interferon lökosit gen virüsü

Şu anda, mikrobiyolojik sentez yoluyla interferon elde etme yöntemi daha umut verici olarak kabul edilmektedir, bu da hedef ürünün nispeten ucuz bir hammaddeden çok daha yüksek verimle elde edilmesini mümkün kılmaktadır. Bu durumda kullanılan yaklaşımlar, bakteriyel ekspresyon için optimal olan yapısal gen varyantlarının yanı sıra ekspresyonunu kontrol eden düzenleyici elementler yaratmayı mümkün kılar.

Pichia pastoris, Pseudomonas putida ve Escherichia coli suşlarının çeşitli tasarımları başlangıç ​​mikroorganizmaları olarak kullanılmaktadır.

Bir interferon üreticisi olarak P. pastoris kullanmanın dezavantajı, bu tür maya için son derece zor fermantasyon koşulları, biyosentez işlemi sırasında indükleyicinin, özellikle metanolün konsantrasyonunun sıkı bir şekilde muhafaza edilmesi ihtiyacıdır.

Ps suşlarını kullanmanın dezavantajı. putida, düşük bir ifade seviyesindeki fermantasyon sürecinin karmaşıklığıdır (1 litre kültür ortamı başına 10 mg interferon). Escherichia coli suşlarının kullanılması daha verimlidir.

Bilinen çok sayıda plazmitler ve interferon eksprese eden E. coli suşları: Z-pBR322 (Psti) HclF-11-206 veya Z-pBR 322(Pstl)/HclN SN 35-AHL6 (SU 1764515) plazmitli E. coli suşları ATCC 31633 ve 31644, E. coli suşu pINF-AP2 (SU 1312961), E. coli suşu pINF-F-Pa (AU 1312962), p280/21FN plazmitli E. coli suşu SG 20050, pINF14 plazmitli E. coli suşu SG 20050 (SU 1703691) ), plazmit pINF16 (RU 2054041) ile E. coli SG 20050, vb. Bu suşların kullanımına dayalı teknolojilerin dezavantajı, kararsızlıklarının yanı sıra yetersiz interferon ekspresyonu seviyesidir.

Kullanılan suşların özelliklerinin yanı sıra, işlemin verimliliği büyük ölçüde interferonun izolasyonu ve saflaştırılması için kullanılan teknolojiye bağlıdır.

Ps hücrelerinin kültivasyonunu içeren interferon üretimi için bilinen bir yöntem. putida, biyokütle imhası, polietilenimin işlemi, amonyum sülfat fraksiyonasyonu, fenilsilokrom C-80 üzerinde hidrofobik kromatografi, lizatın pH fraksiyonasyonu, konsantrasyonu ve diafiltrasyonu, DE-52 selüloz üzerinde iyon değişim kromatografisi, pH gradyan elüsyonu, iyon değişim kromatografisi CM selüloz -52 üzerinde elde edilen eluent, bir filtre kasetinden geçirilerek konsantrasyon ve Sephadex G-100 (SU 1640996) üzerinde jel filtrasyonu. Bu yöntemin dezavantajı, karmaşık çok aşamalı fermantasyona ek olarak, nihai ürünün elde edilmesinde çok aşamalı işlemdir.

E. coli SG 20050/pIF16 suşunun termostatlı bir çalkalayıcıda şişelerde LB broth içinde yetiştirilmesini, biyokütlenin santrifüj edilmesini, bir tampon solüsyonu ile yıkanmasını ve hücreleri yok etmek için sonikasyonu içeren interferon üretmeye yönelik bir yöntem de bilinmektedir. Elde edilen lizat santrifüjlenir, tampon içinde 3 M üre ile yıkanır, tampon içinde guanidin klorür içinde çözülür, sonikasyona tabi tutulur, santrifüjlenir, oksidatif sülfitoliz, 8 M üreye karşı diyaliz, renatürasyon ve CM-52 selüloz ve Sephadex G üzerinde son iki aşamalı kromatografi -50 ( EN 2054041) .

Bu yöntemin dezavantajları, izolasyon ve saflaştırma işleminin ana aşamalarının nispeten düşük verimliliğidir. Özellikle, bu, ürünün ultrasonik işlenmesi, diyaliz ve oksidatif sülfitoliz için geçerlidir, bu da interferon veriminde kararsızlığa ve ayrıca bu yöntemin endüstriyel interferon üretimi için kullanılmasının imkansızlığına yol açar.

En yakın analog (prototip) olarak, insan lökosit interferonunun üretilmesi için bir yöntem belirtilebilir; bu, rekombinant bir E. coli suşunun yetiştirilmesinden, elde edilen biyokütlenin -70 ° C'yi aşmayan bir sıcaklıkta dondurulmasından, eritilmesinden, mikroorganizma hücrelerinin yok edilmesinden oluşur. lizozim ile, DNA ve RNA'nın DNaz lizatına dahil edilerek çıkarılması ve izole edilmiş çözünmeyen interferon formunun deterjanlarla bir tampon çözeltisi ile yıkanarak saflaştırılması, interferon çökeltisinin bir guanidin hidroklorür çözeltisi içinde çözülmesi, renatürasyon ve tek aşamalı saflaştırma ile iyon değişim kromatografisi. Bir üretici olarak, üç promotör içeren bir rekombinant pSS5 plazmidi kullanılarak elde edilen bir E. coli SS5 suşu: Plac, Pt7 ve Ptrp ve nükleotid ikamelerine sahip bir alfa-interferon geni kullanılır.

Bu plazmidi içeren E. coli SS5 suşu tarafından interferon ekspresyonu, üç promotör tarafından kontrol edilir: Plac, Pt7 ve Ptrp. İnterferonun ekspresyon seviyesi, 1 litre hücre süspansiyonu başına yaklaşık 800 mg'dır.

Bu yöntemin dezavantajı, hücrelerin enzimatik yıkımının, mikroorganizmanın DNA ve RNA'sının kullanımının düşük üretilebilirliği ve interferonun tek aşamalı kromatografik saflaştırılmasıdır. Bu, interferon izolasyon sürecinin kararsızlığına neden olur, kalitesinde bir düşüşe yol açar ve yukarıdaki şemayı interferonun endüstriyel üretimi için kullanma olasılığını sınırlar.

Bu plazmitin ve buna dayanan suşun dezavantajları, T7 RNA polimeraz geninin lac operon promotörü altında yer aldığı E. coli BL21 (DE3) suşunda güçlü bir regüle edilmemiş T7 faj promotörünün plazmitinde kullanılmasıdır ve hangi her zaman "akar". Sonuç olarak, hücrede sürekli olarak interferon sentezi meydana gelir, bu da plazmitin ayrışmasına ve suşun hücrelerinin canlılığının azalmasına ve bunun sonucunda interferon veriminde bir azalmaya yol açar.

Rekombinant interferon elde etmeye bir örnek:

Rekombinant p VG-3 plazmidini içeren 600 g Pseudomonas putida 84 hücrelerinin biyokütlesi, kültivasyondan sonra 130 mg alfa-2 interferon içeriyordu. Hücreler, 5.0 l kapasiteli mekanik bir karıştırıcı ve %1.2 sodyum klorür, %1.2 tris-(hidroksimetil)-aminometan, %10 sakaroz, %015 etilendiamintetraasetik asit (EDTA) içeren 3.0 litre liziz tamponu olan bir balistik parçalayıcıya yüklendi. ), pH 7.7'de %0.02 fenilmetilsülfonil florür ve %0.01 ditiotreitol. Biyokütle, 30 dakika boyunca homojen bir süspansiyon elde edilene kadar karıştırıldı, ardından çalıştırma talimatlarına uygun olarak bir balistik parçalayıcıda sirkülasyon modunda parçalandı. Parçalanma süresi 1.5 saat olmuştur Parçalanma işlemi, preparasyonun mikroskopisi sırasında, mikroskobun çeşitli görüş alanlarında pratik olarak hiçbir mikroorganizma hücresinin gözlenmediği zaman tamamlanmıştır. Parçalanmış biyokütle süspansiyonunun hacmi 3.5 litre idi.

Bu aşamada elde edilen lizat daha sonra nükleik asitlerin çökeltilmesi aşamasına girmiştir. Bunu yapmak için, lizatı içeren kaba, 1-1.2 l/saat hızında karıştırılarak 180 ml %5'lik bir polietilenimin çözeltisi ilave edildi. Süspansiyon 1 saat karıştırıldı ve nükleik asitlerin çökeltisini ayırmak için 1 saat (9500±500) rpm'de (5±2)C sıcaklıkta santrifüjlendi. Santrifüjden sonra, hacmi 3.0 l olan süpernatan ayrıldı.

Bir karıştırıcı ile yavaşça karıştırılarak, süpernatana küçük porsiyonlar halinde 182 g kuru amonyum sülfat döküldü (bir sonraki her bir kısım, bir öncekinin tamamen çözülmesinden sonra ilave edildi). Amonyum sülfat ilavesi tamamlandıktan sonra tuz tamamen eriyene kadar karıştırmaya devam edildi ve protein çökelti süspansiyonu (5 ± 2) C'de 16 saat tutuldu ve sonra 1 saat (13500 ±)'de santrifüjlendi. 500) rpm (5 ± 2) FROM sıcaklığında.

Elde edilen çökelti damıtılmış su içinde çözülerek toplam hacim 4 litreye ulaştı. Alfa-2 interferon içeren nihai çözeltinin asit fraksiyonasyonu, eşlik eden proteinleri çökeltmek için yapıldı. Bunu yapmak için, pH 4.75'e kadar çözeltiye 5.0 ml %50 asetik asit ilave edildi. Elde edilen karışım bir buzdolabına aktarıldı ve 3 saat (5±2)С sıcaklıkta bırakıldı, ardından protein süspansiyonu (13500±500) rpm'de (5±2)С'de 30 dakika santrifüjlendi.

4 1 üstte yüzen maddeye 50.0 ml 1 M Tris çözeltisi pH (6.9 ± 0.1) değerine eklenmiştir. Lowry yöntemiyle belirlenen toplam protein konsantrasyonu 9.0 mg / ml, alfa-2 interferonun (6.80.5) biyolojik aktivitesi 106 IU / ml idi. Spesifik aktivite 8.5105 IU/mg. Bu aşamadaki toplam alfa-2 interferon içeriği 2.91010 IU'dur.

Sorbent Soloz KG 0.6 l miktarında sulu bir süspansiyon halinde kromatografik bir kolona yerleştirildi. Daha sonra, bir peristaltik pompa kullanılarak, 2.0 L 0.2 M sodyum hidroksit solüsyonu, 6.0 L distile su ve 4.5 L 0.05 M Tris-asetat tampon solüsyonu sırayla sorbentten pH'ta (7.1 ± 0, 1) geçirildi; kolon çıkışında pH metre ile izlendi.

Alfa-2 interferon içeren protein solüsyonu, oda sıcaklığında (6.0+2.0) mS/cm iletkenliğe kadar damıtılmış su ile seyreltildi. Bu durumda çözeltinin hacmi 19.2 litre idi.

Solüsyon kolona 1.5 l/saat hızında uygulandı, ardından sorbent pH 7.0'da 2.0 İt Tris-asetat tamponu 0.05 M ile yıkandı. Elüsyon, pH (10.2±0.1) olan 1.2 l 0.05 M Tris solüsyonu ile gerçekleştirildi Fraksiyon toplayıcı kullanılarak toplanan fraksiyonlardaki interferon içeriği, enzim immünoanalizi ile belirlendi.

Lowry yöntemiyle belirlenen toplam protein konsantrasyonu (2.2 ± 0.2) mg / ml, alfa-2 interferonun biyolojik aktivitesi (2.1 ± 0.5) 107 IU / ml, ilacın spesifik aktivitesi (9.7'dir) ± 0,5)106 IU/mg. Bu aşamadaki toplam alfa-2 interferon içeriği (1.5±0.5)1010 IU'dur.

Sulu bir süspansiyon halinde 0.15 l miktarındaki spherocell qae sorbent kolona yüklendi ve 0.15 l/saat hızında art arda 0.5 l 2 M sodyum klorür çözeltisi, 1.5 l distile su ve 1.0 l ile yıkandı. pH 8.0 ile 0.05 M tris-asetat tampon solüsyonu, kolonun çıkışındaki tampon solüsyonunun pH'ını bir pH metre ile kontrol eder.

Alfa-2 interferon içeren 0.7 l'lik bir protein solüsyonu, 0.15 l'lik bir Spherocell-QAE sorbent kolonuna 0.2 l/saat hızında uygulandı. Kolon, 0.1 L hacimde 0.05 M Tris-asetat tampon solüsyonu (pH 8.0) ile yıkandı, daha sonra safsızlık proteinleri, 0.05 M NaCl ilavesiyle 1.0 L aynı tampon solüsyonuyla yıkandı. İnterferon, pH 5.0'da 0.8 1 0.1 M sodyum asetat tampon çözeltisi ile yıkandı. Bir toplayıcı kullanılarak toplanan fraksiyonlardaki alfa-2 interferon içeriği, enzim immünoanalizi ile belirlendi. Protein konsantrasyonu (0.35±0.05) mg/ml, alfa-2 interferonun biyolojik aktivitesi (1.7±0.2) 107 IU/ml idi. İlacın spesifik aktivitesi 5.5107 IU/mg proteindir. Elüat, 1.20 x 1010 IU içeriyordu. Bu aşamada biyolojik aktivite verimi %82,5'tir.

Nihai çözelti, %50 asetik asit ile pH (5.0±0.1)'e ayarlandı ve 0.05 M sodyum asetat tamponu ile seyreltildi. Spesifik elektrik iletkenliği (5±2)C sıcaklıkta (0.29±0.02) mS/cm idi. Bu şekilde hazırlanan protein solüsyonu, 0.1 l/saat hızında Spherocell LP-M sorbentli bir kolona uygulandı, 0.3 l yukarıdaki tampon solüsyonu ile yıkandı ve daha sonra interferon, lineer bir sodyum klorür konsantrasyonu kullanılarak ayrıştırıldı. bir Ultragrad gradyan mikseri kullanılarak oluşturulan gradyan Eluat, bir fraksiyon toplayıcı kullanılarak fraksiyonlandı ve toplam protein ve alfa-2 interferon konsantrasyonu ölçüldü. Birleştirilmiş fraksiyonlarda protein konsantrasyonu (0.45±0.02) mg/ml. Çözeltinin hacmi 0.1 l'dir. Alfa-2 interferon (8,6±0,2) toplam içeriği 109 IU. Spesifik aktivite - e (7.5 ± 0.2) 107 IU / mg. Bu aşamada verim %73'tür.

Elde edilen 3 0.1 L solüsyon, bir Amicon YM-3 membranı kullanılarak bir ultrafiltrasyon hücresi ile (5.0±0.2) ml'ye konsantre edildi. Bu şekilde hazırlanan numune, 0.025 l/saat hızında fosfat tamponlu salin ile dengelenmiş bir Sephadex G-100 sorbent kolonuna uygulandı. Kesirlerin hacmi 10.0 ml'dir. Kromatografiden sonra elde edilen fraksiyonlar, alfa-2 interferon içeriği için enzim immünoanaliz ile ve alfa-2 interferonun ana zirvesini içeren fraksiyonların birleştirilmesiyle test edildi. Ortaya çıkan çözeltinin hacmi 30.2 ml idi. Lowry yöntemiyle belirlenen toplam protein konsantrasyonu (0.90±0.02) mg/ml. Çözeltideki toplam alfa-2 interferon içeriği 5.5109 IU'dur. Elde edilen alfa-2 interferon ilacının spesifik aktivitesi 2.3108 IU/mg. Bu aşamada alfa-2 interferon çıkışı %90.2'dir. Ortaya çıkan ürün sterilize edildi ve paketlendi. İlacın toplam verimi, saflaştırma aşamasında %51 olmak üzere %35.8'dir.

Büyük miktarlarda IFN elde etmek için, belirli bir virüs türü ile enfekte olmuş altı günlük tek katmanlı civciv embriyo hücreleri veya kültürlenmiş insan kan lökositleri kullanılır. Başka bir deyişle, IFN elde etmek için belirli bir virüs hücre sistemi oluşturulur.

IFN'nin biyosentezinden sorumlu gen, bir insan hücresinden izole edilmiştir. Eksojen insan IFN'si, rekombinant DNA teknolojisi kullanılarak elde edilir. IFN'lerin cDNA'sını izole etme prosedürü aşağıdaki gibidir:

1) mRNA, insan lökositlerinden izole edilir, boyuta göre parçalara ayrılır, ters transkripsiyon gerçekleştirilir ve modifiye edilmiş plazmit bölgesine eklenir.

2) Ortaya çıkan ürün, E. coli'ye dönüştürülür; elde edilen klonlar, tanımlanan gruplara bölünür.

3) Her bir klon grubu, IFN - mRNA ile hibritlendi.

4) Elde edilen cDNA ve xRNA içeren hibritlerden mRNA izole edilir, translasyonu protein sentez sisteminde gerçekleştirilir.

5) Translasyondan kaynaklanan her karışımın interferon antiviral aktivitesini belirleyin. İnterferon aktivitesi gösteren gruplar, IFN - mRNA ile hibritlenmiş bir cDNA klonu içerir; tam uzunlukta bir IFN - insan cDNA'sı içeren bir klonu yeniden tanımlayın.

Benzer bilgiler.

interferonönemli koruyucu proteinlere aittir bağışıklık sistemi. Virüslerin etkileşimi, yani bir virüsle enfekte olan hayvanların veya hücre kültürlerinin başka bir virüsle enfeksiyona karşı duyarsız hale gelmesi olgusunu incelerken keşfedildi. Müdahalenin, koruyucu bir antiviral özelliğe sahip olan ortaya çıkan proteinden kaynaklandığı ortaya çıktı. Bu proteine ​​interferon adı verildi.

İnterferon, bağışıklık sistemi hücreleri tarafından sentezlenen bir glikoprotein ailesidir ve bağ dokusu. Hangi hücrelerin interferon sentezlediğine bağlı olarak üç tip vardır: α, β ve γ-interferonlar.

alfa interferon lökositler tarafından üretilir ve lökosit olarak adlandırılır; beta interferon fibroblastik olarak adlandırılır, çünkü fibroblastlar - bağ dokusu hücreleri tarafından sentezlenir ve gama interferon -üretildiği için bağışıklık aktive edilmiş T-lenfositler, makrofajlar, doğal öldürücüler, yani bağışıklık hücreleri.

İnterferon vücutta sürekli sentezlenir ve kandaki konsantrasyonu yaklaşık 2 IU / ml'de tutulur (1 uluslararası birim - ME, hücre kültürünü virüsün 1 CPD50'sinden koruyan interferon miktarıdır). İnterferon üretimi, virüslerle enfekte olduğunda ve ayrıca RNA, DNA, kompleks polimerler gibi interferon indükleyicilerine maruz kaldığında çarpıcı biçimde artar. Bu tür interferon indükleyicilere denir interferonojenler.

Antiviral etkiye ek olarak, interferon, tümör hücrelerinin proliferasyonunu (üremesini) geciktirdiği ve ayrıca immünomodülatör aktiviteyi geciktirdiği, fagositozu, doğal öldürücüleri uyardığı, B hücreleri tarafından antikor üretimini düzenlediği, majör doku uyumluluğunun ekspresyonunu aktive ettiği için antitümör korumasına sahiptir. karmaşık.

Hareket mekanizması interferon karmaşıktır. İnterferon, hücre dışındaki virüs üzerinde doğrudan etki etmez, ancak özel hücre reseptörlerine bağlanır ve protein sentezi aşamasında hücre içinde virüs üreme sürecini etkiler.

interferon kullanımı. İnterferonun etkisi ne kadar etkili olursa, o kadar erken sentezlenmeye veya vücuda dışarıdan girmeye başlar. Bu nedenle, ile kullanılır önleyici amaç birçok kişiyle viral enfeksiyonlar hem de grip gibi tedavi amaçlı parenteral hepatit (B, C, D), herpes gibi kronik viral enfeksiyonlarda, multipl skleroz ve diğerleri İnterferon tedavide olumlu sonuçlar verir malign tümörler ve immün yetmezlik ile ilişkili hastalıklar.

İnterferonlar türe özgüdür, yani insan interferonu hayvanlar için daha az etkilidir ve bunun tersi de geçerlidir. Ancak, bu tür özgüllüğü görecelidir.

interferon almak. İnterferon iki şekilde elde edilir: a) insan lökositlerini veya lenfositlerini güvenli bir virüsle enfekte ederek, bunun sonucunda enfekte olmuş hücreler interferonu sentezler, bu daha sonra izole edilir ve ondan interferon preparatları oluşturulur; b) genetik mühendisliği ile - endüstriyel koşullar altında interferon üretebilen rekombinant bakteri suşları yetiştirerek. Genellikle, DNA'larına gömülü interferon genleri olan Pseudomonas, Escherichia coli'nin rekombinant suşları kullanılır. Genetik mühendisliği ile elde edilen interferon, rekombinant olarak adlandırılır. Bizim ülkemizde rekombinant interferon Alınan resmi ad"Reaferon". Bu ilacın üretimi lökosit ilacından çok daha verimli ve ucuzdur.

Rekombinant interferon, tıpta koruyucu ve önleyici olarak geniş uygulama alanı bulmuştur. çare viral enfeksiyonlar, neoplazmalar ve immün yetmezlikler ile.

Antijenler. Tanım. Tam ve kusurlu antijenler kavramı. antijenler için gereksinimler. Mikroorganizmaların antijenik özellikleri ile ilgili kavramlar. Bakterilerin antijenik yapısı.

antijenler(Latince anti - karşı, genos - cinsten) - vücudun iç ortamına girdiğinde, antikor oluşumu şeklinde bir bağışıklık tepkisine neden olabilen genetik olarak yabancı maddeler veya bağışıklık T-lenfositleri ve onlarla etkileşime geçin. Bir antijenin temel özellikleri immünojenisite ve özgüllüktür. Antijenler yapısaldır ve kimyasal elementler hücreler ve metabolik ürünleri.

Antijenler, iç ortamına salındığında, özellikle spesifik antikorların oluşumunda, duyarlılaştırılmış lenfositlerin görünümünde veya içinde kendini gösteren, cevaba spesifik bir immünolojik reaksiyona neden olabilen vücuda yabancı kolloidal maddelerdir. bu maddeye karşı bir tolerans durumunun ortaya çıkması.

Antijen olan maddeler vücuda yabancı, makromoleküler, kolloidal durumda olmalı, vücuda parenteral olarak girmeli yani. atlayarak gastrointestinal sistem, maddenin bölünmesi ve yabancılığının kaybolması genellikle meydana gelir. Antijenlerin yabancılığı, antijen ile organizmanın makromolekülleri arasında, girmediği iç ortama belirli bir kimyasal farklılık derecesi olarak anlaşılmalıdır.

Antijenik özellikler, makromolekülün moleküler ağırlığı ile ilgilidir. Bir maddenin moleküler ağırlığı ne kadar yüksekse antijenikliği de o kadar yüksek olur. Aynı zamanda, yüksek moleküler ağırlığın bir antijenin zorunlu bir özelliği olduğunu varsaymak yanlıştır. Dolayısıyla glukagon, vazopressin - anjiyotensin de antijenik özelliklere sahiptir.

Tam antijenler, kusurlu antijenler (haptenler) ve yarı haptenler arasında ayrım yapmak gelenekseldir.

Tam antijenler, antikor oluşumuna veya lenfositlerin duyarlılaşmasına neden olan ve hem vücutta hem de laboratuvar reaksiyonlarında onlarla reaksiyona girebilenlere denir. Proteinler, polisakaritler, yüksek moleküler nükleik asitler ve bu maddelerin kompleks bileşikleri, tam teşekküllü antijenlerin özelliklerine sahiptir.

Arızalı antijenler veya haptenler kendi başlarına antikor oluşumunu veya lenfosit duyarlılığını indükleyemezler. Bu özellik, yalnızca onlara tam antijenler ("iletkenler") eklendiğinde ve ortaya çıkan antikorlar veya duyarlılaştırılmış lenfositler arasında, bazıları "iletkene", bazıları da hapten'e özel olduğunda ortaya çıkar.

Yarı haptenler, bir organizmanın iç ortamına girdikten sonra bu organizmanın proteinleriyle kimyasal olarak birleşebilen ve onlara antijenlerin özelliklerini veren nispeten basit maddelerdir. Bu maddelerden bazıları da ilaçlar(iyot, brom, antipirin, vb.).

Bir antijen molekülü iki eşit olmayan parçadan oluşur. c'nin aktif (küçük kısmı) antijenik determinant (epitop) olarak adlandırılır ve antijenik spesifikliği belirler. Antijenik belirleyiciler, antijen molekülünün mikroçevre ile en çok bağlantılı olan yerlerinde bulunur. Örneğin bir protein molekülünde sadece polipeptit zincirinin uçlarında değil, diğer kısımlarında da bulunabilirler. Antijenik belirleyiciler, sert bir yapıya sahip en az üç amino asit içerir (tirozin, triptofan, fenilalanin). Antijenin özgüllüğü ayrıca polipeptit zincirinin amino asitlerinin değişim sırası ve birbirlerine göre konumlarının kombinasyonu ile de ilişkilidir. Bir antijen molekülündeki antijenik belirleyicilerin sayısı onun değerini belirler. Ne kadar yüksekse, antijen molekülünün bağıl moleküler ağırlığı o kadar büyük olur.

Antijen molekülünün geri kalan (aktif olmayan) kısmının, belirleyici bir taşıyıcı rolü oynadığına ve antijenin vücudun iç ortamına nüfuz etmesini, pinositoz veya fagositozunu, antijenin penetrasyonuna hücresel reaksiyonu desteklediğine inanılmaktadır. bağışıklık yanıtında hücreler arası etkileşim aracılarının oluşumu (T-lenfositler taşıyıcı için reseptörlere sahiptir, B- antijenik belirleyiciye).

Bakteri hücresinin anatomik yapılarına göre H-antijenleri (bakteri varsa kamçılı), K-antijenleri (hücre duvarının yüzeyinde bulunur), O-antijenleri (bakterilerin hücre duvarı ile ilişkili) vardır. ), bakteriler tarafından çevrelerine salgılanan antijenler (proteinler-ekzotoksinler, kapsül polisakkaritleri).

Bir mikrobiyal hücrenin sayısız antijeni arasında, yalnızca belirli bir mikrop tipine (tip antijenler), belirli bir türe (tür antijenleri) ve ayrıca bir grup (aile) mikroorganizmaya (grup antijenleri) özgü olanlar vardır. ).

Bu nedenle, bir bakteri hücresi (diğer mikrop krallıklarının mikroorganizmaları gibi - virüsler, protozoa, mantarlar) çok sayıda antijenden oluşan karmaşık bir komplekstir. Makroorganizmanın iç ortamına girdiğinde, bu antijenlerin çoğu kendi spesifik antikorlarını oluşturacaktır. Bazı antijenler, zar zor farkedilir miktarda antikor (titre) oluşumunu indükler, diğerleri - hızlı ve önemli antikor üretimi. Buna göre "zayıf" ve "güçlü" antijenler ayırt edilir.

Bir bakteri hücresinin tüm antijenleri, aynı türden patojenik mikropların makro organizmaya yeniden girmesine karşı direnç (bağışıklık) indüklenmesinde eşit olarak yer almaz. Bir antijenin bağışıklığı indükleme yeteneğine immünojenisite denir ve böyle bir antijene immünojen denir. Bazı mikroorganizmaların belirli antijenlerinin, çeşitli aşırı duyarlılık (alerji) türlerinin gelişmesine neden olabileceği de tespit edilmiştir. Bu tür antijenlere alerjen denir.

Viral partikülün yapısına göre, birkaç antijen grubu ayırt edilir: nükleer, kapsid ve süper kapsid. Virionun antijenik bileşimi, viral partikülün kendisinin yapısına bağlıdır. Basitçe organize edilmiş virüslerin antijenik özgüllüğü, ribo- ve deoksinükleoproteinlerle ilişkilidir. Karmaşık virüslerde, antijenin bir kısmı nükleokapsid ile ilişkilidir ve diğeri dış kabukta - süper kapsidde lokalizedir.

immünojenisite- bir bağışıklık tepkisini indükleme yeteneği.

özgüllük- bir antijenin, kendisine özgü antikorlarla veya aktive edilmiş (astarlanmış) lenfositlerle etkileşim reaksiyonlarına girme yeteneği, bu da bu antijenin nötralizasyonuna yol açar.

İmmünojenite belirlenir:

yabancılık, şunlar. madde bağışıklık sistemi tarafından "kendinden değil" olarak tanınmalıdır. Ayrıca, organizma ile uygulanan madde arasındaki genetik ilişki ne kadar az belirginse, o kadar iyi immünojendir;

moleküler ağırlık, en az 5-10 kD olmalıdır. Antijenin moleküler ağırlığı ne kadar büyük olursa, bağışıklık tepkisi o kadar güçlü olacaktır;

kimyasal doğa. Antijenler proteinler, polisakaritler, polipeptitler, fosfolipitler, nükleik asitler vb. olabilir.

Kimyasal yapıya ve moleküler ağırlığa bağlı olarak antijenler, tamamlamak ve eksik

(hapten).

Tam antijenler(immünojenler) spesifik bir bağışıklık tepkisini indükler ve antikorlar ve aktive edilmiş T-lenfositlerle etkileşime girer. Bunlar makromoleküler maddelerdir - proteinler, polisakaritler, glikoproteinler, lipopolisakaritler, lipoproteinler, nükleoproteinler ve korpüsküler formlar (mikroorganizmalar, yabancı hücreler, vb.). Antijenler eksojen veya endojen olabilir. Endojen AG - vücudun değiştirilmiş bir genomu olan kendi hücreleri ve oluşturdukları ürünler ( otoantijenler).

Hapten- bunlar küçük moleküler ağırlıklı basit kimyasal bileşiklerdir: disakkaritler, lipidler, peptitler, nükleik asitler, vb. İmmünojenik değildirler, ancak bağışıklık tepkisinin ürünleri (antikorlar ve T-lenfositler) ile etkileşime girdiklerinde yüksek düzeyde özgüllüğe sahiptirler. . Hapten bir protein ile birleştirilirse, immünojenisite özelliğini kazanır (yani, tamamlanır). Bu kompleksin özgüllüğü hapten tarafından belirlenir.

yarı-haptens

proantijenler

yarı-haptens inorganik maddeler (iyot, brom, nitrojen vb.) protein ile birleştiğinde oluşur. Bu tür kompleksler, inorganik bileşiklere özgü antikorların oluşumunu indükleyebilir.

proantijenler alerjenler-haptenler veya antijenik olmayan maddelerdir (sülfonamidler, antibiyotikler, fenolftalein, vb.). Makroorganizma proteinleri ile birleştirildiklerinde, bir duyarlılık durumuna ve alerjik reaksiyonların gelişmesine neden olabilirler.

yarı-haptens inorganik maddeler (iyot, brom, nitrojen vb.) protein ile birleştiğinde oluşur. Bu tür kompleksler, inorganik bileşiklere özgü antikorların oluşumunu indükleyebilir.

proantijenler alerjenler-haptenler veya antijenik olmayan maddelerdir (sülfonamidler, antibiyotikler, fenolftalein, vb.). Makroorganizma proteinleri ile birleştirildiklerinde, bir duyarlılık durumuna ve alerjik reaksiyonların gelişmesine neden olabilirler.

№ 7 İnterferonlar, doğa. Elde etme ve uygulama yöntemleri.
interferon bağışıklık sisteminin önemli koruyucu proteinlerinden biridir. Virüslerin etkileşimi, yani bir virüsle enfekte olan hayvanlar veya hücre kültürlerinin başka bir virüsle enfeksiyona karşı duyarsız hale gelmesi olgusu incelenirken keşfedildi. Müdahalenin, koruyucu bir antiviral özelliğe sahip olan ortaya çıkan proteinden kaynaklandığı ortaya çıktı. Bu proteine ​​interferon adı verildi.
İnterferon, bağışıklık sistemi ve bağ dokusu hücreleri tarafından sentezlenen bir glikoprotein protein ailesidir. Hangi hücrelerin interferon sentezlediğine bağlı olarak üç tip vardır: α, β ve γ-interferonlar.
alfa interferonlökositler tarafından üretilir ve buna lökosit denir; beta interferon fibroblastik olarak adlandırılır, çünkü fibroblastlar - bağ dokusu hücreleri tarafından sentezlenir ve gama interferon- bağışıklık, aktive edilmiş T-lenfositler, makrofajlar, doğal öldürücüler, yani bağışıklık hücreleri tarafından üretildiği için.
İnterferon vücutta sürekli sentezlenir ve kandaki konsantrasyonu yaklaşık 2 IU / ml'de tutulur (1 uluslararası birim - BEN hücre kültürünü virüsün 1 CPD50'sinden koruyan interferon miktarıdır). İnterferon üretimi, virüslerle enfekte olduğunda ve ayrıca RNA, DNA, kompleks polimerler gibi interferon indükleyicilerine maruz kaldığında çarpıcı biçimde artar. Bu tür interferon indükleyicilere denir interferonojenler.
Antiviral etkiye ek olarak, interferon, tümör hücrelerinin proliferasyonunu (üremesini) geciktirdiği ve ayrıca immünomodülatör aktiviteyi geciktirdiği, fagositozu, doğal öldürücüleri uyardığı, B hücreleri tarafından antikor üretimini düzenlediği, majör doku uyumluluğunun ekspresyonunu aktive ettiği için antitümör korumasına sahiptir. karmaşık.
Hareket mekanizmasıinterferon karmaşıktır. İnterferon, hücre dışındaki virüs üzerinde doğrudan etki etmez, ancak özel hücre reseptörlerine bağlanır ve protein sentezi aşamasında hücre içinde virüs üreme sürecini etkiler.
interferon kullanımı. İnterferonun etkisi ne kadar etkili olursa, o kadar erken sentezlenmeye veya vücuda dışarıdan girmeye başlar. Bu nedenle influenza gibi birçok viral enfeksiyonda profilaktik amaçlı kullanıldığı gibi parenteral hepatit (B, C, D ), herpes, multipl skleroz vb. İnterferon, malign tümörlerin ve immün yetmezliklerle ilişkili hastalıkların tedavisinde olumlu sonuçlar verir.
İnterferonlar türe özgüdür, yani insan interferonu hayvanlar için daha az etkilidir ve bunun tersi de geçerlidir. Ancak, bu tür özgüllüğü görecelidir.
interferon almak. İnterferon iki şekilde elde edilir: a) insan lökositlerini veya lenfositlerini güvenli bir virüsle enfekte ederek, bunun sonucunda enfekte olmuş hücreler interferonu sentezler, bu daha sonra izole edilir ve ondan interferon preparatları oluşturulur; b) genetik mühendisliği ile - üretim koşulları altında interferon üretebilen rekombinant bakteri suşları yetiştirerek. Genellikle, DNA'larına gömülü interferon genleri olan Pseudomonas, Escherichia coli'nin rekombinant suşları kullanılır. Genetik mühendisliği ile elde edilen interferon, rekombinant olarak adlandırılır. Ülkemizde rekombinant interferon, "Reaferon" resmi adını aldı. Bu ilacın üretimi lökosit ilacından çok daha verimli ve ucuzdur.
Rekombinant interferon, viral enfeksiyonlar, neoplazmalar ve immün yetmezlikler için profilaktik ve terapötik bir ajan olarak tıpta geniş uygulama alanı bulmuştur.

10267 0

Somatotropin ve diğer insan hormonlarının biyosentezi

Hormon türe özgüdür, yani insülinden farklı olarak hayvan büyüme hormonlarının insan vücudunda hiçbir aktivitesi yoktur. Bu nedenle hipofiz cüceliğinin tek tedavisi cesetlerden izole edilen hipofiz hormonudur. Araştırmalar göstermiştir ki Intramüsküler enjeksiyon Yıl boyunca vücut ağırlığının 1 kg'ı başına 10 mg'lık dozlarda somatotropin, haftada üç enjeksiyon, yılda yaklaşık 8-18 cm büyüme artışı sağlar.

Sürekli tedavi gören dört ila beş yaş arası hasta çocuklar, ergenliğe (14-16 yaş) akranlarıyla birlikte büyümeyi yakaladılar. Bir cesetten 4-6 mg somatotropin elde edilebileceğini hesaba katarsak, bu hastalığın doğal somatotropin ile tedavisinin tamamen umutsuz olduğunu anlayabiliriz. İlacın eksikliğine ek olarak, kadavra materyalinden izole edilen hormonun heterojenliği ile ilgili başka sorunlar da vardı.

Ayrıca hipofiz materyalinin yavaş gelişen virüslerle enfekte olma tehlikesi de vardı. Bu tür virüsler alışılmadık derecede uzun kuluçka süresi bu nedenle ilacı alan çocukların uzun yıllar tıbbi gözetime ihtiyacı vardı.

Özel olarak tasarlanmış bakteri hücrelerinde sentezlenen insan büyüme hormonunun bariz avantajları vardır: büyük miktarlarda bulunur, preparatları biyokimyasal olarak saftır ve viral kontaminasyon içermez.

Genentech tarafından Escherichia coli'ye dayalı özel olarak tasarlanmış bakteriler tarafından somatotropinin (191 amino asit kalıntısından oluşan) biyosentezi gerçekleştirildi. MRNA için DNA sentezi sırasında, bakteri hücrelerinde aktif bir hormon oluşturmak için bölünmeyen bir somatotropin öncüsünü kodlayan bir gen elde edildiğinden, aşağıdaki gibi ilerledik: 1. aşamada, mRNA'nın çift sarmallı bir DNA kopyası klonlandı ve kısıtlama endonükleazları ile sindirim yoluyla, ilk 23 amino asit hariç, hormonun tüm amino asit dizisini kodlayan bir dizi elde edildi. Daha sonra 1'den 23'e kadar amino asitlere karşılık gelen sentetik bir polinükleotidi klonladı. Daha sonra, iki parça bir araya getirildi ve bir E. coli plazmitine "ayarlandı", ardından bakteri hücreleri bu hormonu sentezlemeye başladı.

1980 yılına gelindiğinde, ilacın klinik denemeleri ve toksisite testleri tamamlandı ve ergenlik çağındaki çocuklar üzerinde toplu deneyler yapılmaya başlandı. Sonuçlar cesaret vericiydi ve 1982'den beri endüstriyel ölçekte sentetik büyüme hormonu üretilmeye başlandı.

31 amino asitlik bir beyin opiatı olan başka bir hormon olan β-endorfin, genetiğiyle oynanmış E. coli hücrelerinde sentezlendi. 1980'de Avustralyalı bilim adamı Shine ve Amerikalı bilim adamları Fettes, Lan ve Baxter, E. ooli hücrelerinde β-endorfini kodlayan DNA'yı başarılı bir şekilde klonladılar ve bu polipeptidi β-galaktosidaz enzimi ile bir füzyon proteini olarak elde ettiler. İlk aşamada, β-endorfini kodlayan mRNA'nın ters transkripsiyonu sonucu elde edilen bir DNA fragmanını klonlayarak, β-galaktosidaz geninin arkasındaki E.coli plazmitine yerleştirip β-'den oluşan bir hibrit protein elde ettiler. galaktosidaz ve - endorfin; ayrıca β-galaktosidaz enzimatik olarak bölünerek biyolojik olarak aktif β-endorfin elde edildi.

interferon almak

Interferon ilk olarak 1957'de Ulusal Enstitü'de ​​elde edildi. tıbbi araştırma Londra yakınında. Bu, virüsler vücuda girdiğinde hayvan ve insan hücreleri tarafından çok düşük miktarlarda salınan ve onlarla savaşmayı amaçlayan bir proteindir. İlk çalışmalar, influenza, hepatit ve hatta hastalıkların tedavisinde interferonun yüksek biyolojik aktivitesini ortaya çıkardı. kanser(anormal hücrelerin üremesini baskılar).

Somatotropin gibi interferon da türe özgüdür: hayvan interferonları insan vücudunda etkisizdir ve hatta insan vücudunda reddedilir.

İnsan vücudu çeşitli interferon türleri üretir: lökosit (a), fibroblast (P) ve bağışıklık (y) (T-lenfositik).

Doğal interferonlar son derece düşük bir verimle insan kanından elde edilir: 1978'de Helsinki'deki Merkez Sağlık Laboratuvarı'nda (o zamanlar lökosit interferon üretiminde dünya lideri), 50 bin litre sıvıdan 0,1 g saf interferon elde edildi. kan.

İnterferon elde etme süreci, kültürlerde yetiştirilen ve interferon oluşturan tüm hücre türleri için temelde aynıydı. Kan hücreleri Sendai virüsü ile enfekte edildi ve 24 saat sonra bir süpersantrifüjde süzüldü. Süpernatan, kromatografik saflaştırmaya tabi tutulan ham bir interferon preparasyonu içeriyordu.

İlacın maliyeti çok yüksekti - 400 g interferon 2,2 milyar dolara mal oldu. Bununla birlikte, farmakolojik kullanımının beklentileri (dört kanser türüne karşı dahil olmak üzere), öncelikle genetik mühendisliği yardımıyla, onu elde etmenin yeni yollarını aramayı gerekli kılmıştır.

Ocak 1980'de, genetiğiyle oynanmış E. coli hücrelerinde insan interferonu elde edildi. Bu yöntemlerle ilgili ilk zorluk, viral enfeksiyon tarafından uyarılan lökositlerde bile interferon mRNA'sının az olması ve verimlerin çok düşük olmasıydı: Bakteri hücresi başına 1-2 interferon molekülü rapor edildi.

1981'de Genentech şirketi, y-interferonu kodlayan rekombinant DNA'yı tasarlamayı ve bunu bakteri, maya ve hatta memeli hücrelerinin genomuna sokmayı başardı ve içerdiği 1 litre maya hücre kültürü ile yüksek verimle interferonu sentezleyebilecek hale geldi. 1 milyon ünite interferon (bir ünite interferon, kültürdeki hücrelerin %50'sini virüs bulaşmasından koruyan bir miktara karşılık gelir). İşlem şu şekilde gerçekleştirildi: Araştırmacılar, insan lenfositlerinden mRNA moleküllerinin bir karışımını izole ettiler, karşılık gelen DNA kopyalarının moleküllerini elde ettiler ve bunları E. coli hücrelerine soktular. Daha sonra interferon üreten bakteriler seçildi.

İmmünojenik preparatların ve aşıların elde edilmesi

Aşılar tıbbın en önemli başarılarından biridir ve kullanımları ekonomik açıdan da son derece etkilidir. AT son yıllar Aşıların geliştirilmesi özel ilgi gördü. Bunun nedeni, birçok yaygın veya tehlikeli bulaşıcı hastalığı önlemek için şimdiye kadar oldukça etkili aşıların elde edilmesinin mümkün olmamasıdır.

Daha önce bulaşıcı olarak kabul edilmeyen hastalıkların gelişiminde patojenik mikroorganizmaların rolü ortaya çıktıktan sonra aşılara artan ilgi ortaya çıktı. Örneğin gastrit, mide ülseri ve on iki parmak bağırsağı, malign neoplazmalar karaciğer (hepatit B ve C virüsleri).

Bu nedenle, son 10-15 yılda, birçok ülkenin hükümetleri, temelde yeni aşıların yoğun bir şekilde geliştirilmesi ve üretilmesine yönelik önlemler almaya başlamıştır.

Günümüzde kullanılan aşılar, hazırlanma yöntemlerine bağlı olarak aşağıdaki tiplere ayrılabilir:
- canlı atenüe aşılar;
- inaktif aşılar;
- mikroorganizmaların saflaştırılmış bileşenlerini (proteinler veya polisakkaritler) içeren aşılar;
- genetik mühendisliği ile elde edilen mikroorganizma bileşenlerini içeren rekombinant aşılar

Rekombinant DNA teknolojisi, patojenin virülent proteinlerini kodlayan genlerin yönlendirilmiş mutasyonuyla zayıflamayı sağlayan yeni bir tür canlı zayıflatılmış aşı oluşturmak için de kullanılır. Aynı teknoloji, insanlara enjekte edilen patojenik olmayan canlı virüslere veya bakterilere (vektörler) immünojenik proteinleri kodlayan genlerin eklenmesiyle canlı rekombinant aşılar üretmek için de kullanılır.

DNA aşılarının kullanım prensibi, immünojenik proteinleri kodlayan genleri içeren bir DNA molekülünün hastanın vücuduna enjekte edilmesidir. patojen. DNA aşıları, aksi takdirde gen veya genetik olarak adlandırılır.

DNA aşıları elde etmek için, bir mikroorganizmanın immünojenik proteininin üretimini kodlayan bir gen, bir bakteriyel plazmide yerleştirilir. Aşı proteinini kodlayan gene ek olarak, protein sentezini sağlamak için, insanlar da dahil olmak üzere ökaryotik hücrelerde bu genin ekspresyonu (“açılması”) için gerekli olan genetik elementler plazmide eklenir. Böyle bir plazmit, çok sayıda kopya elde etmek için bir bakteri hücresi kültürüne dahil edilir.

Daha sonra plazmit DNA, bakterilerden izole edilir, diğer DNA moleküllerinden ve safsızlıklardan arındırılır. Saflaştırılmış DNA molekülü bir aşı görevi görür. Bir DNA aşısının tanıtılması, aşılanmış organizmanın hücreleri tarafından yabancı proteinlerin sentezini sağlar, bu da ilgili patojene karşı müteakip bağışıklık gelişimine yol açar. Aynı zamanda, karşılık gelen geni içeren plazmitler, insan kromozomlarının DNA'sına entegre olmaz.

DNA aşıları, geleneksel aşılara göre bir dizi avantaj sunar:
- viral proteinlerin doğal molekülüne karşı antikor üretimine katkıda bulunmak;
- sitotoksik T-lenfositlerin üretimine katkıda bulunur;
- T-lenfositlerin çeşitli alt popülasyonlarını seçici olarak etkileyebilir;
- uzun süreli bağışıklık oluşumuna katkıda bulunur;
- enfeksiyon riskini ortadan kaldırın.

L.V. Timoshchenko, M.V. chubik

interferon bağışıklık sisteminin önemli koruyucu proteinlerinden biridir. Virüslerin etkileşimi, yani bir virüsle enfekte olan hayvanların veya hücre kültürlerinin başka bir virüsle enfeksiyona karşı duyarsız hale gelmesi olgusunu incelerken keşfedildi. Müdahalenin, koruyucu bir antiviral özelliğe sahip olan ortaya çıkan proteinden kaynaklandığı ortaya çıktı. Bu proteine ​​interferon adı verildi.

İnterferon, bağışıklık sistemi ve bağ dokusu hücreleri tarafından sentezlenen bir glikoprotein protein ailesidir. Hangi hücrelerin interferon sentezlediğine bağlı olarak üç tip vardır: α, β ve γ-interferonlar.

alfa interferon lökositler tarafından üretilir ve lökosit olarak adlandırılır; beta interferon fibroblastik olarak adlandırılır, çünkü fibroblastlar - bağ dokusu hücreleri tarafından sentezlenir ve gama interferon- bağışıklık, aktive edilmiş T-lenfositler, makrofajlar, doğal öldürücüler, yani bağışıklık hücreleri tarafından üretildiği için.

İnterferon vücutta sürekli sentezlenir ve kandaki konsantrasyonu yaklaşık 2 IU / ml'de tutulur (1 uluslararası birim - ME, hücre kültürünü virüsün 1 CPD50'sinden koruyan interferon miktarıdır). İnterferon üretimi, virüslerle enfekte olduğunda ve ayrıca RNA, DNA, kompleks polimerler gibi interferon indükleyicilerine maruz kaldığında çarpıcı biçimde artar. Bu tür interferon indükleyicilere denir interferonojenler.

Antiviral etkiye ek olarak, interferon, tümör hücrelerinin proliferasyonunu (üremesini) geciktirdiği ve ayrıca immünomodülatör aktiviteyi geciktirdiği, fagositozu, doğal öldürücüleri uyardığı, B hücreleri tarafından antikor üretimini düzenlediği, majör doku uyumluluğunun ekspresyonunu aktive ettiği için antitümör korumasına sahiptir. karmaşık.

Hareket mekanizması interferon karmaşıktır. İnterferon, hücre dışındaki virüs üzerinde doğrudan etki etmez, ancak özel hücre reseptörlerine bağlanır ve protein sentezi aşamasında hücre içinde virüs üreme sürecini etkiler.

interferon kullanımı. İnterferonun etkisi ne kadar etkili olursa, o kadar erken sentezlenmeye veya vücuda dışarıdan girmeye başlar. Bu nedenle influenza gibi birçok viral enfeksiyonda profilaktik amaçlı kullanıldığı gibi, parenteral hepatit (B, C, D), herpes, multipl skleroz vb. kronik viral enfeksiyonlarda da tedavi amaçlı kullanılmaktadır. İnterferon pozitif sonuç verir. habis tümörlerin ve immün yetmezliklerle ilişkili hastalıkların tedavisi ile sonuçlanır.

İnterferonlar türe özgüdür, yani insan interferonu hayvanlar için daha az etkilidir ve bunun tersi de geçerlidir. Ancak, bu tür özgüllüğü görecelidir.

interferon almak. İnterferon iki şekilde elde edilir: a) insan lökositlerini veya lenfositlerini güvenli bir virüsle enfekte ederek, bunun sonucunda enfekte olmuş hücreler interferonu sentezler, bu daha sonra izole edilir ve ondan interferon preparatları oluşturulur; b) genetik mühendisliği ile - endüstriyel koşullar altında interferon üretebilen rekombinant bakteri suşları yetiştirerek. Genellikle, DNA'larına gömülü interferon genleri olan Pseudomonas, Escherichia coli'nin rekombinant suşları kullanılır. Genetik mühendisliği ile elde edilen interferon, rekombinant olarak adlandırılır. Ülkemizde rekombinant interferon, "Reaferon" resmi adını aldı. Bu ilacın üretimi lökosit ilacından çok daha verimli ve ucuzdur.

Rekombinant interferon, viral enfeksiyonlar, neoplazmalar ve immün yetmezlikler için profilaktik ve terapötik bir ajan olarak tıpta geniş uygulama alanı bulmuştur.