinüzoidal alanında (Disse alanı), İnternet kaynağında ICH'nin (yıldız hücre, perisinüzoidal liposit) konumunun şeması

Şekil 2. - Aktif olmayan durumdaki CCİ'ler

a - yüksek miktarda açık renkli lipid damlacıkları (beyaz oklar), harap sitoplazmalı (siyah ok) hepatositler (Hz) içeren yuvarlak şekilli HCI; b - Bir makrofaj (Mf) ile yakın temas halinde olan koyu lipid damlacıkları olan HCI; a-b - yarı ince bölümler. Masmavi II boyama - temel macenta. Mikrograflar. Artırılmış 1000; c - Düzensiz bir şekle sahip (büyüklük 6.000) bol miktarda lipid damlacıkları (30'dan fazla) olan HCI; HCI'nin d-ultrastrüktürel bileşenleri: l-lipid damlaları, mitokondri (turuncu oklar), GRES (yeşil oklar), Golgi kompleksi (kırmızı ok), sw. 15.000; cd - elektronogramlar

Elektron mikroskobu ile, hafif bir lipid substratının arka planına karşı daha ozmiofilik bir marjinal kenar oluşur (Şekil 5a). Çoğu "dinlenme" HSC'de, büyük lipid kapanımları ile birlikte, mitokondri (Mx) ve granüler endoplazmik retikulum (GRES) bakımından zayıf, fark edilir derecede az miktarda sitoplazmik matris vardır. Aynı zamanda, orta derecede gelişmiş bir Golgi kompleksinin bölmeleri, uçları hafifçe genişletilmiş 3-4 düzleştirilmiş sarnıç yığını şeklinde açıkça görülmektedir (Şekil 2d).

Belirli koşullar altında, aktive edilmiş HSC'ler, birleştiren karışık veya geçişli bir fenotip kazanır. morfolojik özellikler ve lipid içeren ve fibroblast benzeri hücreler (Şekil 3).

HCI'nin geçiş fenotipi de kendi morfolojik özelliklerine sahiptir. hücre alır uzatılmış şekil, lipid kapanımlarının sayısı azalır ve nükleolemma invajinasyonlarının sayısı azalır. Bağlı ribozomlara ve serbest ribozomlara sahip çok sayıda GRES sarnıcı içeren sitoplazmanın hacmi artar, Mx. 3-8 düzleştirilmiş sarnıçtan oluşan birkaç yığınla temsil edilen lamellar Golgi kompleksinin bileşenlerinin hiperplazisi, bozulmaya dahil olan lizozomların sayısında bir artış vardır.

Şekil 3. - Geçiş durumunda olan ZKI

a - ZKI (beyaz oklar). Yarı kesim. Masmavi II boyama - temel macenta. Mikrograf. Artırılmış 1000; b - Uzatılmış bir şekle ve az miktarda lipid damlacıklarına sahip ZKI; uv. 8000; c - Kupffer hücreleri (CC) ve lenfosit (Lc), SW ile temas halinde HCI. 6000. (Hz - hepatosit, l - lipid damlaları, E - eritrosit); d - mitokondri (turuncu oklar), GRES (yeşil oklar), c Goldji (kırmızı ok), lizozomlar (mavi oklar), magn. b, c, d - elektron kırınım modelleri

lipid damlacıkları (Şekil 3d). GRES bileşenlerinin ve Golgi kompleksinin hiperplazisi, fibroblastların kolajen moleküllerini sentezleme ve ayrıca onları endoplazmik retikulumda ve Golgi kompleksinin elementlerinde translasyon sonrası hidroksilasyon ve glikosilasyon yoluyla modelleme yeteneği ile ilişkilidir.

Sağlam bir karaciğerde, sakin bir durumda olan HCI, süreçleri ile sinüzoidal kılcal damarları kaplar. HCI süreçleri 2 tipe ayrılır: perisinüzoidal (subendotelyal) ve interhepatoselüler (Şekil 4).

Birincisi hücre gövdesini terk eder ve sinüzoidal kılcal damarın yüzeyi boyunca uzanır ve onu parmak benzeri ince dallarla kaplar. Kısa villuslarla kaplıdırlar ve kılcal endotel tüpünün yüzeyi boyunca daha da uzanan karakteristik uzun mikro çıkıntılara sahiptirler. Hepatosit plakasını aşan ve komşu sinüzoide ulaşan interhepatoselüler büyümeler, birkaç perisinüzoidal büyümeye ayrılır. Böylece, FQI ortalama olarak ikiden fazla bitişik sinüzoidi kapsar.

Karaciğer hasarı ile HSC'nin aktivasyonu ve 3 fazın ayırt edildiği fibrogenez süreci meydana gelir. Bunlar başlama, uzama ve çözülme (fibröz dokunun çözülmesi) olarak adlandırılır. "Dinlenme" HSC'lerin fibrozan miyofibroblastlara dönüşüm süreci sitokinler (^-1, ^-6,

Şekil 4. - HCI'nin perisinüzoidal (subendotelyal) ve interhepatoselüler süreçleri (büyümeleri)

(a) hücre gövdesinden çıkan ZKI (sarı oklar) süreci, uv. 30.000; b - bir lipid damlası, SW içeren, sinüzoidal kılcal damarın yüzeyi boyunca yer alan bir HCI işlemi. 30.000; (c) HCI'nin endotel altı yerleşimli süreçleri. Endotel hücrelerinin süreçleri (pembe oklar); d - HCI'nin interhepatoselüler süreci; HCI ve hepatosit (siyah oklar) zarlarının tahribat alanı, şişmiş 10 000. Elektronogramlar

TOT-a), az oksitlenmiş metabolik ürünler, reaktif oksijen türleri, nitrik oksit, endotelin, trombosit aktive edici faktör (PDGF), plazminojen aktivatör, dönüştürücü büyüme faktörü (TGF-1), asetaldehit ve diğerleri. Doğrudan aktivatörler, oksidatif stres durumundaki hepatositler, Kupffer hücreleri, endoteliyositler, lökositler, sitokin üreten trombositler (parakrin sinyalleri) ve ZKI'nin kendisidir (otokrin uyarımı). Aktivasyona, yeni genlerin ifadesi (işe dahil edilmesi), hücre dışı matrisin sitokinlerinin ve proteinlerinin sentezi (kollajenler I, III, Y tipleri) eşlik eder.

Bu aşamada, HSC'lerde hasarlı bölgedeki makrofajlar tarafından TOT-a üretimini engelleyen anti-inflamatuar sitokinlerin oluşumunu uyararak HSC'lerin aktivasyon süreci tamamlanabilir. Sonuç olarak, HSC'lerin sayısı keskin bir şekilde azalır, apoptoza uğrarlar ve karaciğerde fibroz süreçleri gelişmez.

Aktive edici uyaranlara uzun süreli sabit parakrin ve otokrin maruziyeti ile ikinci fazda (uzun süreli), HSC'nin hücre dışı fibriller kollajen sentezleyen kasılmalı miyofibroblast benzeri hücrelere dönüşümü ile karakterize edilen aktif bir fenotip HSC'de "korunur".

Aktive fenotip, proliferasyon, kemotaksi, kontraktilite, retinoid depolarının kaybı ve myofibroblastik hücrelere benzeyen hücrelerin oluşumu ile karakterize edilir. Aktive edilmiş ZKI'ler de göstermektedir artan içerik a-SMA, ICAM-1, kemokinler ve sitokinler gibi yeni genler. Hücre aktivasyonu, fibrogenezin erken bir aşamasının başlangıcını gösterir ve ECM proteinlerinin artan üretiminden önce gelir. Ortaya çıkan fibröz dokular, matris metalloproteinazların (matriksmetaloproteinazlar - MMP'ler) yardımıyla matris bölünmesi nedeniyle yeniden şekillenir. Buna karşılık, matris parçalanması, MMP'lerin doku inhibitörleri (matriks metaloproteinazların doku inhibitörleri - TIMP'ler) tarafından düzenlenir. MMP'ler ve TIMP'ler çinko bağımlı enzim ailesinin üyeleridir. MMP'ler, HSC'lerde, propeptid bölünmesi üzerine aktive olan ancak endojen TIMP'ler, TIMP'ler-1 ve TIMP'ler-2 ile etkileşim üzerine inhibe edilen aktif olmayan proenzimler olarak sentezlenir. HSC'ler, IL-1 p tarafından aktive edilen 4 tip membran tipi MMP üretir. MMP'ler arasında, bazal membranın bir parçası olan tip 4 kollajene ve kısmen denatüre tip 1 ve 5 kollajenlere karşı aktiviteye sahip olan bir nötr matriks metalloproteinaz olan MMPs-9 özellikle önemlidir.

Çeşitli karaciğer hasarı tiplerine sahip HCI popülasyonunda bir artış, önemli sayıda mitojenik faktörün, ilgili tirozin kinaz reseptörlerinin ve HKI'nin en belirgin proliferasyonuna neden olan diğer tanımlanmış mitojenlerin aktivitesi ile değerlendirilir: endotelin-1, trombin, FGF - fibroblast büyüme faktörü, PDGF - endotelyal büyüme faktörü damarları, IGF - insülin benzeri büyüme faktörü. HSC'lerin karaciğer hasarı alanlarında birikmesi, sadece bu hücrelerin proliferasyonu nedeniyle değil, aynı zamanda PDGF ve lökosit kemoatraktan-MCP (monosit kemotaktik protein- 1) .

Aktive edilmiş HSC'lerde lipid damlacıklarının sayısı hücrenin zıt kutuplarında konumlandıkları için 1-3'e düşürülür (Şekil 5).

Aktive edilmiş HSC'ler uzun bir şekil alır, sitoplazmanın önemli alanları Golgi kompleksi tarafından işgal edilir, çok sayıda GRES sarnıcı ortaya çıkar (ihracat için protein sentezinin bir göstergesi). Diğer organellerin sayısı azalır: az sayıda serbest ribozom ve polisom, tek mitokondri ve düzensiz lizozom bulunur (Şekil 6).

2007'de HSC'ler, hematopoietik mezenkimal kök hücrelerin belirteçlerinden biri olan CD133'ü ifade ettikleri için ilk olarak karaciğer kök hücreleri olarak adlandırıldı.

Şekil 5. - Etkinleştirilmiş durumdaki CCI'ler

a, b - Çekirdeğin zıt kutuplarında lokalize tek lipid kapanımlarına sahip HCI (mavi oklar). perisinüzoidal bağ dokusu(Şekil 6a'da) ve hepatosit çevresindeki hücreler arası matris tabakası (Şekil 6b'de) kırmızı ile boyanmıştır. Sitotoksik lenfositler (mor oklar). Endotel hücresi (beyaz ok). Plazma hücresi (kırmızı ok) ve hepatosit arasındaki yakın temas. Yarı ince kesimler. Masmavi II boyama - temel macenta. Mikrograflar. Artırılmış 1000 ; c, d - HCI'nin ultrastrüktürel bileşenleri: mitokondri (turuncu oklar), Golgi kompleksi (kırmızı ok), daha ozmiofilik cis tarafına bakan, granüler endoplazmik retikulumun genişletilmiş elemanlarının sarnıçları (yeşil oklar), lizozom (mavi ok) (magn .sırasıyla 10.000 ve 20.000); c, d - elektron kırınım modelleri

Normal karaciğerde bulunmayan miyofibroblastların üç potansiyel kaynağı vardır: birincisi karaciğerin intrauterin gelişimi sırasındadır; portal yollarda miyofibroblastlar damarları çevreler ve Safra Yolları olgunlaşmaları sırasında ve karaciğerin tam gelişmesinden sonra kaybolurlar ve portal yollarda portal fibroblastlar tarafından değiştirilirler; ikincisi - karaciğer hasarı ile, portal mezenkimal hücreler ve istirahat HSC'leri nedeniyle, daha az sıklıkla geçiş epitelyal-mezenkimal hücreler nedeniyle oluşurlar. CD45-, CD34-, Desmin+, (GFAP)+ ve Thy-1+ ile bağlantılı glial fibriller proteinin varlığı ile karakterize edilirler.

Son çalışmalar hepatositler, kolanjiyositler ve endotel hücrelerinin epitelyal veya endotelyal-mezenkimal geçiş (EMT) yoluyla miyofibroblastlar haline gelebileceğini göstermiştir. Bu hücreler, CD45-, albümin+ (yani hepatositler), CD45-, CK19+ (yani kolanjiyositler) veya Tie-2+ (endotel hücreleri) gibi belirteçleri içerir.

Şekil 6. - HSC'nin yüksek fibrotik aktivitesi

a, b - miyofibroblast (Mfb), hücre büyük bir çekirdek, GRES elemanları (kırmızı oklar), çok sayıda serbest ribozom, polimorfik veziküller ve granüller, tek mitokondri ve parlak bir görselleştirme işareti içerir - sitoplazmada (sarı) bir aktin filamenti demeti oklar); uzaklaştırdı. 12.000 ve 40.000; c, d, e, f - sitoplazmada retinoid içeren lipid damlacıklarının tutulması ile HSC'nin yüksek fibrotik aktivitesi. Çok sayıda kolajen fibril demeti (beyaz oklar) (a) korundu ve (d, e, f) spesifik enine çizgiyi kaybetti; uzaklaştırdı. 25.000, 15.000, 8.000, 15.000 Elektronogramlar

Ayrıca fibrositlerden ve dolaşan mezenkimal hücrelerden oluşan kemik iliği hücreleri miyofibroblastlara dönüşebilir. Bunlar CD45+ (fibrositler), CD45+/- (dolaşan mezenkimal hücreler), kollajen tip 1+, CD11d+ ve MHC sınıf 11+'dır (Şekil 7).

Literatür verileri sadece oval hücrelerin proliferasyonu ile sinüzoidal hücrelerin proliferasyonu arasındaki yakın ilişkiyi doğrulamakla kalmaz, aynı zamanda HSC'nin perisinüzoidal hücrelerin mezenkimal-epitelyal transformasyonu olarak adlandırılan hepatik epitele olası farklılaşmasına ilişkin verileri de doğrular.

Fibrojenik aktivasyon durumunda, miyofibroblast benzeri HSC'ler, lipid damlacıklarının sayısında bir azalma ve ardından kaybolması ile birlikte, fokal proliferasyon (Şekil 8), düz kas a-aktin dahil olmak üzere fibroblast benzeri belirteçlerin immünohistokimyasal ekspresyonu ile karakterize edilir. ve Disse boşluklarında perisellüler kollajen fibrillerinin oluşumu.

Fibrozisin gelişme aşamasında, karaciğer dokusunun artan hipoksisi, kök hücrelerde pro-inflamatuar yapışma moleküllerinin ek aşırı ekspresyonunda bir faktör haline gelir - 1CAM-1, 1CAM-2, VEGF, proinflamatuar

Duktal hepatik progenitör hücrelerin karaciğer miyofibroblastları ile etkileşimi

Fibrojenik aktivasyon durumunda miyofibroblast benzeri HSC'ler.

Şekil 7. - HSC'nin miyofibroblastik aktivasyonunun katılımcıları

güçlü kemoatraktanlar - M-CSF, MCP-1 (monosit kemotaktik protein-1) ve SGS (sitokin aracılı nötrofil kemoatraktan) ve proinflamatuar sitokinlerin oluşumunu uyaran diğerleri (TGF-b, PDGF, FGF, PAF, SCF, ET-1 ) ve karaciğerdeki fibrogenez süreçlerini geliştirerek, devam eden HSC aktivasyonunun ve fibrogenez süreçlerinin kendi kendine devam eden indüksiyonu için koşullar yaratır.

Mikroskobik müstahzarlarda, perikapiller fibroz, perisinüzoidal bağ dokusunun ve hepatositlerin etrafındaki (genellikle ölmekte olan) hücreler arası matris tabakasının kırmızı renkte yoğun renklenmesi şeklinde kendini gösterir. Elektron mikroskobik preparasyonlarda, fibrotik değişiklikler, ya enine çizgiyi koruyan kollajen liflerinin oluşturduğu büyük demetler şeklinde ya da büyük bir formda görselleştirilir.

Periyodik çizgilerini kaybetmiş, şişmiş kollajen lifleri olan Disse fibröz kitlesinin boşluğunda birikintiler (Şekil 9).

İle modern fikirler fibrozis ilerleyebilen ve gerileyebilen dinamik bir süreçtir (Şekil 10).

Son zamanlarda, birkaç spesifik ICD belirteci önerilmiştir: lipid damlacıklarında A vitamini (VA), GFAP, p75 NGF reseptörü ve sinaptofizin. Karaciğer kök hücrelerinin proliferasyonu ve farklılaşmasında karaciğer HCI'nin rolü üzerine çalışmalar yürütülmektedir.

VA ile bir kompleks oluşturan retinol bağlayıcı proteinin (RBP-4) içeriğini inceledik ve konsantrasyonu kan plazmasındaki normal olarak vücudun %80'i HCI içinde olan VA ile sağlanması ile ilişkilidir.

içerik arasındaki ilişki

Şekil 8. - Fibrojenik aktivasyon durumunda HSC'nin fokal proliferasyonu

a - dilate sinüzoidlerin lümeninde HCI hiperplazisi (beyaz oklar); b - transdiferansiye HSC'lerin (beyaz oklar), endotel hücresinin (pembe ok) proliferasyonu. Yarı ince kesimler. Masmavi II boyama - temel macenta. Mikrograflar. Artırılmış 1000

Şekil 9. - HSC'nin miyofibroblastik aktivasyonunun son aşaması

a, b - perisinüzoidal fibroz (beyaz oklar). Peri-sinüzoidal bağ dokusu ve hepatositlerin (b) etrafındaki hücreler arası matris tabakası, bazik fuksin ile kırmızıya boyanmıştır. HSC'ler aktive edildi ve fibroblastlara dönüştü (mavi oklar). Şek. a - harap sitoplazmalı hepatosit. Yarı ince kesimler. Masmavi II boyama - temel macenta. Mikrograflar. Artırılmış 1000; c, d - karaciğer lobülünde perisinüzoidal ve perihepatoselüler fibroz, kollajen lif fibrillerinin elektron yoğunluğunun artması; hepatositte mitokondriyal matrisin yoğunlaşması (turuncu ok). Sırasıyla 8.000 ve 15.000'i artırın. elektronogramlar

Tablo 1. Çeşitli etiyolojilere sahip karaciğer sirozu (LC) ve kronik hepatit (CH) hastalarında RBP-4 içeriği göstergeleri, ng/ml (M±m)

Grup n M±m p

Karaciğer sirozu 17 23,6±2,29<0,05

CG, ASAT normu 16 36,9±2,05* >0,05

CG, ASAT >2 norm 13 33,0±3,04* >0,05

CG, ALT normu 13 37,5±3,02* >0,05

CG, ALT >2 norm 21 35,9±2,25* >0,05

Kontrol 15 31.2±2.82

Not: p - kontrol ile önemli farklılıklar (p<0,05); * - достоверные различия между ЦП и ХГ (р<0,05)

Fibröz bir septum ve fibröz bir septumla çevrili yalancı lobül. Masso'ya göre boyama - sahte bir lobül çemberi. u.Uv.x50 Masson'a göre boyama. x200'ü artır

Şekil 10 - Otolog mezenkimal kök hücrelerin karaciğere naklinden 6 ay sonra viral sirozlu bir hastanın yalancı lobülündeki olayların dinamikleri

Karaciğerdeki iltihaplanma aktivitesinin biyokimyasal belirteçlerinden bağımsız olarak, böyle bir bağımlılığın gözlenmediği kronik hepatitin aksine, RBP-4 ve fibrozun 4. aşamasını (siroz) yiyorum.

Bu gerçek, karaciğerdeki fibrozisin ilerlemesi nedeniyle BİT potansiyelinin tükenmesinden kaynaklanabilecek vücuttaki VA eksikliğini ortadan kaldırmak için replasman tedavisini doğrularken dikkate alınmalıdır.

1. HCI'nin yapısal ve fonksiyonel durumunun değerlendirilmesinin maksimum etkinliği, bir hücre görselleştirme teknikleri kompleksinin (ışık, ultra ince bölümlerin elektron mikroskobu ve orijinal yöntemlerin) eşzamanlı kullanımı ile bir intravital biyopsi örneğinin morfolojik bir çalışması ile sağlanır. sabitleme ve boyama).

2. HCI'nin morfolojik çalışmasının sonuçları, fibrozisin in vivo teşhisinin kalitesini iyileştirmeye, onu izlemeye ve kronik yaygın karaciğer lezyonlarının sonuçlarını daha yüksek bir modern seviyede tahmin etmeye izin verir.

3. Morfolojik sonuçların sonuçları, klinisyenin nihai teşhisin formülasyonuna terapi sırasında kroniklik aşaması (stabilizasyon, ilerleme veya fibrozun çözülmesi) hakkında rafine verileri ek olarak dahil etmesine izin verecektir.

Edebiyat

1. Ivashkin, V. T. Fibrotik öncesi değişikliklerin klinik belirtileri: Tüm Rusya İnternet İç Hastalıkları Uzmanları Kongresi dersinin bir kopyası / V. T. Ivashkin, A. O. Bueverov // DAHİLİ: Ulusal İnternet İç Hastalıkları Uzmanları Derneği. - 2013. - Erişim modu: http://internist. ru/yayınlar/detay/6569/. - Erişim tarihi: 21.11.2016.

2. Kiyasov, A.P. Oval hücreler - varsayılan karaciğer kök hücreleri mi yoksa hepatoblastlar mı? / A.P. Kiyasov, A.A. Gumerova, M.A. Titova // Hücre transplantolojisi ve doku mühendisliği. - 2006. - C. 2, No. 4. - S. 55-58.

1. Ivashkin, V. T. Klinicheskaya simptomatika dofibroticheskih izmenenij: stenogramma lekcii Vserossijskogo Internet-Kongressa uzmanıov po vnutrennim boleznyam / V. T. Ivashkin, A. O. Bueverov // INTERNIST: http://www.internist.com http://www.internist.org : Rezhipa 20 do13. - //internist.ru/publications/detail/6569/ - Erişilen veri: 21/11/2016.

2. Kiyasov, A.P. Oval "nye kletki - predpolagaemye stvolovye kletki pecheni veya gepatoblasty? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Kletochnaya transplantologiya i tkanevaya inzheneriya. - 2006. - 4. S. - 55. - 2006. - 4. S. - 58.

3. Sağlıklı ve hasarlı bir karaciğer için rejeneratif bir strateji sağlamada sinüzoidal karaciğer hücreleri ve kemik iliği hücrelerinin rolü hakkında / A. V. Lundup [ve diğerleri] // Transplantoloji ve yapay organlar bülteni. -2010. - T. XII, No. 1. - S. 78-85.

4. Serov, V. V. Viral kronik hepatit B ve C / V. V. Serov, L. O. Severgina // Patoloji Arşivi'nde etiyolojiyi, aktivite derecesini ve sürecin aşamasını değerlendirmek için morfolojik kriterler. - 1996. - No. 4. - S. 61-64.

5. Fibrozis dinamiklerinde karaciğer yıldız hücrelerinin yapısal ve fonksiyonel özellikleri / OA Postnikova [et al.] // Temel araştırma. - 2011. - Hayır. 10.

6. Enfeksiyöz viral oluşumun fibrozisi ve sirozu dinamiklerinde karaciğer yıldız hücrelerinin ultrastrüktürel ve immünohistokimyasal çalışması / G. I. Nepomnyashchikh [ve diğerleri] // Deneysel biyoloji ve tıp bülteni. - 2006. - T. 142, No. 12. - S. 681-686.

7. Shcheglev, AI Sinüzoidal karaciğer hücrelerinin yapısal ve metabolik özellikleri / AI Shcheglev, OD Mishnev // Modern biyolojinin başarıları. - 1991. - V. 3, No. 1. - S. 73-82.

10. Diyet retinoidi ve trigliseritin sıçan karaciğer yıldız hücrelerinin ve yıldız hücre lipid damlacıklarının lipid bileşimi üzerindeki etkileri / H. Moriwaki // J. Lipid. Araş. - 1988. - Cilt. 29. - R. 1523-1534.

13. Friedman, S. Hepatik fibrozis 2006: Üçüncü AASLD Tek Konu Konferansı Raporu / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - Cilt. 45(1). - R.242-249.

18. Iredale, J. P. Karaciğer Hasarının Çözülmesi Sırasında Hepatik Yıldız Hücre Davranışı / J. P. Iredale // Semin. Karaciğer Dis. -2001. - Cilt 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Hepatik stellat hücrelerde ve hepatik doku onarımı sırasında reelin ifadesi: HSC'nin diğer karaciğer miyofibroblastlarından farklılaşması için yeni bir belirteç / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Cilt. 36(5). - R.607-613.

20. Lepreux, S. Portal (myo) odaklı gelişim ve hastalıklar sırasında insan karaciğer miyofibroblastları

3. O roli sinüzoidal "nyh kletok pecheni i kletok kostnogo mozga v obespechenii regeneratornoj strategii zdorovoj i povrezhdennoj pecheni / A. V. Lyundup // Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov. - 2010. - T. HII. - 2010. - T. HII. .

4. Serov, V. V. Morfologicheskie kriterii ocenki ehtiologii, stepeni aktivnosti ve stadii prosesa pri virüsnyh chrononiccheskih gepatitah V i S / V. V. Serov, L. O. Severgina // Arhiv patologii.

1996. - No. 4. - S. 61-64.

5. Strukturno-funkcional "naya harakteristika zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza / O. A. Postnikova // Temel" nye issledovaniya. - 2011. - No. 10. - C. 359-362.

6. Ul "trastrukturnoe i immunogistohimicheskoe issledovanie zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza i cirroza pecheni infekcionno-virusnogo geneza / G. I. Nepomnyashchih // Byulleten" ehksperimental "nojologii. - 6 - 6. 686.

7. SHCHeglev, A. I. Strukturno-metabolicheskaya harakteristika sinüzoidal "nyh kletok pecheni / A. I. SHCHeglev, O. D. Mishnev // Uspekhi sovremennoj biologii. - 1991. - T. 3, No. 1. - S. 73-82.

8. CD34 hepatik yıldız hücreleri progenitör hücrelerdir / C. Kordes // Biochem., Biophys. Araş. Yaygın. - 2007. - Cilt. 352(2). - S. 410-417.

9. Karaciğer fibrozunda matris proteinlerinin bozulması / M. J. Arthur // Pathol. Araş. Pratik yapın. - 1994. - Cilt. 190(9-10).

10. Diyet retinoidi ve trigliseritin sıçan karaciğer yıldız hücrelerinin ve yıldız hücre lipid damlacıklarının lipid bileşimi üzerindeki etkileri / H. Moriwaki // J. Lipid. Araş. - 1988. - Cilt. 29. - R. 1523-1534.

11. Fetal karaciğer, epitelyal-mezenkimal geçişteki hücrelerden oluşur / J. Chagraoni // Kan. - 2003. - Cilt. 101. - S. 2973-2982.

12. Biyolojik örneklerin fiksasyonu, dehidrasyonu ve gömülmesi / A. M. Glauert // Elektron Mikroskobunda Pratik Yöntemler. - New York: Am. Elsevier, 1975. - Cilt. 3, bölüm 1.

13. Friedman, S. Hepatik fibrozis 2006: Üçüncü AASLD Tek Konu Konferansı Raporu / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - Cilt. 45(1). - R.242-249.

14. Gaga, M.D. İnsan ve rathepatik yıldız hücreleri kök hücre faktörü üretir: karaciğer fibrozunda mast hücre alımı için olası bir mekanizma / M.D. Gaga // J. Hepatol. - 1999. - Cilt. 30, No. 5. - S. 850-858.

15. Glauert, Elektron mikroskobu için gömme ortamı olarak A.M. Araldite / A.M. Glauert, R.H. Glauert // J. Biophys. Biyokimya. sitol. - 1958. - Cilt. 4. - S. 409-414.

16. Hepatik stellat hücreler ve portal fibroblastlar, normal karaciğerde ve yaralanmadan hemen sonra kollajen ve lisil oksidazların başlıca hücresel kaynaklarıdır / M. Perepelyuk // Am. J Physiol. mide testi. Karaciğer Fizol. - 2013. - Cilt. 304(6). - S. 605614.

17. Hepatit C virüsü çekirdeği ve yapısal olmayan proteinler, hepatik stellat hücrelerde fibrojenik etkilere neden olur / R. Bataller // Gastroenterology. - 2004. - Cilt. 126, is. 2. - S. 529-540.

18. Iredale, J. P. Karaciğer Hasarının Çözülmesi Sırasında Hepatik Yıldız Hücre Davranışı / J. P. Iredale // Semin. Karaciğer Dis. -2001. - Cilt 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Hepatik stellat hücrelerde ve hepatik doku onarımı sırasında reelin ifadesi: HSC'nin diğer karaciğer miyofibroblastlarından farklılaşması için yeni bir belirteç / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Cilt. 36(5). - R.607-613.

20. Lepreux, S. Portal (myo) fibroblastlarına odaklanan gelişim ve hastalıklar sırasında insan karaciğer miyofibroblastları / S. Lepreux, A. Desmouliére

fibroblastlar / S. Lepreux, A. Desmoulière // Ön. fizik. - 2015. - Erişim modu: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Erişim tarihi: 31.10.2016.

22. HCV İlişkili Karaciğer Sirozu Olan Hastalarda Mezenkimal Kemik İliği Kaynaklı Kök Hücre Nakli / S. Lukashyk // J. Clin. Tercüme hepatol. - 2014. - Cilt. 2, is. 4. - S. 217-221.

23. Millonig, G. A. Fiksasyonda osmiyum tetroksit çözeltileri için bir fosfat tamponunun avantajları / G. A. Millonig // J. Appl. Fizik. - 1961. - Cilt. 32. - S. 1637-1643.

Cilt 158. - S. 1313-1323.

Cilt 24. - S. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskobische Nachweis von Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Cilt. 14. - S. 1213-1217.

30. Miyofibroblast biyolojisindeki son gelişmeler: bağ dokusunun yeniden şekillenmesi için paradigmalar / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Cilt. 180. - S. 1340-1355.

35. Septum transversum kaynaklı mezotelyum, gelişen fare karaciğerinde hepatik stellat hücrelere ve perivasküler mezenkimal hücrelere yol açar / K. Asahina // Hepatology. -2011. - Cilt 53.-S. 983-995.

Cilt 50.-S. 66-71.

38. Thabut, D. Kronik karaciğer hastalığında intrahepatik anjiyogenez ve sinüzoidal yeniden şekillenme: portal hipertansiyon tedavisi için yeni hedefler? / D. Thabut, V. Şah // J. Hepatol. - 2010. - Cilt. 53. - S. 976-980.

39. Wake, K. Hepatik yıldız hücreler: Üç boyutlu yapı, lokalizasyon, heterojenlik ve gelişim / K.

// ön. fizik. - 2015. - Erişim modu: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Erişim tarihi: 31.10.2016.

21. Hepatik yıldız hücrelerinde peroksizom proliferatörü ile aktive olan reseptör gama modülat profibrojenik ve proinflamatuar etkilerin ligandları / F. Marra // Gastroenterology. -2000. - Cilt 119. - S. 466-478.

22. HCV İlişkili Karaciğer Sirozu Olan Hastalarda Mezenkimal Kemik İliği Kaynaklı Kök Hücre Nakli / S. Lukashyk // J. Clin. Tercüme hepatol. - 2014. - Cilt. 2, is. 4.-R.217-221.

23. Millonig, G. A. Fiksasyonda osmiyum tetroksit çözeltileri için bir fosfat tamponunun avantajları / G. A. Millonig // J. Appl. Fizik. - 1961. - Cilt. 32. - S. 1637-1643.

24. Sıçan karaciğerinde erken çoğalan oval hücrelerin kökeni ve yapısal evrimi / S. Paku // Am. J. Hepatol. - 2001.

Cilt 158. - S. 1313-1323.

25. Karaciğer fibrozunda miyofibroblastların kökeni / D. A. Brenner // Fibrogenez Doku Onarımı. - 2012. - Cilt. 5 ek 1. - S. 17.

26. Karaciğer miyofibroblastlarının kökenleri ve işlevleri / S. Lemoinne // Biochim. Biyofiz. akta. - 2013. - Cilt. 1832(7). - S. 948-954.

27. Pinzani, M. PDGF ve karaciğer yıldız hücrelerinde sinyal iletimi / M. Pinzani // Ön. biosci. - 2002. - Cilt. 7. - S. 1720-1726.

28. Popper, H. Floresan mikroskobu ile ortaya çıkan dokuda A vitamini dağılımı / H. Popper // Physiol. Rev. - 1944.

Cilt 24.-R.205-224.

29. Querner, F. Der mikroskobische Nachweis von Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Cilt. 14. - R. 1213-1217.

30. Miyofibroblast biyolojisindeki son gelişmeler: bağ dokusunun yeniden şekillenmesi için paradigmalar / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Cilt. 180. - R. 1340-1355.

31. Reynolds, E. S. Elektron mikroskobunda elektronopak bir leke olarak yüksek pH'ta kurşun sitratın kullanımı / E. S. Reynolds // J. Cell. Biol. - 1963. - Cilt. 17. - S. 208-212.

32. Safadi, R. CD8 hücreleri tarafından hepatik fibrojenezin immün uyarılması ve hepatositlerden transgenik interlökin-10 ile zayıflama / R. Safadi // Gastroenteroloji. - 2004. - Cilt. 127(3). - S. 870-882.

33. Sato, T. Fosfat tamponlu formalinde daha uzun süreler boyunca sabitlenmiş numunenin elektron mikroskobik çalışması / T. Sato, I. Takagi // J. Electron Microsc. - 1982. - Cilt. 31, No. 4. - S. 423-428.

34. Senoo, H. A Vitamini Depolayan Hücreler (Yıldızlı Hücreler) / H. Senoo, N. Kojima, M. Sato // Vitam. Horm. - 2007. - Cilt. 75.

35. Septum transversum kaynaklı mezotelyum, gelişen fare karaciğerinde hepatik stellat hücrelere ve perivasküler mezenkimal hücrelere yol açar / K. Asahina // Hepatology. -2011. - Cilt 53.-R. 983-995.

36. Stanciu, A. ITO hücreleri hakkında yeni veriler / A. Stanciu, C. Cotutiu, C. Amalinei, Rev. Med. Chir. soc. Med. Nat. Yaş. -2002. - Cilt 107, No. 2. - S. 235-239.

37. Suematsu, M. Profesör Toshio Ito: perisit biyolojisinde bir kahin / M. Suematsu, S. Aiso // Keio J. Med. - 2000.

Cilt 50.-R.66-71.

38. Thabut, D. Kronik karaciğer hastalığında intrahepatik anjiyogenez ve sinüzoidal yeniden şekillenme: portal hipertansiyon tedavisi için yeni hedefler? / D. Thabut, V. Şah // J. Hepatol. - 2010. - Cilt. 53.-R. 976-980.

39. Wake, K. Hepatik stellat hücreler: Üç boyutlu yapı, lokalizasyon, heterojenlik ve gelişim / K. Wake // Proc. Jpn. Acad. Sör. B, Fizik Biol. bilim - 2006. - Cilt.

Uyan // Proc. Jpn. Acad. Sör. B, Fizik Biol. bilim - 2006. - Cilt. 82(4). - S. 155-164.

82(4). - S. 155-164.

40. Wake, K. Hepatik Sinusoid Hücrelerinde / K. Wake, H. Senoo // Kupffer Cell Foundation (Rijswijk, Hollanda). - 1986. - Cilt. 1. - S. 215-220.

41. Watson, M. L. Ağır metallerle elektron mikro için doku bölümlerinin boyanması / M. L. Watson // J. Biophys. Biyokimya. Cyt. - 1958. - Cilt. 4. - S. 475-478.

KARACİĞER KLİNİK SİTOLOJİSİ: ITO STELLATE HÜCRELERİ (HEPATİK STELLATE HÜCRELERİ)

Tsyrkunov V. M, Andreev V. P., Kravchuk R. I., Kandratovich I. A. Eğitim Kurumu "Grodno Devlet Tıp Üniversitesi", Grodno, Beyaz Rusya

giriiş. Ito stellat hücrelerinin (Hepatik Stellat Cells, HSC) rolü, karaciğer fibrozunun gelişiminde önde gelenlerden biri olarak tanımlanmıştır, ancak klinik uygulamada HSC yapılarının intravital görselleştirilmesinin kullanımı minimaldir.

Çalışmanın amacı, intravital karaciğer biyopsi örneklerinin sitolojik tanımlama bulgularına dayanarak HSC'nin yapısal ve fonksiyonel özelliklerini sunmaktır.

Malzemeler ve yöntemler. Biyopsi örneklerinin klasik ışık ve elektron mikroskobu yöntemleri, orijinal teknik içinde ultra ince kesitler, fiksasyon ve boyama uygulandı.

Sonuçlar. Kronik hepatit C'li hastalardan alınan karaciğer biyopsi örneklerinin HSC'sinin yapısal özellikleri, ışık ve elektron mikroskobunun fotoğraf çizimlerinde sunulmaktadır. HSC'ler farklı aşamalarda (dinlenme, aktivasyon) ve miyofibroblastlara dönüşüm süreci sırasında tasvir edilir.

Sonuçlar. Orijinal klinik ve morfolojik tanımlama yöntemlerinin kullanılması ve HSC'nin fonksiyonel durumunun değerlendirilmesi, karaciğer fibrozisinin tanı ve prognozunun kalitesini iyileştirmeye izin verir.

1

Enfeksiyöz viral kaynaklı fibroz ve siroz gelişiminin dinamiklerinde karaciğer yıldız hücre popülasyonunun ultrastrüktürel, immünohistokimyasal ve morfometrik analizi yapıldı. Lipid damlacıklarının azalması ve fibroblast benzeri özelliklerin senkronize ekspresyonu ile karakterize edilen karaciğer yıldız hücrelerinin fibrojenik aktivasyonu ortaya çıktı - düz kas a-aktinine karşı pozitif bir immünohistokimyasal reaksiyon, granüler sitoplazmik retikulumun hiperplazisi ve çok sayıda hücre içi oluşumu. kollajen fibrilleri. Fibrozis gelişimi sırasında lipid içeren stellat hücrelerin sayı yoğunluğundaki ilerleyici azalmaya rağmen, retinoidlerin birikme işlevini sürdürme ihtiyacının devam ettiği gösterilmiştir - karaciğer sirozunda, lipid içeren stellat hücreler bulundu. lifli septa ve lobüllerin içinde. Karaciğer yıldız hücrelerinin geniş bir fonksiyonel aktivite spektrumuna sahip polimorfik heterojen bir popülasyon olduğu sonucuna varıldı.

fibrogenez

karaciğerin yıldız hücreleri

üst yapı

immünohistokimya

1. Balabaud C., Bioulac-Sage P., Desmouliere A. Karaciğer stellat hücrelerinin karaciğer rejenerasyonundaki rolü // J. Hepatol. - 2004. - Cilt. 40. – S. 1023–1026.

2. Brandao D.F., Ramalho L.N.Z., Ramalho F.S. Karaciğer sirozu ve hepatik stellat hücreler // Acta Cirúrgica Brasileira. - 2006. - Cilt. 21. – S. 54–57.

3. Desmet V.J., Gerber M., Hoofnagle J.H. Kronik hepatitin sınıflandırılması: Tanı, derecelendirme ve evreleme // Hepatoloji. - 1994. - Cilt. 19. - S. 1523-1520.

4. Gabele E., Brenner D.A., Rippe R.A. Karaciğer fibrozu: Fibrojenik hepatik stellat hücrenin amplifikasyonuna yol açan sinyaller // Ön. Biosc. - 2003. - Cilt. 8. – S. 69–77.

5. Geerts A. Yıldız hücrelerinin kökeni hakkında: mezodermal, endodermal veya nöro-ektodermal? // J. Hepatol. - 2004. - Cilt. 40. – S. 331–334.

6. Gutierrez-Ruiz M.C., Gomez-Quiroz L.E. Karaciğer fibrozu: hücre modeli cevaplarının aranması // Liver Intern. - 2007. - Cilt. 10. – S. 434–439.

7. Kisseleva T., Brenner D.A. Hepatik yıldız hücrelerinin fibrogenezdeki rolü ve fibrozisin tersine çevrilmesi // J. Gastroenterol. hepatol. - 2007. - Cilt. 22.–S.S73–S78.

8. Ryder S.D. Hepatit C'li hastalarda hepatik fibrozun ilerlemesi: ileriye dönük bir tekrar karaciğer biyopsisi çalışması // Gut. - 2004. - Cilt. 53. – S. 451–455.

9. Schuppan D., Afdhal N.H. Karaciğer sirozu // Lancet. - 2008. - Cilt. 371. - S. 838-851.

10. Senoo H. Hepatik yıldız hücrelerinin yapısı ve işlevi // Med. elektron. mikrosc. - 2004. - Cilt. 37. – S. 3–15.

Karaciğer stellat hücreleri (lipositler, İto hücreleri, yağ biriktiren karaciğer hücreleri) hepatositler ve sinüzoidlerin endotel astarı arasındaki Disse boşluklarında lokalizedir ve retinoid homeostazının düzenlenmesinde lider bir rol oynar ve A vitamininin %80'e kadarını biriktirir. . Disse alanı, transsinüzoidal değişim sağlayan en büyük işlevsel sorumluluk alanıdır. Deneysel modeller ve hücre kültürü kullanılarak, hepatik yıldız hücrelerinin A vitamini içeren büyük sitoplazmik lipid damlacıklarına farklılaştığı gösterilmiştir; bu fenotip "dinlenme" olarak yorumlanır.

Karaciğerde fibrozis ve siroz gelişiminde yıldız hücrelerinin rolüne artan bir önem verilmektedir. Fibrojenik uyaranları aldıktan sonra, "dinlenme" yıldız hücreleri "transdiferansiye" olur, bir miyofibroblast benzeri fenotip kazanır ve kollajen, proteoglikanlar ve hücre dışı matrisin diğer bileşenlerini üretmeye başlar. Santral damarlar, sinüzoidler veya portal damarlar seviyesindeki fibrozis, karaciğerin normal hemodinamiğini sınırlar, bu da metabolik olarak etkili parankimde bir azalmaya, ayrıca portal hipertansiyon ve porto-sistemik şantlara yol açar. Disse boşluklarında bağ dokusunun birikmesi, dolaşımdaki makromoleküllerin temizlenmesine müdahale ederek, hücreler arası etkileşimleri değiştirerek ve karaciğer hücresi işlev bozukluğuna yol açarak kan ve hepatositler arasındaki normal metabolik trafiği bozar.

Aktive edilmiş yıldız hücrelerinin dinlenme fenotipine geri dönüp dönemeyeceği konusunda çelişkili görüşler vardır. Karaciğer fibrojenik stellat hücrelerinin, örneğin retinoidlere maruz kaldıklarında veya tip I fibriller kollajen veya bazal membran bileşenleri dahil hücre dışı matris bileşenleri ile etkileşime girdiğinde, aktivasyon sürecini kısmen düzleştirebildiğine dair kanıtlar elde edilmiştir. Bu sorunun çözümü, fibrozisin tersine çevrilebilirliği sorununun ve karaciğer sirozunun tedavisine yönelik terapötik yaklaşımların geliştirilmesi sorununun altında yatmaktadır.

Bu çalışmanın amacı- kronik HCV enfeksiyonu modelindeki fibrotik değişikliklerin dinamiklerinde karaciğer yıldız hücrelerinin yapısal ve fonksiyonel özellikleri hakkında kapsamlı bir çalışma yapmak.

Malzeme ve araştırma yöntemleri

Fibrotik değişikliklerin çeşitli aşamalarında kronik HCV enfeksiyonunda karaciğer biyopsi örneklerinin kapsamlı bir ışık-optik, elektron-mikroskobik ve morfometrik çalışması yapıldı (fibrozisin şiddetine göre 4 eşit gruba bölünmüş 100 örnek). Lipid içeren yıldız hücrelerin en iyi yarı ince kesitlerde, fibrojenik yıldız hücrelerde - yalnızca ultra ince kesitlerde veya immünohistokimyasal görüntüleme kullanılarak görüntülenebildiğine dikkat etmek önemlidir.

Karaciğer numuneleri, Millonig'in fosfat tamponunda (pH 7.2-7.4) hazırlanan, 4°C'ye soğutulmuş %4'lük bir paraformaldehit çözeltisi içinde sabitlendi; parafin kesitler, van Gieson'a göre Perls reaksiyonu ile kombinasyon halinde hematoksilin ve eozin ile boyandı ve elastik liflerin Weigert'in resorsinol fuksin ile ek olarak boyanması ve bir PAS reaksiyonu gerçekleştirildi. Yarı ince kesitler Schiff reaktifi ve azure II ile boyandı. Çalışma bir Leica DM 4000B evrensel mikroskobunda (Almanya) gerçekleştirilmiştir. Mikrograflar bir Leica DFC 320 dijital kamera ve Leica QWin yazılımı kullanılarak alındı. Uranil asetat ve kurşun sitrat ile kontrast oluşturan ultra ince kesitler, bir JEM 1010 elektron mikroskobunda 80 kW hızlanma voltajında ​​incelenmiştir.

Karaciğer fibrozunun evresi, portal fibrozdan (evre I) porto-santral vaskülarize septa oluşumu ve parankimin nodüler transformasyonu ile siroz arasında değişen 4 puanlık bir ölçekte belirlendi. Karaciğer yıldız hücreleri ve diğer matris üreten hücresel elementler, düz kas a-aktin ekspresyonu ile fibroz gelişiminin dinamiklerinde tespit edildi.

Matris üreten karaciğer hücrelerinde düz kas a-aktin ekspresyonu, reaksiyon ürünleri için negatif kontrol streptavidin-biyotin görüntüleme sistemi ile iki aşamalı dolaylı immünoperoksidaz yöntemi kullanılarak test edildi. Düz kas a-aktinine (NovoCastra Lab. Ltd, UK) 1:25 seyreltmede fare monoklonal antikorları, birincil antikorlar olarak kullanıldı; ikincil antikorlar olarak - evrensel biyotinlenmiş antikorlar. İmmünohistokimyasal reaksiyonun ürünleri diaminobenzidin kullanılarak görselleştirildi, ardından kesitler Mayer hematoksilen ile zıt boyandı. Lipid içeren yıldız hücrelerin sayısal yoğunluğu, 38.000 μm2'lik bir görsel alan biriminde yarı ince kesitlerde değerlendirildi. İstatistiksel veri işleme için Student's t-testi kullanıldı; Hata olasılığı P 0.05'ten küçükse, karşılaştırılan parametrelerdeki farklılıklar anlamlı kabul edildi.

Araştırma sonuçları ve tartışma

Kronik hepatit C'li hastaların karaciğerindeki minimal fibrotik değişikliklerle, kural olarak, yalnızca yarı ince ve ultra ince bölümlerde açıkça görülebilen ve Disse boşluklarında farklılaşan oldukça fazla sayıda yıldız hücresi bulunur. sitoplazmada büyük lipid damlalarının varlığı ile. Yıldız hücrelerinin retinoid içeren "dinlenme" durumundan fibrojenik hücrelere dönüşümüne, lipid damlacıklarının sayısında kademeli bir azalma eşlik eder. Bu bağlamda, gerçek yıldız hücre sayısı, kapsamlı bir elektron mikroskobik ve immünohistokimyasal çalışma kullanılarak belirlenebilir.

Kronik hepatit C'de fibrozisin (0, I) ilk aşamalarında, yarı ince kesitler incelenirken, karaciğer yıldız hücrelerinin popülasyonu belirgin polimorfizm ile ayırt edildi - boyut, şekil, lipid damlalarının sayısı ve bunların renklendirici özellikleri keskin bir şekilde değişti. : farklı hücrelerde lipid içeren materyalin ozmiofilisitesindeki farklılıklar. Müstahzarlarda sitoplazmik lipid damlacıklarının mevcudiyeti ile görüntülenen karaciğer yıldız hücrelerinin sayı yoğunluğu, görsel alanın birimi başına 5.01 ± 0.18 idi.

Yıldız hücrelerinin ultrastrüktürünün özellikleri, lipid damlacıklarının elektron yoğunluğunun heterojenliği ile sadece aynı hücre içinde değil, aynı zamanda farklı lipositler arasında da ilişkilidir: elektron geçirgen bir lipid substratının arka planına karşı daha ozmiofilik bir marjinal kenar göze çarpıyordu; ek olarak, çekirdekler keskin bir şekilde polimorfiktir ve sitoplazmik süreçlerin uzunluğu değişkendir. Lipid içeren yıldız hücrelerinin ultrastrüktürel özellikleri arasında, lipid damlacıklarının varlığı ile birlikte, mitokondri de dahil olmak üzere zar organellerinde zayıf olan çok az miktarda sitoplazmik matris not edilebilir ve bu nedenle, görünüşe göre, bu liposit fenotipi " dinlenme" veya "pasif" .

Fibrozis II ve III aşamalarında, çoğu stellat hücrenin ultrastrüktürü, hem lipid içeren hem de fibroblast benzeri hücrelerin morfolojik özelliklerinin aynı anda mevcudiyeti olan karışık veya geçişli fenotip olarak adlandırılır. Bu tür lipositlerde çekirdekler, nükleolemmanın derin invaginasyonlarına, daha büyük bir nükleolusa ve lipid damlacıklarını tutan sitoplazmanın artan hacmine sahipti. Aynı zamanda, granüler sitoplazmik retikulumun mitokondri, serbest ribozomları, polisomları ve tübüllerinin sayısı keskin bir şekilde arttı. Kural olarak, lipid damlacıklarının ve mitokondrinin zar teması vardı ve bu da lipidlerin "kullanımını" gösteriyordu. Birçok hücrede, lipit damlacıklarının bozunması, daha sonra ekzositoz ile elimine edilen otofagozomların oluşumu ile gerçekleştirildi. Bazı durumlarda, karışık bir fenotipin yıldız hücrelerinin çoğalması kaydedildi.

Karaciğer sirozu aşamasında en çok sayıda olan matris üreten stellat hücreler, lipid granüllerinin tamamen yokluğu, fibroblast benzeri bir form, gelişmiş bir protein sentezleme bölmesi ve sitoplazmada kontraktil fibril yapılarının oluşumu ile karakterize edildi; Periselüler olarak Disse boşluklarında, belirli bir enine çizgili çok sayıda kollajen fibril demeti lokalize edildi.

Genel olarak, intralobüler perisinüzoidal fibrojenezin eşlik ettiği kronik hepatit C'nin ilerlemesi sırasında, karaciğer stellat hücrelerinin aktivasyonunun morfolojik belirtileri, bunların A vitamini biriktiren "pasif" olarak adlandırılanlardan fibrojenik ve çoğalan hücrelere dönüşümleri vardı.

Karaciğer sirozuna dönüşüm aşamasında, lipid içeren yıldız hücrelerin sayısal yoğunluğunda, fibrojenik dönüşümlerini gösteren önemli bir azalma oldu. Bununla birlikte, karaciğerde oluşan siroz durumunda, izole vakalarda, perisinüzoidal lipid içeren stellat hücrelere sahip karaciğer parankim alanları vardı. Ek olarak, bir örnekte, periportal fibröz dokuda çok sayıda liposit bulundu, bu muhtemelen stellat hücrelerin vücuttaki retinoidlerin metabolizmasındaki önemli rolünü, hatta organ sirozu aşamasında bile gösterir. Ek olarak, yıldız hücrelerin bir dizi başka işlevi var gibi görünmektedir, ayrıca pankreas, akciğerler, böbrekler ve bağırsaklar gibi ekstrahepatik organlarda da bulunurlar ve hepatik ve ekstrahepatik yıldız hücrelerinin, yaygın bir yıldız hücre sistemi oluşturduğuna dair bir görüş vardır. APUD sistemine benzer vücut. Örneğin, fibrojenik stellat hücrelerin karaciğer sirozu ile ilişkisine rağmen, bunların aktivasyonu akut yaralanma vakalarında faydalı bir rol oynayabilir, çünkü sonuç parankimal hücrelerin rejenerasyonu için uygun bir stromal devredir.

Morfometrik analize göre, kronik HCV enfeksiyonunda perihepatoselüler fibrozun şiddeti, lipid içeren yıldız hücrelerin sayısal yoğunluğu ile önemli bir ters korelasyona sahipti - fibroz III aşamasında ve organ sirozu ile, görsel alan başına 0.20 ± 0.03 idi. önemli olan daha az olan birim (r< 0,05), чем на стадиях фиброза 0 - I (5,01 ± 0,18) и II (2,02 ± 0,04).

Matris üreten karaciğer hücrelerinin fibrojenik aktivitesi, bizim tarafımızdan düz kas alfa-aktin ekspresyonu üzerinde bir immünohistokimyasal çalışma kullanılarak test edildi. Hepatik lobüller içinde lokalize olan aktive stellat hücrelerin sitoplazmasında değişen yoğunlukta immünohistokimyasal reaksiyonların ürünleri bulundu. Portal bölgelerin fibroblast ve miyofibroblastlarının sitoplazmasında, damarların düz kas hücrelerinde ve merkezi damarlar etrafındaki miyofibroblastlarda özellikle düz kas α-aktininin anlamlı ekspresyonu kaydedildi.

Fibrogenezin hücresel mekanizmalarına ilişkin verilerin çoğu, hepatik stellat hücreler üzerinde yapılan çalışmalardan gelmektedir, ancak çeşitli matris üreten hücrelerin (her biri belirli bir lokalizasyona, immünohistokimyasal ve ultrastrüktürel fenotipe sahiptir) hepatik fibroz gelişimine katkıda bulunduğu açıktır. Portal yolların fibroblastlarını ve miyofibroblastlarını, vasküler düz kas hücrelerini ve kronik karaciğer hasarı durumunda aktive olan merkezi venlerin etrafındaki miyofibroblastları içerir.

Çözüm

Karaciğer stellat hücrelerinin kronik hepatit C'de organ fibrozunun gelişimindeki rolü gösterilmiştir. Fibrozisin ilerlemesiyle, lipid içeren yıldız hücrelerinin sayısal yoğunluğu önemli ölçüde azalırken, popülasyonun bir kısmı sözde "dinlenme"yi korur. " metabolik fonksiyon için fenotip. Fibrojenik aktivasyon durumundaki "miyofibroblast benzeri" karaciğer stellat hücreleri, aşağıdaki yapısal ve işlevsel özelliklerle karakterize edilir: lipid damlacıklarının sayısında bir azalma ve ardından kaybolması, granüler sitoplazmik retikulum ve mitokondri hiperplazisi, fokal proliferasyon, immünohistokimyasal ekspresyon Düz kas a-aktin dahil olmak üzere fibroblast benzeri özellikler ve Disse boşluklarında periselüler kollajen fibrillerinin oluşumu.

Bu nedenle, karaciğer yıldız hücreleri statik değil, intralobüler perihepatoselüler matrisin yeniden şekillenmesinde doğrudan yer alan dinamik bir popülasyondur.

İnceleyenler:

Vavilin V.A., Tıp Bilimleri Doktoru, Profesör, Başkan. İlaç Metabolizması Laboratuvarı, Moleküler Biyoloji ve Biyofizik Araştırma Enstitüsü, Rusya Tıp Bilimleri Akademisi Sibirya Şubesi, Novosibirsk;

Kliver E.E., Tıp Bilimleri Doktoru, Lider Araştırmacı, Patomorfoloji ve Elektron Mikroskobu Laboratuvarı, Novosibirsk Dolaşım Patolojisi Araştırma Enstitüsü, akademisyen E.N. Rusya Federasyonu Sağlık ve Sosyal Kalkınma Bakanlığı Novosibirsk'ten Meshalkin.

Çalışma, editörler tarafından 15 Ağustos 2011'de alındı.

bibliyografik bağlantı

Postnikova O.A., Nepomnyashchikh D.L., Aidagulova S.V., Vinogradova E.V., Kapustina V.I., Nokhrina Zh.V. FİBROZİS DİNAMİĞİNDE YILDIZLI KARACİĞER HÜCRELERİNİN YAPISAL VE FONKSİYONEL ÖZELLİKLERİ // Temel Araştırma. - 2011. - Hayır. 10-2. – S. 359-362;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28817 (erişim tarihi: 30.01.2020). "Doğa Tarihi Akademisi" yayınevi tarafından yayınlanan dergileri dikkatinize sunuyoruz.

alıntı için: Kurysheva M.A. Karaciğer fibrozu: geçmiş, şimdi ve gelecek // M.Ö. 2010. Sayı 28. 1713

Karaciğer fibrozu, bağ dokusu, hücre dışı matris (perisinüzoidal boşluktaki kollajen lifli doku) miktarında ve kronik yaygın karaciğer hastalıklarının ana ilerleme yolunda lokal veya yaygın bir artıştır. Fibrozisin erken evrelerinde klinik belirtiler yoktur ve sadece biyopsi örneğinin histolojik incelemesi aşırı bağ dokusu birikimini ortaya çıkarır. Gelecekte, fibroz, rejenerasyon düğümlerinin, vasküler anastomozların oluşumuna yol açar - karaciğer sirozu oluşumu. Sirotik olmayan karaciğer fibrozu nadirdir ve bu yazıda ele alınmamıştır.

Karaciğerdeki fibroz süreçleri uzun yıllardır incelenmiştir (Tablo 1), ancak fibroz süreçlerinde yıldız hücrelerinin rolünün keşfedilmesinden sonra, antifibrotik tedavi için yeni olanaklar elde edilmiştir.

Karaciğer fibrozunun patogenezi
Sinüzoidal hücreler - endotel hücreleri, Kupffer hücreleri, yıldız hücreleri (Ito hücresi, yıldız hücresi, retinoid depolayan hücre, liposit), sinüzoidlerin lümenine bakan hepatosit alanı ile birlikte fonksiyonel bir birim oluşturur. Hücrelere ek olarak, hücre dışı matris (ECM), sadece karaciğer hastalıklarında görülebilen sinüzoid bölgede bulunur. Sinüzoidleri oluşturan tüm hücreler ECM oluşumuna katılabilir. Normalde fibrogenez faktörleri ile antifibrotik faktörler arasında bir denge vardır. Fibrozda ana rol, profibrotik ve antifibrotik faktörler üreten Ito hücreleri tarafından oynanır. Antifibrotik faktörler, ECM proteinlerinin (kollajenazlar, jelatinazlar, stromolisinler) yok edilmesinde rol oynayan matris metaloproteazları (MMP'ler) içerir. MMP aktivitesi, yine Ito hücreleri tarafından üretilen matris metaloproteazların (TIMP'ler) doku inhibitörleri tarafından aşağı regüle edilir.
Karaciğer hasar gördüğünde, makrofajları ve sinüzoidlerin endotelini aktive eden biyolojik olarak aktif maddeler salınır, IL-1, TNFa, nitrik oksit, endotelini serbest bırakır, Ito hücreleri üzerinde etki eder. Aktive edildiğinde, stellat hücreler trombosit aktive edici faktör PDGF'yi ve transforme edici büyüme faktörü TGFβ 1'i üretir. TGFβ 1'in etkisi altında, Ito hücreleri kendilerini aktive etmeye ve iltihaplanma bölgelerine göç etmeye başlar. Ito hücrelerinin fenotipinde bir değişiklik var - TGFβ 1 üretmeye devam eden ve ECM üretmeye başlayan miyofibroblastlara dönüşüyorlar. Fibrotik ve antifibrotik faktörler arasındaki dengesizlik, ECM bileşenlerinde 3-10 kat artışa, bileşiminde bir değişikliğe (tip I ve III kollajenin baskınlığı) yol açar. Matrisin Disse boşluğuna yeniden dağıtılması, genişlemesi, sinüzoidlerin kılcallaşması, hepatositler ve kan arasındaki değişimin ihlali, yanlış lobüllerin gelişmesi nedeniyle kan şantının ve karaciğer sirozunun gelişmesiyle birlikte eşlik eder. Enflamatuar aracıların etkisinin sona ermesi durumunda, İto hücreleri yeniden profibrotik maddeler üretmeye başlar ve Disse boşluğundaki ECM bileşenlerinde bir azalma meydana gelir. Bu nedenle, gelişimin erken evrelerindeki fibrozis geri dönüşümlü bir süreçtir.
Kronik viral hepatitte karaciğer fibrozunun patogenezi, enfekte hepatositler tarafından inflamatuar hücre aktivitesinin indüklenmesi ile ilişkilidir, bu da Ito hücrelerinin uyarılmasına yol açar. Alkolik karaciğer hastalığında asetaldehit ve oksijen serbest radikalleri Ito hücrelerini aktive eder. Ek olarak, etanol bağırsakta gram-negatif mikrofloranın büyümesini, portal kandaki lipopolisakkaritlerin seviyesinde bir artışı ve Ito hücreleri üzerinde etkili olan TNFa üreten Kupffer hücrelerinin aktivasyonunu destekler. Alkole bağlı olmayan yağlı karaciğer hastalığında karaciğer fibrozunun patogenezi, hiperglisemi ve insülin direnci ile ilişkilidir, bu da serbest yağ asitleri ve karaciğer steatozunun ve serbest radikallerin ve proinflamatuar sitokinlerin seviyesinde bir artışa yol açar - hepatosit apoptozuna ve aktivasyonuna yol açar. karaciğer fibrozunun ilerlemesi ile inflamatuar hücreler. Primer biliyer sirozda, biliyer hücreler, Ito hücrelerini aktive eden ve fibrogenezi tetikleyen fibrojenik aracıları salgılar.

Karaciğer fibrozunun tersine çevrilebilirliği
Uzun süre karaciğer fibrozu geri dönüşü olmayan bir patolojik durum olarak kabul edildi. Bununla birlikte, 50 yıl önce, hemokromatoz ve Wilson-Konovalov hastalığı için etkili tedaviden sonra fibrozisin tersine çevrildiği vakaları ve daha sonra, immünosupresif tedavinin bir sonucu olarak otoimmün hepatitte fibrozisin gerilediğine ilişkin veriler, cerrahi dekompresyondan sonra sekonder biliyer siroz hakkında veriler tanımlanmıştır. safra yolları, alkolsüz steatohepatit tekrar tekrar yayınlandı. vücut ağırlığında azalma, yoksunluk sırasında alkolik hepatit.
4-6 hafta sonra biyopsi sırasında sinüzoidlerin duvarlarında ve kan serumunda tip IV kollajen, laminin ve hyaluronik asit içeriğinde bir azalma tespit edildiğinde, alkol alımından uzun süreli yoksunluk ile fibrozun tersine çevrilebilirliği gözlendi - orada "sinüzoid kapilerizasyon" sürecinin bir gerilemesiydi. Ito hücrelerinin işlevini yansıtan değişiklikler de kaydedildi - MMP-2 seviyesinde bir artış ve inhibitörü TIMMP-2 seviyesinde bir azalma. Belirli zaman aralıklarında, sinüzoidlerin duvarlarındaki aktin miyofibrillerinin sayısında bir azalma gözlendi; bu, Ito stellat hücrelerinin aktivitesinde bir azalmaya ve hücre dışı matrisin sentezinden bozulmasına geçişlerine işaret ediyor.
Aynı zamanda, yalnızca antiviral tedavinin klinik uygulamaya girmesiyle birlikte, hem ilerleme hem de gerileme olasılığı olan dinamik bir süreç olarak karaciğer fibrozu kavramı, bilimsel olarak kanıtlanmış bir gerçek olarak kabul edildi.
Kaydedilen ilerleme, hepatik fibrozun geri dönüşümlü olduğunun net bir şekilde anlaşılmasına ve etkili antifibrotik tedavinin karaciğer hastalığı olan hastaların yönetimini önemli ölçüde değiştireceğine ve halihazırda gelişmiş karaciğer sirozunda bile olumlu bir prognoz sağlayacağına dair gerçekçi bir beklentiye yol açmıştır.
Karaciğer fibrozu teşhisi
Karaciğer fibrozisini teşhis etmek için altın standart, histolojik inceleme ile bir biyopsidir. Histolojik değerlendirme, Serov tarafından modifiye edilen Desmet skalalarına (1984) göre yapılır; JSHAK veya METAVIR ölçeği. Lokalizasyona ve prevalansa bağlı olarak, aşağıdaki karaciğer fibrozu formları ayırt edilir: venüler ve perivenüler (lobüllerin merkezinde ve merkezi damarların duvarlarında - kronik alkolik hepatitin özelliği); perisellüler (kronik viral ve alkolik hepatitte hepatositlerin çevresinde); septal (safra kanalları etrafındaki fibröz dokunun eşmerkezli büyümesi - viral hepatitli); portal ve periportal (viral, alkolik, otoimmün hepatitli); periduktal fibroz (sklerozan kolanjitte safra kanalları çevresinde); karışık (farklı fibroz formları sunulur).
İnvazivlik nedeniyle, delinme karaciğer biyopsisi sırasında iğnenin “vuruş hataları” ile ilişkili histolojik incelemede oldukça büyük bir hata ile, patolojik süreçlerin erken teşhisi için sonuçların yorumlanmasındaki fark, şu anda büyük önem verilmektedir. -Fibrozis teşhisi için invaziv yöntemler. Bunlar arasında biyoprognostik laboratuvar testleri; karaciğer elastometrisi ve MR elastografisi; Ultrason, BT, karaciğerin MRG'si, fibroz ve portal hipertansiyon indekslerinin hesaplanması ile karaciğer ve dalak damarlarının ultrasonu.
Fibrozis belirteçleri, ECM metabolizmasını yansıtan doğrudan (biyobelirteçler) ve karaciğer yetmezliğini gösteren dolaylı olarak ayrılır. Doğrudan belirteçler, tip I prokollajenin karboksiterminal peptidini, tip III prokollajenin aminoterminal peptidini, TIMP-1, 2, tip IV kollajeni, hyaluronik asit, laminin, MMP-2'yi içerir. Bu maddelerin tanımı klinik çalışmalarda kullanılmaktadır.
Klinik uygulama için, dolaylı belirteçlerle karaciğer fibrozunun şiddetini değerlendirmek için çeşitli hesaplanmış prognostik indeksler önerilmiştir: APRI, ELF, FIB-4, FibroFast, FibroIndex, FibroMeter, FPI, Forns, GUCI, Hepascore, HALT-C, MDA, PGA, PGAA.
Karaciğer fibrozunun ciddiyetini değerlendirmek için biyopsiye alternatif olarak düşünülerek Fibro-test ve Akti-test sistemleri kullanılır. Fibro-test 5 biyokimyasal gösterge içerir: alfa 2-makroglobulin (Ito hücrelerini aktive eder), haptoglobin (karaciğer hücrelerinin interlökinler tarafından uyarılmasını yansıtır), apolipoprotein A1, gama-glutamil transpeptidaz, toplam bilirubin. Acti-test (viral nekroinflamatuar aktivite değerlendirilir) listelenen bileşenlere ek olarak alanin aminotransferaz - AlAT içerir. FibroMax, invazif olmayan beş testin bir kombinasyonudur: FibroTest ve ActiTest, Steato-Test (karaciğer yağlanması teşhis edilir), NewTest (alkolsüz steatohepatit teşhis edilir), AshTest (şiddetli alkolik steatohepatit teşhis edilir). FibroMax'ta alfa 2-makroglobulin, haptoglobin, apolipoprotein A1, gama-glutamil transpeptidaz, total bilirubin, ALT, AST, glukoz, trigliseritler, kolesterol belirlenir. Elde edilen verilere dayanarak hastanın yaşı ve cinsiyeti dikkate alınarak fibrozisin evresi ve hepatit aktivite düzeyi hesaplanır. Testlerin kullanımı, testlerin tanısal önemini olumsuz etkileyen kolestaz belirtileri ve çalışmanın yüksek maliyeti ile sınırlıdır.
Dalgalar (titreşimler) karaciğer yoluyla iletildiğinde ve bir sensör tarafından yakalandığında karaciğerin ultrasonik elastografisine dayanan cihazın çalışması, karaciğerdeki fibroz derecesini erken aşamalarda değerlendirmeyi mümkün kılar. Cihaz obezite ve asit için bilgi vermez.
Manyetik rezonans elastografi, karaciğer yoğunluğunu belirlemek için doğrudan bir yöntemdir ve sağlıklı gönüllülerle karşılaştırıldığında F0'ı belirlemeye olanak tanır ve fibrozu değerlendirmek için diğer yöntemler kullanılarak henüz gösterilmemiştir.
Gelecekte etiyolojik faktöre bağlı olarak fibrozisin varlığını ve ilerleme hızını belirlemek mümkündür. Bu sorunların çözümü, fibrozisin erken evrelerinin teşhis edilmesini ve dolayısıyla etkili bir şekilde tedavi edilmesini mümkün kılmaktadır.

Tedavi
Antifibrotik tedavi, kronik hepatitin etiyolojik ve patogenetik tedavisi ile ayrılmaz bir şekilde bağlantılıdır (Tablo 2). Çoğu durumda, hepatitin etiyolojik faktörlerini ortadan kaldıran ilaçlar da antifibrotik ajanlardır. Antiviral ilaçlar, pentoksifilin, fosfatidilkolin, glukokortikosteroidler, nitrik oksit bağışçıları, E vitamini, endotelin reseptör antagonistleri, anjiyotensin reseptör antagonistleri, anjiyotensin dönüştürücü enzim inhibitörleri, silimarin'de bir antifibrotik etki bulundu. Etken faktör üzerindeki etkisinin zor olduğu durumlarda kullanım için fibrogenezi inhibe eden ilaçlar için bir araştırma devam etmektedir: antioksidanlar (betain, probucol, N-asetilsistein), hepatoprotektörler (silymarin, UDCA, S-adenosilmetiyonin, esansiyel fosfolipidler), tümör nekroz faktörünün aktivitesi (pentoksifilin , adiponektin, infliximab).
Yönlendirilmiş antifibrotik etkiye sahip ilaçlar için bir araştırma var:
- zararlı ajanın ortadan kaldırılması (interlökin 10, TNF inhibitörleri - anti-inflamatuar etki; antioksidanlar - oksidatif strese yanıt olarak fibrotik süreçlerin baskılanması);
- yıldız hücrelerinin profibrotik aktivitesinin baskılanması (interferonlar, hepatosit büyüme faktörü, PPARy agonistleri);
- stellat hücrelerin aktif antifibrotik aktivitesinin sürdürülmesi (TGFβ 1 antagonistleri - matris sentezini azaltır ve parçalanmasını arttırır; PDGF antagonistleri, nitrik oksit, ACE inhibitörleri - Ito hücre proliferasyonunu inhibe eder);
- karaciğer yıldız hücreleri tarafından kolajenlerin salgılanması üzerindeki etki (ACE inhibitörleri, polihidroksilaz inhibitörleri, interferon y - fibrozu azaltır; endotelin reseptör antagonistleri - fibrozu ve portal hipertansiyonu azaltır);
- Ito hücrelerinin apoptozu üzerindeki etki (hylotoksin, NGF - nöronal büyüme faktörü - apoptozu uyarır);
- kollajen matrisinin artan parçalanması (metalloproteinazlar, doku MMP inhibitörünün antagonistleri; TGFβ 1 antagonistleri - TIMP'nin aktivitesini azaltır ve MMP'nin aktivitesini arttırır; gevşetme - TIMP'nin aktivitesini azaltır ve MMP'nin aktivitesini arttırır).
Silimarin (Legalon) ilacının antifibrotik amaçlı kullanımı umut verici görünmektedir. Silymarin, süt devedikeni (Cardui mariae fructus) meyvelerinin ekstraktlarından izole edilen ve Legalon 70 ve 140'a (silymarin dozu) dahil edilen dört flavonolignan izomerinden (silibin, izosilibinin, silisistin ve silydianin) oluşan bir grubun resmi adıdır.
Klinik çalışmalar yapılırken, antienflamatuar, antioksidan, antitoksik, hipolipidemik ve antikanserojenik etkilerin yanı sıra silimarin'in belirgin bir antifibrotik etkiye sahip olduğu bulunmuştur. Bunun nedeni, Ito hücrelerinde transforme edici büyüme faktörü β ve gen ekspresyonunun yanı sıra artan serbest radikal klirensi ve kollajen sentezinin doğrudan baskılanması üzerindeki etkisidir.
Silimarin/silibininin farmakodinamiği ile Legalon®'un klinik etkisi arasındaki ilişki Tablo 3'te gösterilmiştir. Bu etki mekanizmaları, yaygın karaciğer hastalıklarında Legalon®'un terapötik değerini belirler. Çok sayıda çalışma, karaciğerdeki inflamatuar-nekrotik reaksiyonu baskılamada, fibroz gelişimini inhibe etmede ve karaciğer sirozunda hepatositlerin malign transformasyon riskini azaltmada uzun süreli kullanımı ile Legalon®'un yüksek verimliliğini göstermiştir.
Maymunlarda alkolik karaciğer fibrozu modelinde, karaciğerin morfolojik bir çalışması ve fibrozun serum belirteçlerinin incelenmesi, silimarin ile tedavi edilen hayvanlarda fibrozun önemli ölçüde daha az ilerlediğini ve karaciğer sirozunun daha az sıklıkla geliştiğini ortaya koydu.
Legalon'un karaciğer fibrozu üzerindeki etkisi, siroz dahil olmak üzere kronik karaciğer hastalığı olan 792 hastada incelenmiştir. Fibrogenezin bir belirteci olarak P-III-NP seçilmiştir. Takip süresi ortalama 107 gündü. Başlangıçta yüksek bir P-III-NP seviyesi ile, Legalon ile 3 aylık tedaviden sonra, P-III-NP seviyesi normale düştü.
5 uluslararası plasebo kontrollü çalışmanın sonuçları (600 hasta katıldı), Legalon alırken alkolik karaciğer sirozu olan hastaların 4 yıllık sağkalımının, plasebo alan hasta grubuna kıyasla istatistiksel olarak anlamlı derecede yüksek olduğunu gösterdi. Alt grup analizi, Legalon ile tedavinin, sirozun ciddiyeti ve evresinden bağımsız olarak alkolik sirozda ve etiyolojisine bakılmaksızın Chaid-Pugh'a göre evre A sirozu olan alt grupta etkili olduğunu ortaya koydu. Viral hepatitin arka planında alkolik sirozu olan hasta alt grubunda, gözlem süresi boyunca ölüm kaydedilmezken, plasebo grubunda - sirozun dekompansasyonundan 4 ölüm.
Fibrozis artık kronik karaciğer hastalığının temel taşı olarak adlandırılmaktadır. Karaciğer sirozu oluşumuna neden olan kişidir, bu nedenle fibrozisin erken teşhisi ve tedavisi şu anda son derece önemlidir ve gelecekteki bilimsel araştırmaların görevidir.

Edebiyat
1. Sherlock Sh, Dooley J. Karaciğer ve safra yolları hastalıkları: Pratik bir rehber. M.: GEOTAR-MED, 2002. 864 s.
2. Bataller R., Brenner D.A. Karaciğer fibrozu. J.Clin. Yatırım. 2005; 115(2):209-218.
3. Iredale J. P. Karaciğer fibrozu modelleri: katı bir organda inflamasyon ve onarımın dinamik doğasını keşfetmek. J.Clin. Yatırım. 2007; 117(3):539-548.
4. Parsons C.J, Takashima M., Rippe RA. Hepatik fibrogenezin moleküler mekanizmaları. J Gastroenterol Hepatol. 2007; 22(1):79-84.
5. Storozhakov G.I., Ivkova A.N. Kronik karaciğer hastalıklarında fibrogenezin patogenetik yönleri. kama. gastroenterolojiye bakış açıları, hepatoloji 2009; 2:3-10.
6. Pavlov Ch.S., Zolotarevsky V.B., Tomkevich M.S. Karaciğer sirozunun tersine çevrilebilirlik olasılıkları. Ross. Gastroenteroloji, Hepatoloji ve Koloproktoloji Dergisi 2006; 1:20-29.
7. Severov M.V. HCV enfeksiyonunda karaciğer sirozu ve fibrozunun tersine çevrilebilirliği. Hepatolojik forum 2008; 1:2-6.
8. Pavlov Ch.S., Glushenkov D.V., Ivashkin V.T. Karaciğer fibrozu tanısında modern elastometri, fibro- ve acti-test olanakları. Ross. Gastroenteroloji, Hepatoloji ve Koloproktoloji Dergisi 2008; 4:43-52.
9 Rockey DC Kronik karaciğer hastalığında antifibrotik tedavi Klin. Gastroenterol. hepatol. 2005; 3:95-107.
10. Dehmlow C., Erhard J. Hepatology 1996; 23:749-754.
11 Lieber ve ark. Gastroenterol. 2003; 37:336-339.
12. Schuppan, Z. Allg. Med. 1998; 74:577-584.

Bu durumda, bu hücreler hasarlı karaciğer tarafından üretilen sitokinlerin, büyüme faktörlerinin ve kemokinlerin (proinflamatuar sitokinler) etkilerine çoğalarak yanıt verir. HBV ve HCV replikasyonunun neden olduğu oksidatif strese yanıt olarak stellat hücrelerin kronik aktivasyonu, HBV ve HCV ile kronik olarak enfekte olmuş hepatositlerin fibrogeneze ve artan proliferasyonuna katkıda bulunabilir.

Bu nedenle, yıldız hücreleri, MAP kinazların aktivasyonu ile birlikte karaciğer kanserinin gelişmesine yol açabilen hepatositlerin büyümesi, farklılaşması ve dolaşımının düzenlenmesinde rol oynar [Block, 2003].

Bağlantılar:

Rastgele çizim

Dikkat! Sitedeki bilgiler

sadece eğitim amaçlı

Karaciğer Ito hücrelerinin kök hücreler üzerindeki etkisinin incelenmesi

Hücreler arası iletişim, parakrin salgılama ve doğrudan hücreden hücreye temas yoluyla gerçekleştirilebilir. Hepatik perisinüzoidal hücrelerin (HPC) bölgesel kök hücre nişleri oluşturduğu ve farklılaşmalarını belirlediği bilinmektedir. Aynı zamanda, HPC moleküler ve hücresel düzeyde zayıf bir şekilde karakterize edilir.

Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kıyasov A.P.

SEI HPE "Federal Sağlık ve Sosyal Kalkınma Ajansı Kazan Devlet Tıp Üniversitesi"

Bir Rekombinant Kemik Morfogenetik Proteininin Osteoindüktansının Deneysel Değerlendirmesi

Kemik ve eklemlerin dejeneratif-distrofik hastalıklarının tedavisinde hücre teknolojileri

kafes

sakinlik ve Aktif. Aktif Ito hücreleri

sakin durum

perisinüzoidal(subendotelyal) ve hepatosellüler arası. Birincisi hücre gövdesini terk eder ve sinüzoidal kılcal damarın yüzeyi boyunca uzanır ve onu parmak benzeri ince dallarla kaplar. Perisinüzoidal çıkıntılar kısa villuslarla kaplıdır ve kılcal endotel tüpünün yüzeyi boyunca daha da uzanan karakteristik uzun mikro çıkıntılara sahiptir. Hepatosit plakasını aşan ve komşu sinüzoide ulaşan interhepatoselüler büyümeler, birkaç perisinüzoidal büyümeye ayrılır. Böylece, Ito hücresi ortalama olarak iki bitişik sinüzoidden biraz fazlasını kaplar.

aktif durum

karaciğer hücreleri

İnsan karaciğeri, herhangi bir organik doku gibi hücrelerden oluşur. Doğa, bu organın en önemli işlevleri yerine getireceği şekilde düzenlenmiştir, vücudu temizler, safra üretir, glikojen biriktirir ve biriktirir, plazma proteinlerini sentezler, metabolik süreçleri yönetir, kolesterol miktarının ve gerekli diğer bileşenlerin normalleşmesine katılır. vücudun yaşamı için.

Karaciğer hücrelerinin amacını yerine getirebilmesi için sağlıklı olması, sağlam bir yapıya sahip olması, her insanın onları yıkımdan koruması gerekir.

Hepatik lobüllerin yapısı ve tipleri hakkında

Vücudun hücresel bileşimi çeşitlilik ile karakterizedir. Karaciğer hücreleri lobülleri, segmentler lobüllerden oluşur. Organın yapısı, hepatositler (ana karaciğer hücreleri) merkezi damarın etrafında yer alacak, ondan dallanacak, birbirleriyle bağlanacak, sinüzoidler, yani kanla dolu boşluklar oluşturacak şekildedir. Kan, kılcal damarlar gibi içlerinden geçer. Karaciğer, organda bulunan portal ven ve arterden kan ile beslenir. Karaciğer lobülleri safra üretir ve onu safra kanallarına taşır.

Diğer karaciğer hücresi türleri ve amaçları

1. Endotelyal - sinüzoidleri kaplayan ve fenestra içeren hücreler. İkincisi, sinüzoid ve Disse alanı arasında kademeli bir bariyer oluşturmak üzere tasarlanmıştır.
2. Disse boşluğunun kendisi yıldız hücrelerle doludur; doku sıvısının portal bölgelerin lenfatik damarlarına çıkışını sağlarlar.
3. Kupffer hücreleri endotel ile ilişkilidir, ona bağlanırlar, işlevleri, genel bir enfeksiyon vücuda girdiğinde, yaralanma durumunda karaciğeri korumaktır.
4. Çukur hücreleri, virüsten etkilenen hepatositlerin katilleridir, ayrıca tümör hücrelerine sitotoksisiteye sahiptirler.

İnsan karaciğeri %60 hepatositlerden ve %40 diğer hücresel bileşiklerden oluşur. Hepatositler bir polihedron gibi görünürler, en az 250 milyarı vardır. Hepatositlerin normal işleyişi, sinüzoidal bölmeyi dolduran sinüzoidal hücreler tarafından salgılanan bileşenlerin spektrumundan kaynaklanmaktadır. Yani yukarıdaki Kupffer, yıldız ve çukur hücreler (intrahepatik lenfositler).

Endotel hücreleri, sinüzoidal boşluktaki kan ile Disse boşluğundaki plazma arasında bir filtredir. Bu biyolojik filtre büyük, aşırı zengin retinol ve kolesterol bileşiklerini ayrıştırır ve bunların geçmesine izin vermez, bu da vücut için faydalıdır. Ek olarak, işlevleri karaciğeri (yani hepatositleri) kan hücrelerinin mekanik hasarından korumaktır.

Düzenli okuyucumuz etkili bir yöntem önerdi! Yeni keşif! Novosibirsk bilim adamları karaciğeri temizlemek için en iyi çareyi belirlediler. 5 yıllık araştırma. Evde kendi kendine tedavi! Dikkatlice inceledikten sonra dikkatinize sunmaya karar verdik.

Vücudun elementlerinin etkileşim süreci

Vücudun tüm parçacıkları arasında oldukça karmaşık bir şemaya sahip bir etkileşim vardır. Sağlıklı bir karaciğer, hücresel bileşiklerin stabilitesi ile karakterize edilir; patolojik süreçlerde, hücre dışı bir matris mikroskop altında izlenebilir.

Alkol, viral ajanlar gibi toksinlerin etkisi altındaki organ dokusu değişikliklere uğrar. Bunlar aşağıdaki gibidir:

• metabolik bozukluklardan kaynaklanan ürünlerin vücutta birikmesi;
• hücre distrofisi;
• hepatositlerin nekrozu;
• hepatik dokuların fibrozu;
• karaciğerin enflamatuar süreci;
• kolestaz.

Organ patolojisinin tedavisi hakkında

Bir organın geçirdiği değişikliklerin ne anlama geldiğini bilmek her hasta için faydalıdır. Hepsi felaket değil. Örneğin, distrofi hafif veya şiddetli olabilir. Bu süreçlerin her ikisi de geri dönüşümlüdür. Şu anda, hücreleri ve karaciğerin tüm bölümlerini restore eden ilaçlar var.

Kolestaz, halk ilaçları - kaynatma ve infüzyonlarla bile tedavi edilebilir. Bilirubin sentezinin normalleşmesine katkıda bulunurlar ve safranın duodenuma çıkışındaki bozuklukları ortadan kaldırırlar.

İlk aşamada siroz ile tedavi bir diyetle başlar, daha sonra hepatoprotektörlerle tedavi verilir. Siroz ve fibrozu tedavi etmenin en etkili yolu, göbek damarına veya damar içine enjekte edilen kök hücrelerdir, çeşitli ajanlar tarafından hasar gören hepatositleri onarırlar.

Karaciğer hücresi ölümünün ana nedenleri alkol kötüye kullanımı, ilaçlar, ilaçlar dahil olmak üzere ilaca maruz kalmadır. Vücuda giren herhangi bir toksin bir karaciğer yok edicidir. Bu nedenle sağlıklı bir karaciğere sahip olmak için kötü alışkanlıklardan vazgeçmelisiniz.

Şiddetli karaciğer hastalıklarını tedavi etmenin imkansız olduğunu kim söyledi?

• Birçok yöntem denendi, ancak hiçbir şey yardımcı olmadı.
• Ve şimdi size uzun zamandır beklediğiniz sağlığı verecek her fırsattan yararlanmaya hazırsınız!

Karaciğer tedavisi için etkili bir çare mevcuttur. Bağlantıyı takip edin ve doktorların ne önerdiğini öğrenin!

Ayrıca okuyun:

Eğitim: Rostov Devlet Tıp Üniversitesi (RostGMU), Gastroenteroloji ve Endoskopi Anabilim Dalı.

ENDOTEL HÜCRELERİ, KUPFER VE İTO HÜCRELERİ

Endotel hücrelerinin yapısı, Kupffer ve Ito hücreleri, iki şekil örneğinde ele alacağız.

Metnin sağındaki şekil, giriş venüllerinden merkezi vene doğru artan, sinüzoidal tipte karaciğer - intralobüler kılcal damarların sinüzoidal kılcal damarlarını (SC) göstermektedir. Hepatik sinüzoid kılcal damarlar, hepatik laminalar arasında bir anastomoz ağı oluşturur. Sinüzoidal kılcal damarların astarı, endotel hücreleri ve Kupffer hücreleri tarafından oluşturulur.

Metnin solundaki şekilde, karaciğer laminası (LP) ve karaciğerin iki sinüzoidal kılcal damarı (SC'ler), perisinüzoidal Ito hücrelerini (CI'ler) göstermek için dikey ve yatay olarak kesilir. Şekil ayrıca kesilmiş safra kanallarını (LC) göstermektedir.

ENDOTEL HÜCRELERİ

Endotel hücreleri (EC), uzun bir küçük çekirdeğe, az gelişmiş organellere ve çok sayıda mikropinositik veziküllere sahip, güçlü bir şekilde düzleştirilmiş skuamöz hücrelerdir. Sitomembran, genellikle cribriform plakalar (RP) halinde gruplandırılmış, kalıcı olmayan delikler (O) ve fenestra ile noktalanmıştır. Bu açıklıklar kan plazmasının geçmesine izin verir, ancak kan hücrelerine değil, hepatositlere erişmesine izin verir (D). Endotel hücrelerinde bazal membran yoktur ve fagositoz yoktur. Küçük konektör kompleksleri (gösterilmemiştir) kullanılarak birbirlerine bağlanırlar. Kupffer hücreleriyle birlikte endotel hücreleri, Disse (PD) boşluğunun iç sınırını oluşturur; dış sınırı hepatositlerden oluşur.

KUPFER HÜCRELERİ

Kupffer hücreleri (CC), hepatik sinüzoidal kılcal damarlar içinde, kısmen çatallanmalarında büyük, kalıcı olmayan yıldız hücrelerdir.

Kupffer hücrelerinin işlemleri, endotel hücreleri arasında herhangi bir bağlantı cihazı olmadan geçer ve sıklıkla sinüzoidlerin lümenini geçer. Kupffer hücreleri oval bir çekirdek, birçok mitokondri, iyi gelişmiş bir Golgi kompleksi, granüler endoplazmik retikulumun kısa sarnıçları, birçok lizozom (L), artık cisimler ve nadir halka şeklindeki plakalar içerir. Kupffer hücreleri ayrıca genellikle eskimiş eritrositler ve yabancı madde içeren büyük fagolizozomlar (PL) içerir. Özellikle supravital boyamada hemosiderin veya demir inklüzyonları da tespit edilebilir.

Kupffer hücrelerinin yüzeyi, lamellipodia (LP) - lamelli saplar olarak adlandırılan düzensiz düzleştirilmiş sitoplazmik kıvrımların yanı sıra filopodia (F) ve glikokaliks ile kaplı mikrovilli (MV) olarak adlandırılan süreçler gösterir. Plazmalemma, merkezi olarak yerleştirilmiş yoğun bir çizgi ile vermiform gövdeler (CT) oluşturur. Bu yapılar, yoğunlaştırılmış bir glikokaliksi temsil edebilir.

Kupffer hücreleri, büyük olasılıkla bağımsız bir hücre cinsi oluşturan makrofajlardır. Genellikle diğer Kupffer hücrelerinin mitotik bölünmesi nedeniyle diğer Kupffer hücrelerinden köken alırlar, ancak kemik iliğinden de kaynaklanabilirler. Bazı yazarlar, bunların aktive edilmiş endotel hücreleri olduğuna inanmaktadır.

Bazen, Disse boşluğundan rastgele bir otonom sinir lifi (NF) geçer. Bazı durumlarda, lifler hepatositlerle temas halindedir. Hepatositlerin kenarları, mikrovilli ile noktalı interhepatosit depresyonları (MU) ile sınırlandırılmıştır.

İTO HÜCRELERİ

Bunlar, Disse (PD) boşlukları içinde lokalize olan yıldız hücrelerdir. Çekirdekleri yoğun kromatin bakımından zengindir ve genellikle büyük lipid damlaları (LA) ile deforme olur. İkincisi sadece perikaryonda değil, aynı zamanda hücrenin süreçlerinde de bulunur ve dışarıdan küresel çıkıntılar olarak görülebilir. Organeller zayıf gelişmiştir. Perisinüzoidal hücreler zayıf endositik aktivite gösterir, ancak fagozomlardan yoksundur. Hücreler, komşu hepatositlerle temas halinde olan ancak bağlantı kompleksleri oluşturmayan birkaç uzun sürece (O) sahiptir.

İşlemler karaciğerin sinüzoidal kılcal damarlarını çevreler ve bazı durumlarda hepatik laminalardan geçerek bitişik hepatik sinüzoidlerle temasa geçer. Süreçler sabit, dallı ve ince değildir; ayrıca düzleştirilebilirler. Biriken lipit damla grupları, uzarlar ve bir üzüm fırçasının görünümünü alırlar.

Perisinüzoidal İto hücrelerinin, patolojik koşullar altında yağ hücrelerine, aktif kan kök hücrelerine veya fibroblastlara dönüşebildikleri için hematopoietik kök hücreler olarak kabul edilebilecek zayıf farklılaşmış mezenkimal hücreler olduğuna inanılmaktadır.

Normal koşullar altında, Ito hücreleri, yağ ve A vitamini birikiminin yanı sıra intralobüler retiküler ve kollajen liflerinin (KB) üretiminde yer alır.

Psikoloji ve psikoterapi

Bu bölüm, tıbbi konularla ilgili araştırma yöntemleri, ilaçlar ve diğer bileşenler hakkında makaleler içerecektir.

Orijinal öğeler hakkında makaleler içeren sitenin küçük bir bölümü. Saatler, mobilyalar, süs eşyaları - tüm bunları bu bölümde bulabilirsiniz. Bu bölüm sitenin ana bölümü değildir ve insan anatomisi ve fizyolojisi dünyasına ilginç bir katkı olarak hizmet eder.

Ito karaciğer hücreleri

Evrensel Popüler Bilim Çevrimiçi Ansiklopedisi

KARACİĞER

KARACİĞER, omurgalıların vücudundaki en büyük bezdir. İnsanlarda vücut ağırlığının yaklaşık %2,5'i, yetişkin erkeklerde ortalama 1,5 kg ve kadınlarda 1,2 kg'dır. Karaciğer karın boşluğunun sağ üst kısmında bulunur; diyaframa, karın duvarına, mideye ve bağırsaklara bağlarla bağlanır ve ince bir lifli zarla kaplıdır - glisson kapsülü. Karaciğer yumuşak fakat yoğun kırmızı-kahverengi renkli bir organdır ve genellikle dört lobdan oluşur: büyük bir sağ lob, daha küçük bir sol lob ve karaciğerin arka alt yüzeyini oluşturan çok daha küçük kaudat ve kare loblar.

Fonksiyonlar.

Karaciğer, birçok farklı işlevi olan yaşam için gerekli bir organdır. Ana olanlardan biri, berrak turuncu veya sarı bir sıvı olan safranın oluşumu ve salgılanmasıdır. Safra asitler, tuzlar, fosfolipidler (fosfat grubu içeren yağlar), kolesterol ve pigmentler içerir. Safra tuzları ve serbest safra asitleri, yağları emülsifiye eder (yani onları küçük damlacıklar halinde kırar), bu da onların sindirimini kolaylaştırır; yağ asitlerini suda çözünür formlara dönüştürmek (hem yağ asitlerinin kendilerinin hem de yağda çözünen A, D, E ve K vitaminlerinin emilimi için gereklidir); antibakteriyel etkiye sahiptir.

Sindirim sisteminden kana emilen tüm besinler - karbonhidratların, proteinlerin ve yağların, minerallerin ve vitaminlerin sindirim ürünleri - karaciğerden geçer ve içinde işlenir. Aynı zamanda, amino asitlerin bir kısmı (protein parçaları) ve yağların bir kısmı karbonhidratlara dönüştürülür, bu nedenle karaciğer vücuttaki en büyük glikojen "deposu"dur. Kan plazma proteinlerini - globulinler ve albümin ile amino asit dönüşüm reaksiyonlarını (deaminasyon ve transaminasyon) sentezler. Deaminasyon - amino asitlerden nitrojen içeren amino gruplarının çıkarılması - ikincisinin, örneğin karbonhidratların ve yağların sentezi için kullanılmasına izin verir. Transaminasyon, bir amino grubunun bir amino asitten bir keto aside başka bir amino asit oluşturmak üzere aktarılmasıdır ( santimetre. METABOLİZMA). Karaciğer ayrıca keton cisimlerini (yağ asidi metabolizmasının ürünleri) ve kolesterolü sentezler.

Karaciğer, kandaki glikoz (şeker) seviyelerinin düzenlenmesinde rol oynar. Bu seviye yükselirse, karaciğer hücreleri glikozu glikojene (nişastaya benzer bir madde) dönüştürür ve depolar. Kan şekeri normalin altına düşerse, glikojen parçalanır ve glikoz kan dolaşımına girer. Ek olarak karaciğer, amino asitler gibi diğer maddelerden glikoz sentezleyebilir; bu sürece glukoneogenez denir.

Karaciğerin bir diğer işlevi detoksifikasyondur. İlaçlar ve diğer potansiyel olarak toksik bileşikler, karaciğer hücrelerinde suda çözünür bir forma dönüştürülebilir ve bu da onların safrayla atılmasına olanak tanır; ayrıca vücuttan kolayca atılan zararsız ürünler oluşturmak için yok edilebilir veya diğer maddelerle birleştirilebilir (birleştirilebilir). Bazı maddeler geçici olarak Kupffer hücrelerinde (yabancı partikülleri emen özel hücreler) veya diğer karaciğer hücrelerinde birikir. Kupffer hücreleri özellikle bakterileri ve diğer yabancı partikülleri uzaklaştırma ve yok etmede etkilidir. Onlar sayesinde karaciğer vücudun bağışıklık savunmasında önemli bir rol oynar. Yoğun bir kan damarı ağına sahip olan karaciğer, aynı zamanda bir kan deposu görevi görür (sürekli olarak yaklaşık 0,5 litre kan içerir) ve vücuttaki kan hacminin ve kan akışının düzenlenmesinde rol oynar.

Genel olarak, karaciğer 500'den fazla farklı işlevi yerine getirir ve aktivitesi henüz yapay olarak yeniden üretilemez. Bu organın çıkarılması kaçınılmaz olarak 1-5 gün içinde ölüme yol açar. Bununla birlikte, karaciğerin büyük bir iç rezervi vardır, hasardan kurtulmak için inanılmaz bir yeteneği vardır, bu nedenle insanlar ve diğer memeliler karaciğer dokusunun %70'inin çıkarılmasından sonra bile hayatta kalabilirler.

Yapı.

Karaciğerin karmaşık yapısı, benzersiz işlevlerine mükemmel şekilde uyarlanmıştır. Hisseler küçük yapısal birimlerden oluşur - lobüller. İnsan karaciğerinde, her biri 1.5-2 mm uzunluğunda ve 1-1.2 mm genişliğinde yaklaşık yüz bin tane vardır. Lobül, merkezi damar çevresinde bulunan karaciğer hücrelerinden - hepatositlerden oluşur. Hepatositler, bir hücre kalınlığında katmanlarda birleşir - sözde. karaciğer plakaları. Merkezi damardan radyal olarak ayrılırlar, dallanırlar ve birbirleriyle bağlanırlar, karmaşık bir duvar sistemi oluştururlar; aralarında kanla dolu dar boşluklar sinüzoidler olarak bilinir. Sinüzoidler kılcal damarlara eşdeğerdir; birbirinin içine geçerek sürekli bir labirent oluştururlar. Hepatik lobüllere portal ven dallarından ve hepatik arterden kan verilir ve lobüllerde oluşan safra, tübül sistemine, onlardan safra kanallarına girer ve karaciğerden atılır.

Hepatik portal ven ve hepatik arter, karaciğere alışılmadık, ikili bir kan beslemesi sağlar. Mide, bağırsaklar ve diğer birçok organın kılcal damarlarından besin açısından zengin kan, diğer birçok damar gibi kanı kalbe taşımak yerine karaciğere taşıyan portal toplardamarda toplanır. Karaciğer lobüllerinde, portal ven bir kılcal damar ağına (sinüzoidler) ayrılır. "Portal ven" terimi, bir organın kılcal damarlarından diğerinin kılcal damarlarına olağandışı bir kan taşıma yönünü belirtir (böbrekler ve hipofiz bezi benzer bir dolaşım sistemine sahiptir).

Karaciğere ikinci kan kaynağı olan hepatik arter, oksijenli kanı kalpten lobüllerin dış yüzeylerine taşır. Portal ven, karaciğere toplam kan arzının %75-80'ini ve hepatik arter %20-25'ini sağlar. Genel olarak karaciğerden dakikada yaklaşık 1500 ml kan geçer, yani. kalp debisinin dörtte biri. Her iki kaynaktan gelen kan, karıştığı ve merkezi damara gittiği sinüzoidlerde sona erer. Merkezi damardan, lober damarlar yoluyla kalbe kan çıkışı başlar (karaciğerin portal damarı ile karıştırılmamalıdır).

Safra, karaciğer hücreleri tarafından hücreler arasındaki en küçük tübüllere - safra kılcal damarlarına salgılanır. Tübüllerin ve kanalların iç sistemi sayesinde safra kanalında toplanır. Safranın bir kısmı doğrudan ana safra kanalına ve oradan ince bağırsağa gider, ancak çoğu kistik kanal yoluyla, depolama için karaciğere bağlı küçük, kas duvarlı bir kese olan safra kesesine geri döner. Yiyecekler bağırsaklara girdiğinde, safra kesesi kasılır ve içindekileri on iki parmak bağırsağına açılan ortak safra kanalına atar. İnsan karaciğeri günde yaklaşık 600 ml safra üretir.

Portal üçlüsü ve asinus.

Portal ven, hepatik arter ve safra kanalının dalları, lobülün dış sınırında yan yana yer alır ve portal triadı oluşturur. Her lobülün çevresinde bu tür birkaç portal üçlü vardır.

Karaciğerin fonksiyonel birimi asinustur. Bu, portal triadı çevreleyen ve lenfatik damarları, sinir liflerini ve iki veya daha fazla lobülün bitişik sektörlerini içeren dokunun parçasıdır. Bir asinus, portal triad ile her lobülün santral veni arasında yer alan yaklaşık 20 hepatik hücre içerir. İki boyutlu bir görüntüde, basit bir acinus, bitişik lobül alanları ile çevrili bir grup damar gibi görünür ve üç boyutlu bir görüntüde, bir kan ve safra sapı üzerinde asılı bir dut (acinus - lat. dut) gibi görünür. gemiler. Mikrovasküler çerçevesi yukarıdaki kan ve lenfatik damarlar, sinüzoidler ve sinirlerden oluşan asinus, karaciğerin mikrodolaşım birimidir.

karaciğer hücreleri

(hepatositler) polihedron şeklindedir, ancak üç ana fonksiyonel yüzeye sahiptirler: sinüzoidal, sinüzoidal kanala bakan; tübüler - safra kılcal duvarının oluşumuna katılmak (kendi duvarına sahip değildir); ve hücreler arası - doğrudan komşu karaciğer hücrelerini çevreleyen.

kafes

İto hücreleri (eşanlamlılar: karaciğer yıldız hücresi, yağ depolayan hücre, liposit, İngilizce. Hepatik Stellat Hücresi, HSC, İto Hücresi, İto hücresi) - hepatik lobülün perisinüzoidal boşluğunda bulunan, iki farklı durumda işlev görebilen perisitler - sakinlik ve Aktif. Aktif Ito hücreleri fibrogenezde önemli bir rol oynar - karaciğer hasarında skar dokusu oluşumu.

Sağlam bir karaciğerde stellat hücreler bulunur. sakin durum. Bu durumda, hücrelerin sinüzoidal kılcal damarı kaplayan birkaç çıkıntısı vardır. Hücrelerin bir başka ayırt edici özelliği, sitoplazmalarında yağ damlacıkları şeklinde A vitamini (retinoid) rezervlerinin varlığıdır. Sessiz Ito hücreleri, tüm karaciğer hücrelerinin %5-8'ini oluşturur.

Ito hücrelerinin büyümeleri iki tipe ayrılır: perisinüzoidal(subendotelyal) ve hepatosellüler arası. Birincisi hücre gövdesini terk eder ve sinüzoidal kılcal damarın yüzeyi boyunca uzanır ve onu parmak benzeri ince dallarla kaplar. Perisinüzoidal çıkıntılar kısa villuslarla kaplıdır ve kılcal endotel tüpünün yüzeyi boyunca daha da uzanan karakteristik uzun mikro çıkıntılara sahiptir. Hepatosit plakasını aşan ve komşu sinüzoide ulaşan interhepatoselüler büyümeler, birkaç perisinüzoidal büyümeye ayrılır. Böylece, Ito hücresi ortalama olarak iki bitişik sinüzoidden biraz fazlasını kaplar.

Karaciğer hasar gördüğünde, Ito hücreleri aktif durum. Aktive fenotip, proliferasyon, kemotaksis, kontraktilite, retinoid depolarının kaybı ve miyofibroblastik benzeri hücrelerin oluşumu ile karakterize edilir. Aktive karaciğer yıldız hücreleri ayrıca a-SMA, ICAM-1, kemokinler ve sitokinler gibi yeni genlerin artan seviyelerini gösterir. Aktivasyon, fibrogenezin erken bir aşamasının başlangıcını gösterir ve artan ECM protein üretiminden önce gelir. Karaciğer iyileşmesinin son aşaması, aktifleştirilmiş Ito hücrelerinin artan apoptozu ile karakterize edilir, bunun sonucunda sayıları keskin bir şekilde azalır.

Ito hücrelerini mikroskop altında görselleştirmek için altın klorür ile boyama kullanılır. Ayrıca, bu hücrelerin diğer miyofibroblastlardan farklılaşması için güvenilir bir işaretçinin, bunların reelin protein ekspresyonu olduğu tespit edilmiştir.

Hikaye

1876'da Karl von Kupfer, "Sternzellen" (yıldız hücreleri) adını verdiği hücreleri tanımladı. Altın oksit ile boyandığında, hücrelerin sitoplazmasında kapanımlar görüldü. Kupfer, 1898'de onları fagositoz tarafından yakalanan eritrosit parçaları olarak düşünerek, "yıldız hücre" hakkındaki görüşlerini ayrı bir hücre türü olarak revize etti ve onları fagositler olarak sınıflandırdı. Bununla birlikte, sonraki yıllarda, Kupffer'in "yıldız hücrelerine" benzer hücrelerin tanımları düzenli olarak ortaya çıktı. Bunlara çeşitli isimler verildi: interstisyel hücreler, parasinüzoid hücreler, lipositler, perisitler. Profesör Toshio Ito, insan karaciğerinin perisinüzoidal boşluğunda yağ lekeleri içeren bazı hücreleri keşfedene kadar, bu hücrelerin rolü 75 yıl boyunca bir sır olarak kaldı. Ito onlara "shibo-sesshu saibo" yani yağ emici hücreler adını verdi. İnklüzyonların glikojenden hücreler tarafından üretilen yağ olduğunu fark ederek, adını "shibo-chozo saibo" - yağ depolayan hücreler olarak değiştirdi. 1971'de Kenjiro Wake, Kupffer'ın "Sternzellen" ve Ito'nun yağ depolayan hücrelerinin kimliğini kanıtladı. Wake ayrıca bu hücrelerin A vitamini depolamada önemli bir rol oynadığını da tespit etti (o zamana kadar A vitamininin Kupffer hücrelerinde biriktiğine inanılıyordu). Kısa bir süre sonra, Kent ve Popper, Ito hücrelerinin karaciğer fibrozu ile yakın bir ilişkisini gösterdi. Bu keşifler, Ito hücrelerinin ayrıntılı bir çalışma sürecini başlattı.

Ayrıca bakınız

"Ito'nun Kafesi" makalesi hakkında bir inceleme yazın

Bağlantılar

• Young-O Queon, Zachary D. Goodman, Jules L. Dienstag, Eugene R. Schiff, Nathaniel A. Brown, Elmar Burkhardt, Robert Skunkhoven, David A. Brenner, Michael W. Fried (2001) . Hepotoloji Dergisi 35; 749-755. - Consilium-Medicum web sitesindeki "Enfeksiyonlar ve Antimikrobiyal Tedavi", Cilt 04/N 3/2002 dergisindeki bir makalenin çevirisi.
• Popper H: Floresan mikroskobu ile ortaya konan dokuda A vitamini dağılımı. Physiol Rev 1944, 24:.

Notlar

1. Geerts A. (2001) Hareketsiz hepatik yıldız hücrelerinin tarihçesi, heterojenliği, gelişim biyolojisi ve işlevleri. Semin Karaciğer Dis. 21(3):311-35. PMID
2. Uyan, K. (1988) Altın ve gümüş emdirme yöntemi ve elektron mikroskobu ile ortaya çıkan karaciğer perivasküler hücreleri. Karaciğer Biyopatolojisinde. Bir Ultrastructural Yaklaşım” (Motta, P. M., ed) s. 23-36, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, Hollanda
3. Stanciu A, Cotutiu C, Amalinei C. (2002) ITO hücreleri hakkında yeni veriler. Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi. 107(2):235-9. PMID
4. John P. Iredale (2001) Karaciğer Hasarının Çözümü Sırasında Hepatik Yıldız Hücre Davranışı. Karaciğer Hastalığında Seminerler, 21(3):PMID- on Medscape.
5. Kobold D, Grundmann A, Piscaglia F, Eisenbach C, Neubauer K, Steffgen J, Ramadori G, Knittel T. (2002) Hepatik stellat hücrelerde ve hepatik doku onarımı sırasında reelin ekspresyonu: HSC'nin diğer karaciğer miyofibroblastlarından farklılaşması için yeni bir belirteç. J Hepatol. 36(5):607-13. PMID
6. Adrian Ruben (2002) hepatoloji. Cilt 35, Sayı 2, Sayfa 503-504
7. Suematsu M, Aiso S. (2001) Profesör Toshio Ito: perisit biyolojisinde bir kahin. Keio J Med. 50(2):66-71. PMID
8. Querner F: Mikroskopische Nachweis von Vitamin A im Animalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung. Klin Wschr 1935, 14:.

Ito'nun Kafesini karakterize eden bir alıntı

Yarım saat sonra Kutuzov, Tatarinov'a gitti ve Bennigsen, Pierre de dahil olmak üzere maiyetiyle birlikte çizgi boyunca sürdü.

Benigsen, Gorki'den yüksek yol boyunca, höyüğün memurunun Pierre'e pozisyonun merkezi olarak işaret ettiği ve yakınında saman kokan biçilmiş çim sıralarının kıyıda uzandığı köprüye indi. Köprüyü geçerek Borodino köyüne gittiler, oradan sola döndüler ve çok sayıda asker ve silahı geçerek, milislerin toprağı kazdığı yüksek bir tepeye sürdüler. Henüz adı olmayan bir tabyaydı, daha sonra Raevsky tabyası veya el arabası pili olarak adlandırıldı.

Pierre bu tabyaya pek dikkat etmedi. Buranın onun için Borodino sahasındaki tüm yerlerden daha akılda kalıcı olacağını bilmiyordu. Daha sonra, askerlerin son kulübe ve ahır kütüklerini topladıkları Semyonovsky'ye kadar vadiyi geçtiler. Sonra, yokuş aşağı ve yokuş yukarı, dolu gibi savrulan kırık çavdarın içinden, sifonlara [bir tür tahkimat] giden yol boyunca ilerlediler. (L.N. Tolstoy tarafından not.) ], daha sonra hala kazıldı.

Bennigsen fleches'te durdu ve birkaç atlının görülebildiği (dün bizim olan) Shevardinsky tabyasına bakmaya başladı. Memurlar, Napolyon veya Murat'ın orada olduğunu söylediler. Ve herkes hevesle bu binici grubuna baktı. Pierre de oraya baktı ve zar zor görünen bu insanlardan hangisinin Napolyon olduğunu tahmin etmeye çalıştı. Sonunda, atlılar höyüğü terk edip gözden kayboldular.

Benigsen, kendisine yaklaşan generale döndü ve birliklerimizin tüm durumunu açıklamaya başladı. Pierre, Benigsen'in sözlerini dinledi, yaklaşan savaşın özünü anlamak için tüm zihinsel güçlerini zorladı, ancak zihinsel yeteneklerinin bunun için yetersiz olduğunu üzülerek hissetti. Hiçbir şey anlamadı. Bennigsen konuşmayı bıraktı ve Pierre'in dinlediğini fark ederek aniden ona dönerek şöyle dedi:

- Sanırım ilgilenmiyor musun?

"Ah, tam tersine, bu çok ilginç," diye tekrarladı Pierre, pek doğru değil.

Sifondan, yoğun, alçak huş ağacı ormanından geçerek yol boyunca daha da sola gittiler. onun ortasında

ormanda, beyaz bacaklı kahverengi bir tavşan yolda önlerine atladı ve çok sayıda atın takırtısından korktu, o kadar şaşkındı ki, önlerinde yol boyunca uzun süre atladı, genel uyandı. dikkat ve kahkaha ve sadece birkaç ses ona bağırdığında, yana koştu ve çalılıklara saklandı. Ormanda iki verst seyahat ettikten sonra, sol kanadı koruması gereken Tuchkov'un birliklerinin birliklerinin üzerinde durduğu bir açıklığa çıktılar.

Burada, aşırı sol kanatta, Bennigsen çok ve ateşli bir şekilde konuştu ve Pierre'e göründüğü gibi askeri açıdan önemli bir emir verdi. Tuchkov'un birliklerinin düzeninin önünde bir yükselme vardı. Bu yükseklik askerler tarafından işgal edilmedi. Bennigsen bu hatayı yüksek sesle eleştirdi ve yüksek yeri boş bırakmanın ve altına asker yerleştirmenin aptalca olduğunu söyledi. Bazı generaller de aynı görüşü dile getirdiler. Özellikle biri askeri hararetle buraya katledilmek üzere getirildiklerini söyledi. Bennigsen, kendi adına birliklerin yükseklere taşınmasını emretti.

Sol kanattaki bu düzen, Pierre'i askeri meseleleri anlama yeteneğinden daha da şüpheli hale getirdi. Bennigsen'i ve birliklerin dağın altındaki konumunu kınayan generalleri dinleyen Pierre, onları tamamen anladı ve görüşlerini paylaştı; ama tam da bu yüzden onları buraya, dağın altına yerleştirenin nasıl bu kadar bariz ve büyük bir hata yapabildiğini anlayamıyordu.

Pierre, bu birliklerin Bennigsen'in düşündüğü gibi pozisyonu savunmak için gönderilmediğini bilmiyordu, ancak pusu için gizli bir yere yerleştirildi, yani fark edilmemek ve ilerleyen düşmana aniden saldırmak için. Bennigsen bunu bilmiyordu ve başkomutandan bahsetmeden birlikleri özel nedenlerle ileri doğru hareket ettirdi.

25'in bu açık Ağustos akşamında, Prens Andrey, Knyazkov köyündeki kırık bir ahırda, koluna yaslanmış, alayının kenarında yatıyordu. Kırık duvardaki delikten, alt dalları çit boyunca kesilmiş otuz yıllık huş ağaçlarının şeridine, üzerinde ezilmiş yulaf yığınları olan ekilebilir araziye ve boyunca uzanan çalılara baktı. ateşlerin dumanı - askerlerin mutfakları - görülebiliyordu.

Prens Andrei'ye ne kadar sıkışık ve kimsenin ihtiyacı olursa olsun ve hayatı şimdi ne kadar zor görünürse görünsün, tıpkı yedi yıl önce Austerlitz'de savaşın arifesinde olduğu gibi, tedirgin ve rahatsız hissediyordu.

Yarınki savaş için emirler onun tarafından verildi ve alındı. Onun için yapacak başka bir şey yoktu. Ancak en basit, en net ve dolayısıyla korkunç düşünceler onu yalnız bırakmadı. Yarınki savaşın, katıldıkları tüm savaşların en korkunçu olacağını ve hayatında ilk kez, dünyevi şeylerle herhangi bir ilişkisi olmadan, başkalarını nasıl etkileyeceğini düşünmeden, ancak yalnızca ölüm olasılığının olduğunu biliyordu. kendisiyle, ruhuyla ilgili olarak, canlılıkla, neredeyse kesinlikle, basit ve korkunç bir şekilde kendini ona sundu. Ve bu fikrin zirvesinden, daha önce ona eziyet eden ve meşgul eden her şey, aniden, gölgesiz, perspektifsiz, ana hat ayrımı olmaksızın soğuk beyaz bir ışıkla aydınlandı. Tüm yaşam ona, camdan ve yapay ışık altında uzun süre baktığı sihirli bir fener gibi görünüyordu. Şimdi birdenbire, camsız, parlak gün ışığında bu kötü boyanmış resimleri gördü. "Evet, evet, işte buradalar, beni heyecanlandıran, sevindiren ve eziyet eden o sahte görüntüler," dedi kendi kendine, sihirli yaşam fenerinin ana resimlerini hayalinde çevirerek, şimdi onlara bu soğuk beyaz ışıkta bakıyor. günün - net bir ölüm düşüncesi. - İşte buradalar, güzel ve gizemli bir şey gibi görünen kabaca boyanmış bu figürler. Şan, kamu yararı, bir kadın sevgisi, vatanın kendisi - bu resimler bana ne kadar harika görünüyordu, ne derin anlamlarla dolu görünüyordu! Ve o sabahın soğuk beyaz ışığında her şey o kadar basit, solgun ve kaba ki, benim için yükseldiğini hissediyorum." Özellikle hayatının üç ana acısı dikkatini çekti. Bir kadına olan aşkı, babasının ölümü ve Rusya'nın yarısını ele geçiren Fransız işgali. "Aşk. Bana gizemli güçlerle dolu görünen bu kız. Onu nasıl sevdim! Onunla aşk, mutluluk hakkında şiirsel planlar yaptım. Ey sevgili oğlum! dedi öfkeyle. - Nasıl! Bir tür ideal aşka inandım, onun yokluğumda bütün bir yıl boyunca bana sadık kalması gerekiyordu! Bir masalın nazik güvercini gibi, solup gitmiş olmalı benden. Ve tüm bunlar çok daha basit ... Bütün bunlar çok basit, iğrenç!

Genler ve Hücreler: Cilt V, No. 1, 2010, sayfalar: 33-40

Yazarlar

Gümerova A.A., Kıyasov A.P.

Rejeneratif tıp, kök (progenitör) hücrelerin rejenerasyonu hızlandırmak için uyarılması ve (veya) kullanılmasıyla hasarlı bir organın restorasyonuna yönelik temelde yeni bir yaklaşıma dayanan, en hızlı gelişen ve umut vaat eden tıp alanlarından biridir. Bu yaklaşımın hayata geçirilebilmesi için kök hücrelerin ve özellikle bölgesel kök hücrelerin ne olduğu, fenotip ve potenslerinin bilinmesi gerekmektedir. Epidermis ve iskelet kası gibi bir dizi doku ve organ için kök hücreler zaten tanımlanmış ve nişleri tanımlanmıştır. Ancak, yenileyici yetenekleri eski zamanlardan beri bilinen bir organ olan karaciğer, ana sırrını, yani kök hücrenin sırrını henüz ortaya çıkaramadı. Bu derlemede, kendi ve literatür verilerimize dayanarak, perisinüzoidal stellat hücrelerin karaciğer kök hücresi rolünü üstlenebileceği hipotezini tartışıyoruz.

Perisinüzoidal karaciğer hücreleri (İto hücreleri, yıldız hücreleri, lipositler, yağ depolayan hücreler, A vitamini depolayan hücreler) karaciğerin en gizemli hücre tiplerinden biridir. Bu hücrelerin incelenmesinin tarihi 130 yıldan daha eskiye dayanmaktadır ve hala bunların fenotipleri ve işlevleriyle ilgili cevaplardan çok daha fazla soru bulunmaktadır. Hücreler 1876'da Kupffer tarafından tanımlandı, kendisi tarafından yıldız hücreler olarak adlandırıldı ve makrofajlara atandı. Daha sonra gerçek sedanter karaciğer makrofajları Kupffer adını aldı.

İto hücrelerinin Disse boşluğunda hepatositlerle doğrudan temas halinde bulunduğu, A vitamini biriktirdiği ve hücreler arası maddenin makromoleküllerini üretebildiği ve ayrıca kasılma aktivitesine sahip olduğu, perisitler gibi sinüzoidal kılcal damarlardaki kan akışını düzenlediği genel olarak kabul edilir. Hayvanlarda Ito hücrelerinin tanımlanması için altın standart, kas dokusu - desmin karakteristiği olan hücre iskeleti ara filament proteininin tanımlanmasıdır. Bu hücrelerin diğer oldukça yaygın belirteçleri, nöronal farklılaşma belirteçleridir - asit glial fibriler protein (Glial fibriler asit proteini, GFAP) ve nestin.

Uzun yıllar boyunca, Ito hücreleri, yalnızca karaciğerin fibrozisi ve sirozu gelişimine katılımları açısından değerlendirildi. Bunun nedeni, karaciğer hasarının her zaman artan desmin ekspresyonu, proliferasyon ve miyofibroblast benzeri hücre transformasyonuna transdiferansiyasyonu içeren bu hücrelerin aktivasyonu ile sonuçlanması gerçeğidir. hücreler arası madde, özellikle tip I kollajen. Birçok araştırmacıya göre, karaciğerde fibroz ve siroz gelişimine yol açan bu tür aktive edilmiş Ito hücrelerinin aktivitesidir.

Öte yandan, Ito hücrelerine tamamen beklenmedik konumlardan, yani hematopoezin hepatik aşamasında hepatositler, kolanjiyositler ve kan hücrelerinin gelişimi için mikro ortamın en önemli bileşeni olarak bakmayı mümkün kılan gerçekler yavaş yavaş birikmektedir. ve ayrıca mümkün olduğunca kök (progenitör) karaciğer hücreleri. Bu derlemenin amacı, karaciğerin kök (progenitör) hücre popülasyonuna olası aidiyetlerinin bir değerlendirmesi ile bu hücrelerin doğası ve fonksiyonel önemi hakkındaki mevcut verileri ve görüşleri analiz etmektir.

İto hücreleri, kendileri tarafından üretilen ekstraselüler matrisin makromolekülleri ve yeniden şekillenmesi ve ayrıca büyüme faktörlerinin üretimi nedeniyle karaciğer rejenerasyonu sırasında parankiminin geri kazanılmasında önemli bir katılımcıdır. Ito hücrelerini yalnızca karaciğer fibrozunun ana suçluları olarak gören yerleşik teorinin gerçekliği hakkındaki ilk şüpheler, bu hücrelerin önemli sayıda morfojenik sitokin ürettiği bulunduğunda ortaya çıktı. Bunların arasında önemli bir grup, hepatositler için potansiyel mitojenler olan sitokinlerden oluşur.

Bu grupta en önemlisi, hücre proliferasyonu, hayatta kalması ve motilitesi için gerekli olan hepatosit büyüme faktörü - hepatosit mitojenidir (saçılma faktörü - saçılma faktörü olarak da bilinir. fareler, hepatoblast proliferasyonunun baskılanması, artan apoptoz ve yetersiz hücre yapışması sonucu karaciğer hipoplazisine ve parankiminin tahrip olmasına yol açar.

Hepatosit büyüme faktörüne ek olarak, Ito hücreleri kök hücre faktörü üretir. Bu, kısmi hepatektomi ve 2-asetoaminoflorene maruz bırakıldıktan sonra bir karaciğer rejenerasyonu modelinde gösterilmiştir. Ayrıca, Ito hücrelerinin, hem rejenerasyon sırasında hepatositlerin proliferasyonunda önemli bir rol oynayan hem de Ito hücrelerinin mitozunu uyaran dönüştürücü büyüme faktörü ve epidermal büyüme faktörü salgıladığı bulunmuştur. Hepatositlerin proliferasyonu, kısmi hepatektomiden sonra içlerinde görünen Ito hücreleri tarafından eksprese edilen mezenkimal morfojenik protein epimorfin ve pleiotropin tarafından da tetiklenir.

Hepatositler ve İto hücreleri arasındaki etkileşimin parakrin mekanizmalarına ek olarak, bu hücrelerin hepatositlerle doğrudan hücreler arası temasları da belirli bir rol oynar. Ito hücreleri ve epitel progenitör hücreleri arasındaki hücreler arası temasların önemi in vitro olarak gösterildi; karışık kültürde kültivasyon, ikincisinin albümin üreten hepatositlere farklılaşması için, bir zarla ayrılmış hücrelerin kültive edilmesinden daha etkili olduğunda, sadece çözünür değiş tokuş edebildiklerinde, in vitro olarak gösterildi. kültürel çevre yoluyla faktörler. 13.5 gün boyunca bir farenin fetal karaciğerinden izole edilmiştir. Thy-1 +/C049!±/vimentin+/desmin+/ --GMA+ fenotipine sahip mezenkimal hücreler, doğrudan hücreler arası temas kurduktan sonra, ilkel hepatik endodermal hücre popülasyonunun hepatositlere (glikojen içeren, mRNA eksprese eden) farklılaşmasını uyardı. tirozin aminotransferaz ve triptofanoksij isimleri). Thy-1+/desmin+ mezenkimal hücre popülasyonu, hepatosit, endotel ve Kupffer hücrelerinin belirteçlerini ifade etmedi ve büyük olasılıkla Ito hücreleri tarafından temsil edildi. Sıçan ve insan doğum öncesi karaciğerlerinde in vivo olarak desmin-pozitif Ito hücrelerinin yüksek yoğunluğu ve bunların farklılaşan hepatositlerle yakın temas halinde oldukları kaydedilmiştir. Bu nedenle, tüm bu gerçekler, bu hücre tipinin, hepatositlerin ontogenide normal gelişimi ve onarıcı rejenerasyon sürecinde iyileşmeleri için gerekli olan mikro ortamın en önemli bileşeni olduğu sonucuna varmamızı sağlar.

Son yıllarda, Ito hücrelerinin hematopoietik kök hücrelerin farklılaşması üzerinde önemli bir etkisi olduğunu gösteren veriler elde edilmiştir. Böylece, Ito hücreleri, sadece karaciğer epitel hücrelerinin değil, aynı zamanda hematopoietik kök hücrelerin farklılaşmasını da etkileyen eritropoietin ve nörotrofin üretir. Sıçanlarda ve insanlarda fetal hematopoez çalışması, karaciğerdeki hematopoietik adaların mikroçevresini oluşturanın bu hücreler olduğunu göstermiştir. Ito hücreleri, hematopoietik progenitörlerin kemik iliği stromal hücrelerine yapışmasını sürdürmek için anahtar bir molekül olan vasküler hücre yapışma molekülü-1'i (VCAM-1) ifade eder. Ayrıca, hematopoietik kök hücreler için potansiyel bir kemoatraktan olan stromal faktör-1 - (Stromal kaynaklı faktör-1 -, SDF-1 -) - spesifik reseptör Sistein ile etkileşime bağlı olarak hematopoez bölgesine göçlerini stimüle ederler. X- Sistein reseptörü 4 (CXR4) ve hem karaciğerin kendisinin hem de hepatik hematopoezin bozulduğu bir kusur durumunda homeobox proteini Hlx. Büyük olasılıkla, hematopoietik progenitör hücrelerin daha fazla farklılaşma için fetal karaciğere alınmasını tetikleyen, fetal Ito hücrelerinde VCAM-1 ve SDF-1a'nın ifadesidir. İto hücreleri tarafından biriken retinoidler de hematopoietik hücreler ve epitel için önemli bir morfogenez faktörüdür. İto hücrelerinin mezenkimal kök hücreler üzerindeki etkisinden bahsetmemek mümkün değil. Sıçan karaciğerinden izole edilen ve tamamen aktive olan Ito hücreleri, kemik iliğinde mezenkimal kök hücrelerin (multipotent mezenkimal stromal hücreler) 2 hafta sonra hepatosit benzeri hücrelere (glikojen biriktiren ve tetaz ve fosfoenolpiruvat karboksikinaz eksprese eden) farklılaşmasını modüle eder. birlikte yetiştirme.

Böylece, biriken bilimsel gerçekler, Ito hücrelerinin karaciğerin gelişimi ve yenilenmesi için gerekli olan en önemli hücre tiplerinden biri olduğu sonucuna varmamızı sağlar. Hem fetal hepatik hematopoez hem de doğum öncesi gelişim sırasında hepatositlerin farklılaşması ve ayrıca epitelyal ve mezenkimal progenitör hücrelerin in vitro koşullar altında hepatositlere farklılaşması için mikro ortamı yaratan bu hücrelerdir. Şu anda, bu veriler şüphesizdir ve karaciğerin tüm araştırmacıları tarafından tanınmaktadır. Öyleyse, makalenin başlığında öne sürülen hipotezin ortaya çıkması için başlangıç ​​noktası olarak ne hizmet etti?

Her şeyden önce, görünümü, hem hepatositlerin epitelyal belirteçlerini hem de Ito hücrelerinin mezenkimal belirteçlerini aynı anda eksprese eden hücrelerin karaciğerinde saptanmasıyla kolaylaştırılmıştır. Bu alandaki ilk çalışmalar, memeli karaciğerinin doğum öncesi histo- ve organogenezinin incelenmesinde yapılmıştır. Çalışması, belirli belirteçler kullanarak bir organın çeşitli hücre tiplerinin kesin fenotipinin birincil oluşumunun dinamiklerini doğal koşullarda izlemeyi mümkün kılan anahtar olay olan gelişim sürecidir. Şu anda, bu tür belirteçlerin aralığı oldukça geniştir. Bu konunun araştırılmasına yönelik çalışmalarda, mezenkimal ve epitel hücrelerinin çeşitli belirteçleri, karaciğerin bireysel hücre popülasyonları ve kök (hematopoietik dahil) hücreler kullanılmıştır.

Yapılan çalışmalarda sıçan fetüslerinde desmin pozitif Ito hücrelerinin 14-15 gün arasında geçici olduğu bulunmuştur. gebelikler, sitokeratinler 8 ve 18 gibi hepatoblastların özelliği olan epitelyal belirteçleri ifade eder. Öte yandan, hepatoblastlar aynı zamanda gelişim sırasında hücre belirteci Ito desmin'i ifade eder. Hem mezenkimal hem de epitelyal belirteçleri eksprese eden bir geçiş fenotipine sahip hücrelerin intrauterin gelişimi sırasında karaciğerde varlığını önermeyi ve bu nedenle aynı kaynaktan Ito hücreleri ve hepatositler geliştirme olasılığını düşünmeyi mümkün kılan buydu ve ( veya) bu hücreleri farklı gelişim aşamalarındaki tek ve aynı hücre tipi olarak düşünün. İnsan embriyonik karaciğer materyali üzerinde yapılan histogenez çalışması üzerine daha ileri çalışmalar, bunu 4-8 hafta boyunca gösterdi. İnsan karaciğerinin fetal gelişiminde, Ito hücreleri, çift immünohistokimyasal boyama ile doğrulanan sitokeratin 18 ve 19'u eksprese etti ve hepatoblastlarda desmin için zayıf pozitif boyama kaydedildi.

Bununla birlikte, 2000 yılında yayınlanan bir çalışmada, yazarlar, fare fetüslerinin karaciğerindeki hepatoblastlarda desmin ve Ito hücrelerinde E-kadherin ve sitokeratin ekspresyonunu tespit edemediler. Yazarlar, primer antikorların spesifik olmayan çapraz reaktivitesi ile ilişkilendirdikleri vakaların sadece küçük bir kısmında Ito hücrelerinde sitokeratinler için pozitif boyama elde ettiler. Bu antikorların seçimi bazı şaşkınlıklara neden olur - çalışmada tavuk desmine ve sığır sitokeratinleri 8 ve 18'e karşı antikorlar kullanılmıştır.

Desmin ve sitokeratinlere ek olarak, başka bir mezenkimal belirteç olan vasküler hücre yapışma molekülü VCAM-1, Ito hücreleri ve fare ve sıçan fetal hepatoblastları için ortak bir belirteçtir. VCAM-1, yetişkin sıçan karaciğerindeki Ito hücrelerini miyofibroblastlardan ayıran benzersiz bir yüzey belirtecidir ve ayrıca endoteliyositler veya miyojenik hücreler gibi mezenkimal orijinli diğer birkaç karaciğer hücresinde de bulunur.

Göz önünde bulundurulan hipotez lehine bir başka kanıt, yetişkin sıçanların karaciğerinden izole edilen Ito hücrelerinin mezenkimal-epitelyal transdiferansiyasyonu (dönüşüm) olasılığıdır. Literatürde mezenkimal-epitelyal transdiferansiyasyondan ziyade esas olarak epitelyal-mezenkimal tartışıldığına, ancak her iki yönün de mümkün olduğu kabul edildiğine ve sıklıkla "epitel-mezenkimal transdiferansiyasyon" teriminin herhangi bir yöndeki transdiferansiyasyonu belirtmek için kullanıldığına dikkat edilmelidir. Yazarlar, karbon tetraklorüre (CTC) maruz kaldıktan sonra yetişkin sıçanların karaciğerinden izole edilen Ito hücrelerinde mRNA ve karşılık gelen proteinlerin ekspresyon profilini analiz ettikten sonra, bunlarda hem mezenkimal hem de epitelyal belirteçler buldular. Mezenkimal belirteçler arasında Nestin, --GMA, matris metalloproteinaz-2 (Matriks Metalloproteinaz-2, MMP-2) ve epitelyal belirteçler arasında oval hücrelerin özelliği olan kas piruvat kinaz (Kas piruvat kinaz, MRK), sitokeratin 19, a-FP, E-cadherin ve ayrıca transkripsiyon faktörü Hepatosit nükleer faktör 4- (HNF-4-), hepatosit olmaya yönelik hücrelere özgüdür. Ayrıca, insan epitelyal hepatik progenitör hücrelerinin birincil kültüründe, Itonestin hücre belirteçlerinin mRNA ekspresyonunun meydana geldiği, GFAP - epitelyal progenitörlerin hem epitelyal hem de mezenkimal belirteçleri birlikte eksprese ettiği bulunmuştur. Mezenkimal-epitelyal transdiferansiyasyon olasılığı, bu transdiferansiasyon için gerekli bir enzim olan Integrin-bağlı kinazın (ILK) Ito hücrelerinde ortaya çıkması ile doğrulanır.

Mezenkimal-epitelyal transdiferansiasyon, yoğun bir hücre tek tabakası oluşana kadar sıçan karaciğerinden izole edilen saf bir Ito hücresi popülasyonunu yetiştirmek için orijinal bir yaklaşımın alındığı in vitro deneylerimizde de ortaya çıktı. Bundan sonra hücreler, desmin ve diğer mezenkimal belirteçleri ifade etmeyi bıraktı, epitel hücrelerinin morfolojisini kazandı ve hepatositlerin, özellikle sitokeratinler 8 ve 18'in karakteristik belirteçlerini ifade etmeye başladı. Fetal sıçan karaciğerinin organotipik ekimi sırasında da benzer sonuçlar elde edildi.

Geçen yıl boyunca, Ito hücrelerinin oval hücrelerin bir alt tipi veya bunların türevleri olarak kabul edildiği iki makale yayınlandı. Oval hücreler, bazı toksik karaciğer hasarı modellerinde karaciğerde görülen ve şu anda hem hepatositlere hem de kolanjiyositlere farklılaşabilen bipotent progenitör hücreler olarak kabul edilen dar bir sitoplazma kenarına sahip küçük, oval şekilli hücrelerdir. İzole edilmiş Ito hücreleri tarafından ifade edilen genlerin, oval hücreler tarafından ifade edilen genlerle çakıştığı ve belirli Ito hücrelerinin yetiştirilmesi koşulları altında hepatositler ve safra kanalı hücrelerinin ortaya çıktığı gerçeğine dayanarak, yazarlar, Ito hücrelerinin bir tür olduğu hipotezini test etti. Hasarlı bir karaciğeri yenilemek için hepatositler üretebilen oval hücreler. Transgenik GFAP-Cre/GFP (Yeşil floresan protein) fareleri, Ito hücrelerini ve oval hücreleri aktive etmek için metiyonin-kolin-eksik/etiyonin-zenginleştirilmiş bir diyetle beslendi. Dinlenme Ito hücreleri bir GFAP+ fenotipine sahipti. Ito hücreleri, yaralanma veya kültür ile aktive edildikten sonra, GFAP ekspresyonları azaldı ve oval ve mezenkimal hücrelerin belirteçlerini eksprese etmeye başladılar. GFP+ hepatositleri göründüğünde oval hücreler kayboldu, albümin eksprese etmeye başladı ve sonunda hepatik parankimdeki geniş alanların yerini aldı. Yazarlar, bulgularına dayanarak, Ito hücrelerinin bir "mezenkimal" faz yoluyla hepatositlere farklılaşan oval hücrelerin bir alt tipi olduğunu varsaydılar.

Oval hücrelerin aynı aktivasyon modeli üzerinde gerçekleştirilen deneylerde, ikincisi sıçanların karaciğerinden izole edildiğinde, in vitro oval hücrelerin sadece geleneksel 0V-6, BD-1/BD-2 ve M2RK ve kollajenler, matris metalloproteinazlar ve metalloproteinazların doku inhibitörleri dahil hücre dışı matris belirteçleri - Ito hücrelerinin belirteç özellikleri. TGF-pl hücrelerine maruz kaldıktan sonra, büyüme baskılanması ve morfolojik değişikliklere ek olarak, bu genlerin ekspresyonunda, ayrıca desmin ve GFAP genlerinde, epitelden sorumlu Salyangoz transkripsiyon faktörünün ekspresyonunun görünümünde bir artış oldu. -mezenkimal transdiferansiyasyon ve oval hücrelerin Ito hücrelerine "ters" transdiferansiasyon olasılığını gösteren E-cadherin ekspresyonunun kesilmesi.

Oval hücreler geleneksel olarak hem hepatositlerin hem de kolanjiyositlerin bipotent öncüleri olarak kabul edildiğinden, intrahepatik safra kanallarının epitel hücreleri ile İto hücreleri arasında geçiş formlarının varlığının olasılığını ortaya koymaya yönelik girişimlerde bulunulmuştur. Böylece normal ve hasarlı karaciğerde, duktal tipte küçük yapıların Ito hücre markeri - GMA için pozitif boyandığı, ancak immünofloresan boyama sonuçlarını yansıtan makalede sunulan fotoğraflarda, mümkün olduğu gösterilmiştir. bunların gerçekte ne olduğunu belirlemek - GMA+ duktal yapılar - safra kanalları veya kan damarları - mümkün değildir. Bununla birlikte, kolanjiyositlerde Ito hücre belirteçlerinin ekspresyonunu gösteren başka sonuçlar yayınlanmıştır. L. Yang'ın daha önce bahsedilen çalışmasında, safra kanalı hücreleri tarafından Ito hücre markörü GFAP'nin ifadesi gösterilmiştir. Normal karaciğerde Ito hücrelerinde ve vasküler hücrelerde bulunan hücre iskeletinin ara filamentlerinin proteini sinemin, duktuler reaksiyonun gelişiminde rol oynayan duktal hücrelerde ortaya çıktı; aynı zamanda kolanji karsinom hücrelerinde de eksprese edildi. Bu nedenle, Ito hücrelerinin ve hepatositlerin karşılıklı transdiferansiyasyonu olasılığına ilişkin birçok kanıt varsa, o zaman kolanjiyositlerle bu tür gözlemler hala tektir ve her zaman açık değildir.

Özetle, karaciğerin hem histo- ve organogenezi sırasında hem de çeşitli deneysel koşullar altında hem in vivo hem de in vitro mezenkimal ve epitelyal belirteçlerin ekspresyon kalıplarının hem mezenkimal-epitelyal hem de epitelyal-mezenkiyal küçük olasılığını gösterdiğini söyleyebiliriz. Ito hücreleri/oval hücreler/hepatositler arasındaki geçişler ve dolayısıyla Ito hücrelerini hepatosit gelişiminin kaynaklarından biri olarak görmemize izin verir. Bu gerçekler, şüphesiz bu hücre tipleri arasındaki ayrılmaz ilişkiye işaret eder ve ayrıca İto hücrelerinin önemli bir fenotipik plastisitesine işaret eder. Bu hücrelerin olağanüstü plastisitesi, daha önce bahsedilen GFAP, nestin, nörotrofinler ve onlar için reseptörler, nöronal hücre yapışma molekülü (N-CAM), sinaptofizin, sinir büyüme faktörü gibi bir dizi nöral proteinin ekspresyonu ile de kanıtlanır. (Nöral büyüme faktörü, NGF), beyin kaynaklı nörotrofik faktör (BDNF), bazı yazarların temelinde, nöral tepeden Ito hücrelerinin gelişme olasılığını tartışıyor. Bununla birlikte, son on yılda, araştırmacılar başka bir versiyona, yani hematopoietik ve mezenkimal kök hücrelerden hepatositler ve Ito hücreleri geliştirme olasılığına büyük dikkat çekiyorlar.

Bu olasılığın kanıtlandığı ilk çalışma V.E. Hepatositlerin hematopoietik bir kök hücreden gelişebileceğini gösteren Petersen ve ark. Daha sonra, bu gerçek diğer bilim adamlarının çalışmalarında tekrar tekrar doğrulandı ve biraz sonra mezenkimal kök hücreler için hepatositlere farklılaşma olasılığı da gösterildi. Bunun nasıl olduğu - donör hücrelerin alıcı karaciğer hücreleriyle füzyonu veya transdiferansiasyonu yoluyla - hala net değil. Bununla birlikte, kısmi hepatektomi geçirmiş sıçanların dalağına nakledilen insan göbek kordonu kanı hematopoietik kök hücrelerinin karaciğeri kolonize ettiğini ve bu hücrelerde insan hücre belirteçlerinin varlığının kanıtladığı gibi hepatositler ve sinüzoidal karaciğer hücrelerine farklılaşabildiğini bulduk. türleri. Ek olarak, göbek kordonu kan hücrelerinin ön genetik modifikasyonunun, nakil sonrası alıcının karaciğerindeki dağılımlarını ve farklılaşma olasılığını önemli ölçüde etkilemediğini ilk kez gösterdik. Prenatal histogenez sırasında hematopoietik kök hücrelerden hepatosit geliştirme olasılığına gelince, bu olasılık tamamen dışlanamasa da, bu hücrelerin morfolojisi, lokalizasyonu ve fenotipi karaciğer hücrelerinden önemli ölçüde farklı olduğundan, yine de olası görünmemektedir. Görünüşe göre, böyle bir yol varsa, ontogeni sırasında epitelyal ve sinüzoidal hücrelerin oluşumunda önemli bir rol oynamaz. Hem in vivo hem de in vitro olarak yapılan son çalışmaların sonuçları, karaciğerin bölgesel kök hücresinin yalnızca ön bağırsağın endodermal epitelinden hepatositlerin gelişiminin köklü teorisi hakkında şüphe uyandırdı. mezenkimal hücreleri arasında yer alabilir. Ito hücreleri böyle hücreler olabilir mi?

Bu hücrelerin benzersiz özellikleri, olağanüstü plastisiteleri ve Ito hücrelerinden hepatositlere geçiş fenotipine sahip hücrelerin varlığı göz önüne alındığında, bu hücrelerin bu rol için ana yarışmacı olduğunu varsayıyoruz. Bu olasılığı destekleyen ek argümanlar, hepatositler gibi bu hücrelerin hematopoietik kök hücrelerden oluşturulabilmesi ve kök (progenitör) hücrelerin belirteçlerini ifade edebilen tek sinüzoidal karaciğer hücreleri olmalarıdır.

2004 yılında, Ito hücrelerinin bir hematopoietik kök hücreden de gelişebileceği bulundu. GFP farelerinden kemik iliği hücrelerinin transplantasyonundan sonra, Ito hücre markörü GFAP'yi eksprese eden GFP+ hücreleri, alıcı farelerin karaciğerinde ortaya çıktı ve bu hücrelerin süreçleri hepatositler arasına nüfuz etti. Alıcının karaciğerinin CTC tarafından hasar görmesi durumunda, nakledilen hücreler ayrıca patlama benzeri Ito hücreleri ifade etti. Parankimal olmayan hücrelerin fraksiyonu alıcı farelerin karaciğerinden izole edildiğinde, lipid damlaları olan GFP+ hücreleri, izole edilen hücrelerin %33.4+2.3'ünü oluşturuyordu; desmin ve GFAP'yi ifade ettiler ve 7 gün sonra. yetiştirme

Öte yandan, kemik iliği hücrelerinin transplantasyonu, sadece Ito hücrelerinin değil, aynı zamanda tip I kollajen geninin de oluşumuna yol açar, bu temelde, bu tür transplantasyonun fibroz gelişimine katkıda bulunduğu sonucuna varılır. Bununla birlikte, nakledilen hücrelerin fibröz septaya göç etmesi ve bu hücreler tarafından matriks metalloproteinaz-9 (Matriks Metalloproteinaz-9, MMP-9) üretmesi nedeniyle karaciğer fibrozunda bir azalmanın gösterildiği çalışmalar da vardır. İto hücrelerinin en önemli özellikleri. Ön verilerimiz ayrıca şiddetli karaciğer fibrozu olan kronik hepatitli hastalarda periferik kan mononükleer fraksiyonunun ototransplantasyonundan sonra miyofibroblast sayısında bir azalma ve fibroz seviyesinde bir azalma gösterdi. Ek olarak, hematopoietik kök hücre transplantasyonunun bir sonucu olarak, alıcının karaciğerinde hücre dışı matris üretebilen diğer hücre tipleri görünebilir. Bu nedenle, safra kanalı ligasyonu tarafından indüklenen karaciğer hasarında, kollajen eksprese eden farklılaşmış fibrositlerin nakledilen hücreleri ve sadece TGF-pl varlığında yetiştirildiklerinde, potansiyel olarak fibrozise katkıda bulunan farklı miyofibroblastlar olurlar. Bu nedenle yazarlar, kemik iliği hücre transplantasyonundan sonra karaciğer fibrozu riskini Ito hücreleriyle değil, “benzersiz bir fibrosit popülasyonu” ile ilişkilendirdiler. Elde edilen verilerin tutarsızlığı nedeniyle, tartışma bir soruya daha döndü - Nakledilen hematopoietik kök hücrelerin farklılaşması sonucu ortaya çıkan Ito hücrelerinin fibrozis gelişimine katkıda bulunacağı veya tam rejenerasyonunu sağlayacak mı? karaciğer dokusu ve fibroz azalması. Son yıllarda, (yukarıdaki veriler dahil olmak üzere) karaciğerdeki miyofibroblastların kökeninin farklı olabileceği - Ito hücrelerinden, portal yol fibroblastlarından ve hatta hepatositlerden - açık hale geldi. Çeşitli kökenlerden miyofibroblastların bir takım özelliklerde farklılık gösterdiği de tespit edilmiştir. Bu nedenle aktive edilmiş İto hücreleri, vitamin içeriği, kontraktil aktivite, sitokinlere, özellikle TGF-β'ya yanıt ve spontan apoptoz yeteneği açısından portal sistem miyofibroblastlarından farklıdır. Ek olarak, bu hücre popülasyonları farklıdır ve mümkün olduğunda, Ito hücrelerinde bulunan ve miyofibroblastlarda bulunmayan vasküler hücre yapışma molekülü VCAM-1'i eksprese eder. Aktive edilmiş İto hücrelerinin ekstrasellüler matriks proteinlerinin üretimine ek olarak bu matriksi yok eden matriks metalloproteinazları da ürettiğini söylememek mümkün değil. Bu nedenle, hematopoietik kök hücrelerden oluşturulanlar da dahil olmak üzere Ito hücrelerinin fibroz gelişimindeki rolü, daha önce düşünüldüğü kadar açık olmaktan uzaktır. Görünüşe göre, yaralanmadan sonra karaciğer onarımı sürecinde hücre dışı matrisi yeniden şekillendirerek fibrozu teşvik etmiyorlar, böylece karaciğer parankimal hücrelerinin yenilenmesi için bir bağ dokusu iskelesi sağlıyorlar.

sıçanların normal ve hasarlı karaciğeri. Sıçan Ito hücreleri ayrıca kök (progenitör) hücrelerin başka bir belirtecini - CD133'ü eksprese eder ve koşullara bağlı olarak çeşitli tiplere farklılaşabilen progenitör hücrelerin özelliklerini gösterir - 2) endotel hücrelerine farklılaşmayı kolaylaştıran sitokinler eklerken, indüksiyon ile dallı tübüler yapılar oluşturur işaretleyici ekspresyon endotel hücrelerinin - endotelyal NO-sentaz ve vasküler endotelyal kaderin; 3) kök hücrelerin hepatositlere farklılaşmasını destekleyen sitokinler kullanıldığında - hepatosit belirteçlerini ifade eden yuvarlak hücrelere - FP ve albümin. Ayrıca sıçan Ito hücreleri, pluripotent kök hücrelerin özelliği olan 0ct4'ü eksprese eder. İlginç bir şekilde, Ito hücre popülasyonunun sadece bir kısmı, anti-CD133 antikorları kullanılarak manyetik bir sıralayıcı tarafından izole edilebilir; bununla birlikte, standart (pronaz/kollajenaz) izolasyondan sonra, tüm plastik bağlı hücreler CD133 ve 0kt4 eksprese etti. Progenitör hücreler için başka bir belirteç olan Bcl-2, insan karaciğerinin doğum öncesi gelişimi sırasında desmin+ hücreleri tarafından eksprese edilir.

Bu nedenle, çeşitli araştırmacılar, kök (progenitör) hücrelerin belirli belirteçlerinin Ito hücreleri tarafından ekspresyon olasılığını göstermiştir. Ayrıca, yakın zamanda ilk kez, Ito hücrelerinin yer aldığı bazal membran proteinleri, endotel hücreleri ve hepatositlerin oluşturduğu Disse boşluğunun, Ito hücrelerinin yer aldığı bir mikroçevre oluşturabileceğine dair bir hipotezin öne sürüldüğü bir makale yayınlanmıştır. kök hücreler için bir “niş” olarak. Bu, kök hücre nişinin birkaç özelliği ile kanıtlanır ve Ito hücrelerinin mikro ortamının bileşenlerinde tanımlanır. Bu nedenle, gövdeye yakın bulunan hücreler, çözünür faktörler üretmenin yanı sıra, kök hücreyi farklılaşmamış bir durumda tutan ve genellikle bazal membran üzerinde bulunan bir niş içinde tutan doğrudan etkileşimleri gerçekleştirmelidir. Gerçekten de, karaciğerin sinüzoidal kılcal damarlarının endotel hücreleri, spesifik olarak Ito hücre reseptörü CXR4'e bağlanan ve bu hücrelerin in vitro göçünü uyaran çözünür SDF-1'i sentezler. Bu etkileşim, hematopoietik kök hücrelerin, ontogenez sırasında kemik iliğindeki son nişlerine göç etmelerinde ve burada kalıcı olarak ikamet etmelerinde ve ayrıca periferik kana mobilizasyonlarında önemli bir rol oynar. Böyle bir etkileşimin karaciğerde benzer bir rol oynayabileceğini ve Ito hücrelerini Disse alanında tutabileceğini varsaymak mantıklıdır. Karaciğer rejenerasyonunun erken aşamalarında, SDF-1 ekspresyonundaki bir artış, ek vücut kök hücre bölmelerinin alınmasına da yardımcı olabilir. Niş hücrelerin innervasyonu, hematopoietik kök hücrelerin alımının düzenlenmesinde yer alan sempatik sinir sistemini içermelidir. Sempatik sinir sisteminin noradrenerjik sinyalleri GCSF'de (granülosit koloni uyarıcı faktörl kaynaklı hematopoietik kök hücrelerin kemik iliğinden mobilizasyonu) kritik bir rol oynar. Sinir uçlarının Ito hücrelerinin yakın çevresindeki konumu birkaç çalışmada doğrulanmıştır. Ayrıca sempatik uyarıya yanıt olarak Ito hücrelerinin, yakındaki parankimal hücrelerde glikojenolizi aktive eden prostaglandinler F2a ve D salgıladıkları da bulunmuştur. Bu gerçekler, sempatik sinir sisteminin Ito hücre nişi üzerinde bir etkisi olabileceğini düşündürmektedir. Sapın başka bir işlevi hücre nişi, "yavaş" bir hücre döngüsünü ve farklılaşmamış bir kök hücre durumunu sürdürmektir. Ito hücrelerinin farklılaşmamış durumunun in vitro koşullar altında korunması, parankimal karaciğer hücreleri tarafından kolaylaştırılır - bir zarla ayrılmış bu iki hücre popülasyonu yetiştirildiğinde, kök hücre belirteçleri CD133 ve 0kt4'ün ifadesi, Ito hücrelerinde korunurken, hepatositlerin yokluğunda, İto hücreleri, miyofibroblastların fenotipini kazanır ve kök hücre belirteçlerini kaybeder. Bu nedenle, kök hücre belirteçlerinin ifadesi, şüphesiz, dinlenme halindeki Ito hücrelerinin bir özelliğidir. Parankimal hücrelerin Ito hücreleri üzerindeki etkisinin, hepatositler tarafından sentezlenen parakrin faktörleri Wnt ve Jag1'in Ito hücrelerinin yüzeyindeki karşılık gelen reseptörler (Myc, Notchl) ile etkileşimine dayanabileceği de tespit edilmiştir. Wnt/b-katenin ve Notch sinyal yolları, kök hücrelerin, sonraki farklılaşma olmaksızın yavaş simetrik bölünme ile kendini yenileme yeteneğini destekler. Nişin bir diğer önemli bileşeni, Ito hücrelerinin uyku durumunu koruyan ve farklılaşmalarını baskılayan bazal membran proteinleri, laminin ve kollajen IV'tür. Benzer bir durum, uydu hücrelerin (kas dokusunun kök hücreleri) ve farklılaşmamış spermatogonia'nın sırasıyla kas lifinin veya "spermatojenik epitelin" bazal membranı ile yakın temas halinde olduğu kas liflerinde ve kıvrımlı seminifer tübüllerde meydana gelir. Açıkçası, kök hücrelerin hücre dışı matris proteinleri ile etkileşimi, son farklılaşmalarının tetiklenmesini engeller. Bu nedenle elde edilen veriler, Ito hücrelerini, Disse alanının hizmet edebileceği bir niş olan kök hücreler olarak düşünmemize izin verir.

İto hücrelerinin kök potensi ve bu hücrelerden hepatosit oluşumu olasılığı hakkındaki verilerimiz, kısmi hepatektomi modellerinde in vivo karaciğer rejenerasyonu ve kurşun nitrat ile karaciğere toksik hasar çalışması üzerine yapılan deneylerde doğrulandı. Geleneksel olarak, bu karaciğer rejenerasyon modellerinde, kök kompartman aktivasyonunun meydana gelmediğine ve oval hücrelerin bulunmadığına inanılmaktadır. Bununla birlikte, her iki durumda da yalnızca Ito hücrelerinin aktivasyonunu değil, aynı zamanda bunlarda başka bir kök hücre belirtecinin, yani C-kit kök hücre faktörü reseptörünün ifadesini gözlemlemenin mümkün olduğunu belirlemeyi başardık. C-kit ekspresyonu, esas olarak C-kit-pozitif Ito hücreleri ile temas halinde bulunan (daha az yoğun olduğu) tekli hepatositlerde de not edildiğinden, bu hepatositlerin C-kit+Ito hücrelerinden farklılaştığı varsayılabilir. Bu hücre tipinin sadece hepatosit popülasyonunun restorasyonu için koşullar yaratmadığı, aynı zamanda kök bölgesel karaciğer hücrelerinin bir nişini işgal ettiği açıktır.

Böylece, Ito hücrelerinin, çeşitli geliştirme, rejenerasyon ve yetiştirme koşulları altında en az beş kök hücre belirteci ifade ettiği artık tespit edilmiştir. Bugüne kadar toplanan tüm veriler, Ito hücrelerinin hepatositlerin (ve muhtemelen kolanjiyositlerin) gelişme kaynaklarından biri olan bölgesel karaciğer kök hücrelerinin rolünü oynayabileceğini ve aynı zamanda karaciğer morfogenezi için mikro ortamın en önemli bileşeni olduğunu göstermektedir. hepatik hematopoez. Yine de, bu hücrelerin karaciğerdeki kök (progenitör) hücre popülasyonuna ait olduğu konusunda kesin sonuçlara varmak için erken görünüyor. Bununla birlikte, bu yönde, başarılı olursa, kök hücre transplantasyonuna dayalı karaciğer hastalıklarını tedavi etmek için etkili yöntemlerin geliştirilmesi için umutlar açacak yeni araştırmalara açık bir ihtiyaç vardır.