Retikulocitų skaičiavimas tepinėlyje, nudažius juos specialiais dažais

Metodo principas: Retikulocitų granuliuotos tinklinės medžiagos nustatymas supravitalinio dažymo metu šarminiais dažais, toliau skaičiuojant kraujo tepinėlyje.

Galima naudoti vieną iš šių beicų: Azura tirpalas I; Azura tirpalas II;

Nustatymo eiga: Dažymas atliekamas ant stiklo arba mėgintuvėlyje.

Retikulocitų dažymas in vitro naudojant Azur II

Į mėgintuvėlį įpilkite 0,05 ml Azure II dažų tirpalo ir 0,2 ml kraujo. Mišinys kruopščiai sumaišomas ir paliekamas 20-30 minučių. Dar kartą išmaišykite ir paruoškite plonus tepinėlius.

Retikulocitų dažymas in vitro su Azure I

Pipete iš Panchenkov aparato į mėgintuvėlį įlašinkite 0,3 - 0,5 ml žydro I dažų tirpalo ir 5 - 6 lašus kraujo. Mėgintuvėlis užkimštas guminiu kamščiu, mišinys kruopščiai, bet švelniai išmaišomas ir paliekamas 1-1,5 val. (retikulocitai geriau nusidažo, kai ekspozicija 1,5-3 val.). Sumaišykite ir paruoškite plonus potėpius.

Paruošti tepinėliai mikroskopuojami imersiniu lęšiu. Tepinėlyje retikulocitai ir eritrocitai nusidažo gelsvai žalsvai, granuliuota-gijinė medžiaga retikulocituose yra mėlyna (dažant žydra II) arba melsvai violetinė (dažant žydra I).

Retikulocitai yra svarbus regeneracinio pajėgumo rodiklis kaulų čiulpai. Jų padidėjimas periferiniame kraujyje (retikulocitozė) pastebimas esant hemolizinei anemijai, hemolizinėms krizėms, ūminiam kraujo netekimui, maliarijai ir gydant geležimi. geležies stokos anemija, esant ūminiam deguonies trūkumui. Prieinamumas padidintas kiekis retikulocitai leidžia įtarti slaptą kraujavimą (pavyzdžiui, pacientams, sergantiems vidurių šiltine, pepsinė opa).

Retikulocitų skaičiaus sumažėjimas arba jų nebuvimas (retikulocitopenija) stebimas esant regeneracinei aplastinei ir hipoplastinei anemijai; anemija, kurią sukelia geležies, vitamino B12 trūkumas, folio rūgštis; su vėžio metastazėmis kauluose; spindulinė liga; radioterapija; gydymas citostatikais.

Rivalta bandymo technika.

Rivalta testas yra biocheminis transudato ir eksudato diferencijavimo testas.

Technika tokia: Eksudatuose yra seromucino (globulino prigimties junginys), kuris suteikia teigiamas mėginys(denatūravimas) su silpnas sprendimas acto rūgštis. Į cilindrą pilama 100-150 ml distiliuoto vandens, parūgštinama 2-3 lašais ledinės acto rūgšties ir lašinamas tiriamasis skystis. Krintantis eksudato lašas sudaro drumstumą balto debesėlio pavidalu, besileidžiančio į indo dugną. Transudato lašas nesudaro drumstumo arba yra nereikšmingas ir greitai ištirpsta. Nepaisant šių skirtumų tarp eksudatų ir transudatų, praktiškai ne visada lengva juos atskirti, nes kartais tenka susidurti su daugybe pereinamųjų skysčių, taip pat eksudatų, kurie baltymų kiekiu ir santykiniu požiūriu yra artimi transudatams. tankis.

Šioje svetainėje paskelbtos apžvalgos yra asmeninės jas parašiusių žmonių nuomonės. Negalima savarankiškai gydytis!

Retikulocitai (klinikinė reikšmė ir laboratorinė diagnostika)

(1) retikulocitai, turintys branduolį (eritronormoblastai), o jų granuliuotumas yra tankus vainikėlis aplink branduolį;

(2) retikulocitai, turintys granuliuotą tinklinę medžiagą rutuliuko arba gumulėlio pavidalu;

(3) retikulocitai, turintys granuliuotumą tankaus tinklo pavidalu;

(4) retikulocitai, turintys granuliuotą tinklinę medžiagą atskirų siūlų pavidalu;

(5) retikulocitai, turintys atskirų granulių.

Sergant hemolizine anemija (retikulocitų skaičius gali siekti iki 60% ir daugiau (ypač didėja hemolizinių krizių metu);

Esant ūminiam kraujo netekimui (3-5 dieną po kraujo netekimo, ištinka retikulocitų krizė), įskaitant retikulocitų padidėjimą, galima įtarti paslėptą kraujavimą (pavyzdžiui, pacientams, sergantiems pepsine opa). virškinimo trakto, vidurių šiltinė);

Geležies stokos anemijai gydyti geležimi (praėjus kelioms dienoms (3–10) nuo aneminio žalingos anemijos gydymo pradžios);

Esant ūminiam deguonies trūkumui;

Su navikų metastazėmis kaulų čiulpuose.

nenormali hemoglobino forma;

Su regeneracinėmis aplastinėmis ir hipoplastinėmis anemijomis;

Su anemija, kurią sukelia geležies, vitamino B12, folio rūgšties trūkumas (mikrocitinė-hipochrominė ir megaloblastinė anemija);

Su sideroblastine anemija;

Su vėžio metastazėmis kauluose;

Su spinduline liga ir spinduline terapija;

Gydant citostatikais;

Sergant autoimuninėmis kraujodaros sistemos ligomis;

Su inkstų liga;

Pasikartojant Addison-Birmer anemijai;

Neteisingai parinktas antikoaguliantas arba nepakankamas kraujo sumaišymas su antikoaguliantu;

Ilgas rankos suspaudimas turnike;

Sulfonamidų priėmimas (galimi ir neįvertinti, ir pervertinti rezultatai);

Kraujo perpylimas prieš pat tyrimą;

Kraujo mėginio hemolizė.

Eritropoezės aktyvumo įvertinimas sąlygomis, kurias lydi hemolizė arba kraujo netekimas;

Kaulų čiulpų gebėjimo atsinaujinti po citotoksinės terapijos ir kaulų čiulpų transplantacijos įvertinimas;

Eritropoetino sintezės atkūrimo po inksto transplantacijos įvertinimas;

Dopingo kontrolė sportininkams (vartojantiems eritropoetiną);

Neefektyvios hematopoezės arba sumažėjusios raudonųjų kraujo kūnelių gamybos diagnozė;

Diferencinė anemijos diagnostika;

Kaulų čiulpų regeneracinio pajėgumo pažeidimo nustatymas, kai trūksta geležies, vitaminų B12, B6, folio rūgšties, vario ir tinkamo gydymo stebėjimas;

Atsako į gydymą eritropoetinu, eritrosupresoriais įvertinimas.

Retikulocitai su mažu RNR kiekiu, labiausiai subrendę (LFR%, mažos fluorescencijos retikulocitų frakcijos, retikulocitų frakcija su maža fluorescencija);

Retikulocitai, turintys vidutinį RNR kiekį (MFR%, vidutinės fluorescencijos retikulocitų frakcijos) – vidutinio fluorescencijos retikulocitų frakcija);

Retikulocitai, turintys didelį RNR kiekį (HFR%, didelės fluorescencijos retikulocitų frakcijos) – retikulocitų frakcija, turinti didelę fluorescenciją);

Nesubrendusių retikulocitų frakcija (IRF%, nesubrendusių retikulocitų frakcija).

Retikulocitų skaičiavimas tepinėlyje, nudažius juos specialiais dažais

Retikulocitų skaičiavimas tepinėlyje, nudažius juos specialiais dažais, praktikoje yra dažniausiai naudojamas retikulocitų skaičiaus skaičiavimo metodas. Taip yra dėl to, kad metodas yra paprastas, gana pigus ir nereikalaujantis specialios brangios įrangos, todėl gali būti naudojamas bet kurioje klinikinės diagnostikos laboratorijoje.

Metodo principas

Retikulocitų granuliuoto tinklelio identifikavimas su supravitaliniu dažymu šarminiais dažais, toliau skaičiuojant juos kraujo tepinėlyje.

Reagentai

Galite naudoti vieną iš šių dažų:

1. Prisotintas briliantinio krezilo mėlynojo tirpalas absoliučiame alkoholyje (norint paruošti absoliutųjį alkoholį, būtina atlaikyti 96% etanolį, kelis kartus keičiant deginto vario sulfato miltelius). 100 ml absoliutaus alkoholio imama 1,2 g dažų.
2. Azur I tirpalas: Azur I - 1 g, amonio oksalatas - 0,4 g, natrio chloridas - 0,8 g, etanolis 96% - 10 ml, distiliuotas vanduo - 90 ml. Dažų tirpalas uždarytame butelyje 2-3 dienas dedamas į termostatą 37 ° C temperatūroje ir periodiškai stipriai purtomas. Tada atšaldoma iki kambario temperatūros ir filtruojama per filtravimo popierių. Tirpalas laikomas tamsaus stiklo inde. Jei atsiranda nuosėdų, dažus reikia dar kartą filtruoti.
3. Azure II tirpalas: Azur II - 1 g, natrio citratas - 5 g, natrio chloridas - 0,4 g, distiliuotas vanduo - 45 ml. Tirpalas paliekamas termostate 37 °C temperatūroje 2 dienas, retkarčiais pamaišant. Norint pagreitinti tirpimą, dažus galima kaitinti ant silpnos ugnies 15–20 minučių, neužvirinant. Atvėsinkite iki kambario temperatūros ir filtruokite. Laikyti tamsaus stiklo inde.

Speciali įranga

Apibrėžimo pažanga

Retikulocitų dažymas atliekamas ant stiklo arba mėgintuvėlyje.

Retikulocitų dažymas ant stiklo

Dažant retikulocitus ant stiklo, gerai išplautas ir nuriebalintas stiklelis kaitinamas virš degiklio liepsnos. Stiklo lazdele ant stiklo užlašinamas vieno iš aukščiau išvardytų dažiklių lašas ir šlifuotu stiklu paruošiamas dažų tepinėlis. Stiklografas naudojamas žymėti stiklo pusę, ant kurios užtepamas dažų tepalas. Šioje formoje stiklą galima paruošti naudojimui ateityje ir laikyti sausoje, tamsioje vietoje. Prieš analizę paruošiama drėgna kamera. Paprastai tam naudojami Petri lėkštelės su sudrėkintos vatos arba filtravimo popieriaus ritinėliais, išdėstytais išilgai kraštų. Ant dažų tepinėlio užlašinamas lašelis kraujo, iš jo paruošiamas plonas tepinėlis ir iškart dedamas į drėgną kamerą 3-10 min. Tada tepinėliai džiovinami oru.

Retikulocitų dažymas in vitro

Retikulocitų dažymas in vitro skiriasi, kai naudojami skirtingi dažai.

1 metodas – retikulocitų dažymas in vitro briliantiniu krezilo mėlynu.

Prieš naudojimą mėgintuvėlyje paruoškite darbinį briliantinio krezilo mėlynojo tirpalą, kurio pagrindą sudaro lašas 1% kalio oksalato tirpalo ir 4 lašai briliantinio krezilo mėlynojo dažų tirpalo. Į dažus įpilama 0,04 ml kraujo (dvi pipetės iki 0,02 žymos). Mišinys kruopščiai, bet švelniai sumaišomas ir paliekamas 30 minučių. Tada vėl išmaišykite ir paruoškite plonus tepinėlius.

2 metodas – retikulocitų dažymas in vitro su Azure II.

Į mėgintuvėlį įpilkite 0,05 ml Azure II dažų tirpalo ir 0,2 ml kraujo. Mišinys kruopščiai sumaišomas ir paliekamas 20-30 minučių. Dar kartą išmaišykite ir paruoškite plonus tepinėlius.

3 metodas – retikulocitų dažymas in vitro su Azure I.

Pipete iš Panchenkov aparato į mėgintuvėlį įlašinkite 0,3 - 0,5 ml žydro I dažų tirpalo ir 5 - 6 lašus kraujo. Mėgintuvėlis užkimštas guminiu kamščiu, mišinys kruopščiai, bet švelniai išmaišomas ir paliekamas 1-1,5 val. (retikulocitai geriau nusidažo, kai ekspozicija 1,5-3 val.). Sumaišykite ir paruoškite plonus potėpius.

Šiuo metu parduodami paruošti retikulocitų dažai. Retikulocitų dažymas jų pagalba atliekamas pagal pridedamas instrukcijas.

Retikulocitų skaičius.

Tepinėliai, paruošti vienu iš aukščiau paminėtų metodų, mikroskopuojami imersiniu lęšiu. Tepinėlyje retikulocitai ir eritrocitai nusidažo gelsvai žalsvai, granuliuota-gijinė medžiaga retikulocituose yra mėlyna (dažant žydra II ir briliantine krezilo mėlyna spalva) arba melsvai violetinė (dažant žydra I).

Retikulocitų nuotraukos:

Atskirai raskite matymo laukus, kuriuose yra eritrocitai. Šiuose regėjimo laukuose būtina suskaičiuoti ne mažiau kaip 1000 eritrocitų ir tarp jų pažymėti eritrocitų, kuriuose yra granuliuotos-gijinės medžiagos, skaičių. Didesnis tikslumas gaunamas skaičiuojant 2000 - 3000 eritrocitų.

Dėl to, kad matymo laukas yra didelis skaičius eritrocitų, o tai apsunkina skaičiavimą, būtina apriboti (sumažinti) matymo lauką. Norėdami tai padaryti, galite naudoti specialų okuliarą, kuriame galite sumažinti regėjimo lauką iki reikiamo dydžio, arba naudoti specialų „langą“ (iš popieriaus išpjaunamas apskritimas, kurio skersmuo šiek tiek mažesnis už okuliarą, apskritimo centre išpjaunamas mažas rombas ir gautas langelis įkišamas į okuliarą).

Suskaičiuotų retikulocitų skaičius išreiškiamas 100 (procentais) arba 1000 (ppm) eritrocitų.

Pavyzdys: Suskaičiavus 1000 eritrocitų tepinėlyje, paaiškėjo, kad 15 iš 1000 eritrocitų turi vienokio ar kitokio laipsnio granuliuotą tinklelį, tai yra retikulocitai. Todėl šiuo atveju retikulocitų skaičius yra 1,5% arba 15‰.

Literatūra:

• Katalogas « Laboratoriniai metodai tyrimai klinikoje “, redagavo Menšikovas V. V. – Maskva, Medicina “, 1987 m.
• Lyubina A. Ya., Ilyicheva L. P. ir bendraautoriai - „Klinikinė laboratoriniai tyrimai“- Maskva, „Medicina“, 1984 m

Retikulocitų skaičiaus skaičiavimas naudojant fluorescencinę mikroskopiją

Retikulocitų skaičiaus skaičiavimo metodas naudojant fluorescencinę mikroskopiją yra paprastas ir reikalauja mažai laiko, tikslesnis nei įprastas metodas, nes liuminescencinė mikroskopija atskleidžia mažiausius tinklinės-gijinės medžiagos grūdelius.

Retikulocitai

Retikulocitai yra jauni raudonieji kraujo kūneliai, susidarantys po to, kai normoblastai prarado branduolius. būdingas bruožas retikulocitai yra granuliuotos gijinės medžiagos (tinklo) buvimas jų citoplazmoje, atstovaujančios agreguotas ribosomas ir mitochondrijas.

Patologiniai intarpai eritrocituose

Jolly kūnai (Howell-Jolly kūnai) yra maži apvalūs violetiniai raudoni intarpai, kurių dydis yra µm, 1 (retai 2–3) viename eritrocite. Jie yra branduolio liekanos pašalinus jo AEI. Jie nustatomi esant intensyviai hemolizei ir „perkrovai“ RES, po splenektomijos, su megaloblastine anemija.

Citocheminis lipidų tyrimas

Citocheminis lipidų tyrimas pagrįstas dažų, kurie tirpsta riebaluose, naudojimu (Sudanas III, Sudanas IV, juodasis Sudanas ir kt.). Norint nustatyti neutralius riebalus, naudojamas Sudan III, kuris nudažo riebalus oranžine spalva. Lipoidai geriau aptinkami naudojant Sudano juodą spalvą (juoda spalva).

Šlapimo tyrimas pagal Nechiporenko

Nechiporenko metodas buityje laboratorinė diagnostika yra labiausiai paplitęs kiekybinio įvertinimo metodas formos elementaišlapime. Šis metodas yra pats paprasčiausias, prieinamas bet kuriai laboratorijai ir patogus ambulatorinėje praktikoje, taip pat turi nemažai privalumų, palyginti su kitais žinomais kiekybiniais šlapimo nuosėdų tyrimo metodais. Pagal Nechiporenko metodą susidariusių elementų (eritrocitų, leukocitų ir cilindrų) skaičius nustatomas 1 ml šlapimo.

©18 Laboratorinė diagnostika

Retikulocitas - kas tai yra kraujo tyrime? Normos rodikliai ir žymėjimas

Retikulocitas yra eritrocito pirmtakas, tai yra, tai jaunos formos eritrocitas. Sveiko žmogaus kraujyje jų kiekis yra 0,2-1,2%. Šis santykis atspindi retikulocitų kiekį kraujyje, palyginti su eritrocitais. Jie sunoksta 4-5 dienas.

Pagrindinės sąvokos

Būdingas jaunų eritrocitų formų bruožas yra tas, kad citoplazmoje yra granuliuota-gijinė medžiaga, kuri yra agreguota ribosoma ir mitochondrijos. Šią medžiagą galima aptikti specialiu kraujo tepinėlių dažymo metodu. Šis retikulocitų dažymas vadinamas supravitaliniu, tai yra, jis gaminamas be išankstinio ląstelių fiksavimo.

Retikulocitų grupės

Iš viso ekspertai išskiria penkias pagrindines retikulocitų grupes. Jie skiriasi tinkliniu tinkleliu. Jo tankis ir amžius yra atvirkščiai proporcingi: kuo storesnis tinklelis, tuo jie jaunesni. Išsiaiškinkime, kas yra jauniausias retikulocitas.

Tai ląstelė, kurios tinklelis yra storas rutulys. Šios ląstelės priklauso pirmajai grupei. Subrendusios formos retikulocitai atrodo kaip medžiaga, turinti aiškiai atskirtą tinklelį. Ketvirtoje ir penktoje grupėse jį vaizduoja atskiri siūlai ir grūdeliai. Dažniausiai kraujyje sveikų žmonių yra paskutinių grupių retikulocitų, tai yra labiau subrendusių. Paprastai jie sudaro apie 80% likusių. Padidėjus regeneracijai, kuri būdinga kai kurioms patologijoms, padidėja pirmųjų trijų grupių retikulocitų skaičius. Šios patologijos apima:

Retikulocitų krizė, kurią lydi B12 stokos anemija.

Funkcijos, kurias atlieka retikulocitai

Retikulocitas taip pat yra eritrocitas. Jam būdinga ta pati funkcija kaip ir eritrocitams. Tai reiškia, kad ląstelės taip pat neša deguonies molekules į skirtingus audinius ir organus, tačiau efektyvumas šis procesasžymiai mažesnis nei tada, kai deguonį perneša subrendę eritrocitai. Retikulocitai gali adsorbuoti hemoglobino esančias geležies molekules. Tai įmanoma dėl receptorių, jautrių transferinui. Kodėl atliekamas retikulocitų skaičiavimas? Daugiau apie tai vėliau.

Kraujo mėginių ėmimo mechanizmas

Šiam rodikliui nustatyti imamas kraujo mėginys, kaip bendrosios analizės dalis. Jei reikia nustatyti retikulocitų kiekį, gydytojas, paskyręs analizę, nurodo, kad reikia papildomo skaičiavimo.

Šiai analizei nereikia specialaus pasiruošimo, tačiau ji tradiciškai imama ryte tuščiu skrandžiu. Tuo pačiu, jei yra poreikis, jį galima perduoti bet kuriuo paros metu. Kraujas analizei turėtų būti paimtas iš piršto, jo tyrimas atliekamas laboratorijoje, hematologijos skyriuje.

Retikulocitų skaičius skaičiuojamas supravitaliniu dažytu tepinėliu. Naudojamas mikroskopinis metodas, tai yra, jų skaičius tiesiog suskaičiuojamas, padėjus kraujo mėginį po mikroskopu. Iki šiol yra aparatinės įrangos skaičiavimo metodas. Jį naudoja šiuolaikinės laboratorijos.

Retikulocitų žymėjimas kraujo tyrime yra RET.

Analizės atlikimas

Yra keli tokio tyrimo metodai:

• Stiklas išplaunamas, išdžiovinamas ir kaitinamas specialiu degikliu. Tada ant jo užtepamas vienas iš trijų dažų, tada įlašinamas lašas kraujo, po kurio daromas plonas tepinėlis. Stiklinis stiklelis tam tikram laikui dedamas į Petri lėkštelę ar kitą kamerą, po to džiovinamas grynas oras.
• Jei naudojamas mėgintuvėlis, į jį dedama dažanti medžiaga ir įlašinamas lašelis kraujo. Mišinys turi būti maišomas. Laukimo laikas - nuo 20 minučių iki 3 valandų, tai priklauso nuo to, koks reagentas naudojamas. Tada vėl sumaišykite skystį, esantį mėgintuvėlyje, iš jo paimami tepinėliai.

Kuris metodas labiau lemia tikslius rezultatus, Sunku pasakyti. Abu jie savaip geri, tačiau gydytojui gali prireikti atlikti analizę tam tikru būdu, tada jis turi nukreipti ją į kryptį.

Rodikliai

Skaičiuojant retikulocitų lygį, lyčių normos skirtumai turi reikšmės tik po 12 metų. Iki šio amžiaus abiejų lyčių vaikų norma yra vienoda. Maždaug metų amžiaus mergaitėms prasideda mėnesinės, kurios yra reguliarios. Dėl mėnesinio kraujo netekimo plečiasi eritroidinių ląstelių svyravimų diapazonas.

1. Naujagimiams norma svyruoja nuo 0,15 iki 1,5 proc.

2. Dviejų savaičių vaikams – nuo ​​0,45 iki 2,0 proc.

3. Vaikams nuo vieno iki dviejų mėnesių – nuo ​​0,25 iki 0,95 proc.

4. Šešių mėnesių vaikams – nuo ​​0,2 iki 1,0 proc.

5. Vaikams nuo dvejų iki šešerių metų – nuo ​​0,25 iki 0,75 proc.

6. Vaikams nuo šešerių iki dvylikos metų – nuo ​​0,25 iki 1,3 proc.

7. Vyresniems nei dvylikos metų vyrams – nuo ​​0,25 iki 1,7 proc.

8. Vyresnėms nei dvylikos metų moterims – nuo ​​0,12 iki 2,1 proc.

Ką reiškia situacija, kai padaugėja retikulocitų?

Padidėjęs retikulocitų kiekis kraujyje

Esant įvairių etimologijų anemijai, retikulocitų skaičiaus nustatymas vaidina ypatingą vaidmenį. Jei jų kiekis kraujyje padidėja, ši patologija vadinama retikulocitoze. Jei padidėjimą lydi hemoglobino lygio padidėjimas, tai rodo, kad kaulų čiulpai turi gerą regeneracinį gebėjimą. Tai gali atsitikti, jei yra šie veiksniai:

Įvairių etimologijų hemolizinė anemija. Tai daugybė ligų, kurioms būdingas raudonųjų kraujo kūnelių sunaikinimas. Šis reiškinys vadinamas hemolize. Šiuo atveju retikulocitų kiekis kraujyje gali siekti 60%. Jei ištinka hemolizinė krizė, šis skaičius gali pablogėti.

Apsinuodijimas hemotoksinais sukelia hemolizę. Hemotoksinai yra angių nuodai ir kai kurie vaistai, naudojami eritremijai gydyti. Maliarijos toksinai taip pat gali sukelti hemolizę.

Parkinsono ligos gydymas levodopa.

Ilgalaikis tam tikrų priešuždegiminių ir karščiavimą mažinančių vaistų vartojimas.

Terapija narkotikų Aneminių ligų "eritropoetinas".

Kaulų čiulpų metastazės.

Atsigavimo laikotarpis po spindulinės ar cheminės terapijos.

Retikulocitozė gali būti klaidinga ir tikra.

Kodėl verta atlikti retikulocitų tyrimą? Šis klausimas dažnai užduodamas.

Tikra ir klaidinga retikulocitozė

Tikrajai retikulocitozei būdingas jaunų retikulocitų skaičiaus padidėjimas kraujyje, kurį lydi jų skaičiaus padidėjimas kaulų čiulpuose.

Netikrai retikulocitozei būdingas retikulocitų skaičiaus padidėjimas tik periferiniame kraujyje, o kaulų čiulpuose jų kiekis išlieka normalus arba šiek tiek sumažėjęs.

Sumažinti tarifai

Slopinant eritropoezę, stebimas retikulocitų skaičiaus mažinimo procesas. Atsiranda dėl šių veiksnių:

Ilgalaikis sulfonamidų vartojimas.

Tam tikrų vaistų, tokių kaip chloramfenikolis ar karbamazepinas, vartojimas.

Lėtinės infekcinės ligos.

Kai kurios sunkios inkstų ligos, turinčios įtakos eritropoezei.

Miksedema ar kitas skydliaukės funkcijos sutrikimas.

Navikai kaulų čiulpuose.

Ištyrėme, kas yra retikulocitas. Tai jaunas raudonasis kraujo kūnelis žmogaus kraujyje.

Retikulocitų padidėjimo priežastys, kaip nustatyti kraujodaros sistemos funkcionalumą?

Kartais, skiriant klinikinį tyrimą, bendras kraujo tyrimas gali atskirai nurodyti RTC arba RET – santrumpas, kurios rodo retikulocitų kiekį. Tai yra branduolių neturinčios ląstelės, kurios formuojasi prieš eritrocitus (raudonuosius kraujo kūnelius). Retikulocitų kiekis kraujo tyrime, jų skaičius ir santykis su eritrocitais atspindi kaulų čiulpų, taip pat visos kraujodaros sistemos būklę ir reprodukcinį funkcionalumą.

Medicininis sertifikatas

Taip galima detaliai nustatyti, kas yra retikulocitai: tai apvalios arba žvaigždės formos ląstelės, kurios susidaro kaulų čiulpuose ir, veikiamos glikoproteininio hormono eritropoetino, virsta raudonaisiais kraujo kūneliais.

Retikulocitų spalva dažniausiai yra rausva su mėlynu atspalviu. Juos išskirtinis bruožas Iš vėlesnės formos struktūroje yra likusių RNR, mitochondrijų ir kitų organelių, kurie atrodo kaip granuliuoti ir gijiniai dariniai, kurių praradimas rodo transformaciją į subrendusią ląstelę.

Funkcinės retikulocitų pareigos sutampa su eritrocitais – pernešti deguonį, tačiau daug mažesniu efektyvumu dėl mažo hemoglobino kiekio juose. Jie daugiausia susitelkę raudonuosiuose kaulų čiulpuose, plokščiuose ir vamzdiniai kaulai, o į kraują patenka tik subrendę raudonieji kraujo kūneliai. Tačiau nedidelė dalis nesubrendusių retikulocitų yra leidžiama ir periferinėje kraujotakoje, o tai rodo eritrocitų gamybos proceso (eritropoezės) suaktyvėjimą.

Kraujo susidarymo procesas

Eritropoezė prasideda nuo eritroblasto, ląstelės, turinčios branduolį, bet be hemoglobino, pavertimo pronormblastu. Be to, eritroidų serijoje susidaro bazofilinis eritroblastas, kuris jau turi hemoglobinizacijos priežastį.

Kadangi protėvių eritrocitai kaupia deguonį sulaikančią medžiagą (hemoglobiną), ląstelė pereina polichromatofilinio, o vėliau oksifilinio normoblasto stadijas. Per šį laikotarpį vis dar išsaugomas branduolys, kurio involiucijos metu susidaro tiesiogiai jaunas eritrocitas – retikulocitas, kuris jau turi savybę sulaikyti ir pernešti deguonį bei anglies dioksidą.

Jauni raudonieji kraujo kūneliai lieka formavimosi vietoje iki 40 valandų, po to nedidelė jų dalis, veikiami eritropoetino, patenka kraujagyslės, kur laisvai juda 1,5 ar 2 dienas. Per tą laiką ląstelė netenka tinklinio audinio (liekamieji gijiniai dariniai) ir virsta eritrocitu.

Retikulocitų vystymosi stadijos

Kraujyje retikulocitai pereina penkis brendimo etapus, kai tinklelis apima:

1. nulinė stadija - kai bazofilinė medžiaga (tinklinė tarpląstelinė medžiaga) turi branduolio formą, tai yra, granuliuotumo susikaupimas atrodo kaip vainikas;
2. pirmasis etapas - bazofilinė medžiaga (BS) įgauna tinklinę struktūrą rutulio pavidalu;
3. antrasis etapas - granuliuotas tinklas yra tolygiai paskirstytas ląstelėje;
4. trečiasis etapas - BV atrodo kaip atskiri siūlai;
5. ketvirtasis etapas – BV pasiskirsto smulkių grūdelių pavidalu išilgai ląstelės periferijos.

AT Sveikas kūnas retikulocitų kraujyje turėtų atsirasti tik III ir IV brendimo stadijos (80 proc.), o 0 – II – pavieniais egzemplioriais. Tačiau per didelė raudonųjų kraujo kūnelių mirtis arba deguonies badas skatina padidėjusį eritropoetino gamybą inkstuose, dėl ko į kraujagysles išsiskiria nesubrendusios visų stadijų ląstelės ir net normoblastai.

Kraujo tyrimas dėl retikulocitų

Retikulocitų skaičiaus kraujo tepinėlyje atlikti nereikia. hematologinis tyrimas, bet nurodo bendrą klinikinę analizę. Tik kilus tam tikriems įtarimams, gydytojas atlieka specialų paskyrimą.

Tyrimo priežastys

RTC kiekio kraujyje tyrimo priežastys yra kaulų čiulpų ir inkstų darbas gaminant kraujo ląsteles ir eritropoetiną tokiais atvejais:

• įtariant įvairios kilmės anemiją;
• jei reikia, geležies trūkumo, vitamino B12 ir folio rūgšties vaistų terapijos kontrolė;
• stebėjimui vartojant eritropoetino turinčius vaistus, eritrosupresorius;
• su dideliu išoriniu kraujavimu arba įtariant vidinį kraujavimą;
• dėl poreikio vartoti vaistus, kurie neutralizuoja toksinus dėl nuodingų vabzdžių ar gyvačių įkandimų;
• kontroliuoti raudonųjų kraujo kūnelių gamybą kaulų čiulpų ar inkstų transplantacijos metu;
• dėl vėžio apibrėžimo.

Paskutinis punktas yra susijęs su kai kurių metastazių ypatumais vėžiniai navikaiį kraują formuojančius organus.

Aptikimo metodas

Jei branduolys prarandamas, kraujo ląsteles galima tepti tik rūgštiniais dažais. Dažant kraujo tepinėliu, nurodomi eritroidų serijos elementai, kurie vėliau aptinkami naudojant šviesos mikroskopiją. Norint išskirti retikulocitus iš visos eritrocitų masės, reikia naudoti specialius preparatus, kurie keičia granuliuotos ląstelių struktūros spalvą.

Pats aptikimo procesas susideda iš kraujo plazmos maišymo su briliantiniu krezilo mėlynu arba akridino oranžiniu dažikliu in vitro (in vitro) arba ant stiklo santykiu: 1 dalis kraujo ir 10 dalių medžiagos.

Stiklo ir in vitro metodai iš esmės skiriasi. Pirmuoju atveju sumaišyti kraujo tepinėliai su dažais panardinami į drėgną aplinką 10 minučių, po to išdžiovinami ir ląstelės suskaičiuojamos mikroskopu. Antruoju variantu mėgintuvėlyje sumaišyta kompozicija paliekama iki 3 valandų, po to vėl sumaišoma, ištepama ir suskaičiuojama.

Kai išryškėja retikulocitų žvaigždinės ląstelės ir nustatomas jų brandumo laipsnis (pagal nudažyto BV struktūrą), galima gauti informacijos apie kaulų čiulpų būklę.

Leistini rodikliai

Normalus retikulocitų kiekis atitinka kraujo formavimosi procesą sveikame organizme. Duomenims tvarkyti naudojama speciali lentelė, kurioje normalūs diapazonai klasifikuojami pagal asmens amžių ir lytį.

Retikulocitų norma vaikų kraujyje

Retikulocitų norma vaikams skiriasi priklausomai nuo konkretaus hematopoetinės sistemos formavimosi laikotarpio. Taigi naujagimiams iki 14 dienų priimtina norma yra nuo 0,15 iki 1,5 procento, palyginti su raudonaisiais kraujo kūneliais. Normalios reikšmės kūdikiams iki dviejų mėnesių yra nuo 0,45 iki 2,1 proc., o iki šešių mėnesių - 0,25-0,9 proc. Vaiko nuo šešių mėnesių iki metų rodikliai nuo 0,2 iki 1 procento laikomi sveikais ir stabilizuojasi iki šešerių metų. Toliau ribos siaurėja: nuo 7 iki 12 metų svyruoja nuo 0,2 iki 1,3 proc.

Retikulocitai suaugusiųjų kraujyje

Tolesnis leistinas retikulocitų kiekis kraujyje labiau priklauso nuo vaiko lyties nei nuo amžiaus ir atitinka suaugusiųjų rodiklius. Tai susiję su pradžia mėnesinių ciklas mergaičių, o tai reiškia kasmėnesinį kraujo netekimą ir atitinkamai padidėjusį kraujo ląstelių gamybą šiuo laikotarpiu. Norminiai rodikliai:

• priimtinas jaunų raudonųjų kraujo kūnelių kiekis moterų ir mergaičių nuo 13 metų kraujyje bus nuo 0,12 iki 2,05 procento (atitinkamai nuo 1,2 iki 20 ppm);
• vyrų retikulocitų skaičius paprastai svyruoja nuo 0,24 iki 1,7 procento visos eritroidinės masės.

Taigi suaugusiam žmogui nustatomas pastovus leistinos jaunų kraujo kūnelių, kuriuose yra granuliuotos tinklelio medžiagos, koncentracijos diapazonas. Tuo pačiu metu padidėjęs rekulocitų kiekis arba retikulocitų krizė rodo tam tikrus kraujodaros sistemos veikimo sutrikimus.

Retikulocitų padidėjimas

Padidėjęs retikulocitų kiekis (arba kitaip retikulocitozė) tiriamajam gali būti teigiamas ir neigiamas. Padidėjęs nesubrendusių kraujo ląstelių skaičius atsiranda šiais atvejais:

• Teigiami gydymo geležies turinčiais preparatais, vitaminu B12 ir folio rūgštimi rezultatai, kurie paprastai atsiranda po savaitės.
• Papildant kraujo tūrį po didelio kraujo netekimo.
• Su teigiamais gydymo rezultatais onkologinės ligos su priešvėžiniais vaistais ar spinduline terapija.

Svarbu! Retikulocitozė stebima esant deguonies trūkumui dideliame aukštyje virš jūros lygio.

Neigiamos retikulocitozės reikšmės apima:

• Tokių ligų kaip vidurių šiltinės pasekmės, kurios provokuoja vidinį kraujavimą.
• Retikulocitų padaugėja apsinuodijus cheminiais nuodais ar svetimkūniais.
• Klaidinga retikulocitozė rodo nesubrendusių ląstelių buvimą kraujyje, bet ne kaulų čiulpuose, o tai rodo uždegiminiai procesai arba metastazių organizme.
• Retikulocitozė stebima sergant maliarija, hemolizine anemija ar talasemija.

Padidėjęs nesubrendusių kraujo ląstelių kiekis kraujyje (retikulocitozė) yra kupinas sutirštėjimo, kuris vėliau gali sukelti trombozę, širdies priepuolį ar insultą.

Retikulocitų kiekis kraujyje nėštumo metu

Nėščioms moterims bendras kraujo tūris padidėja dėl plazmos, todėl pastebimas jo praskiedimas ir raudonųjų kraujo kūnelių kiekio sumažėjimas. Dėl to, kad kraujyje nėra pakankamai hemoglobino, išsivysto anemija, dėl kurios suaktyvėja eritropoezės procesas. Todėl nėščiosios yra pasiryžusios aukštas procentas retikulocitų kiekis. Šio reiškinio klinika atitinka normą su fiziologiniu organizmo prisitaikymu gimdyti vaiką.

Sumažėja retikulocitai

Retikulocitopenija (kai sumažėja retikulocitų kiekis) dažnai rodo inkstų ir (arba) kaulų čiulpų pažeidimą. Veiksniai, mažinantys jaunų eritrocitų kiekį:

• Anemija, kurią sukelia folio rūgšties, vitamino B12 ar geležies trūkumas, dėl kurio sunaikinami raudonieji kraujo kūneliai.
• Inkstų ligos, tačiau jos gali šiek tiek sumažinti retikulocitų kiekį.
• Piktnaudžiavimas alkoholiu, dėl kurio sumažės RTC dėl inkstų funkcijų slopinimo, kaulų čiulpų slopinimo ir tiesioginio ląstelių sunaikinimo dėl intoksikacijos.

Svarbu! Piktybiniai navikai taip pat gali sumažinti retikulocitų kiekį kraujyje. Tai priklauso nuo kaulų čiulpų srities, kurioje vėžys metastazavo.

Pats retikulocitų kiekio kraujyje rodiklis nėra diagnozė. Esant reikšmingam nukrypimui nuo leistino diapazono, ji nustato bendrą diagnostikos kryptį.

Retikulocitai, kurių norma kinta dėl daugelio veiksnių, yra nesusiformavusios raudonųjų kraujo kūnelių formos, jų galima rasti kaulų čiulpuose ir periferiniame kraujyje. Paprastai retikulocitai kraujyje subręsta per 3–5 dienas, o vėliau šios ląstelės virsta jau subrendusiomis raudonosiomis kraujo kūneliais. Be to, nesusiformavusių eritrocitų skaičius yra žymiai didesnis nei suaugusiųjų.

Atskleidžiantisretikulocitų:

Nustatant retikulocitus, kurių norma nustatoma naudojant specialią lentelę, būtina atsižvelgti į jų skirtumus nuo subrendusių eritrocitų. Šioje kraujo kūnelių įvairovėje arba yra visas branduolys, arba jo liekanos stebimos kaip granuliuotos-gijinės medžiagos dalis. Norint nustatyti tokių ląstelių skaičių, būtina laboratorijoje ištirti kraujo tepinėlio spalvą. Tam naudojamas mėlynojo deimantų tirpalas, kuris užtepamas ant nuriebalinto ir iš anksto išplauto stiklo ir tik tada daromas tepinėlis.

Nustačius retikulocitų, kurių norma kitokia, iš karto po tepinėlio panaudotą stiklinę reikia įdėti į Petri lėkštelę – specialią drėgną kamerą, tada palaikyti penkias minutes, kruopščiai išdžiovinti gryname ore, o po to – mikroskopiškai. Be to, granuliuoto-gijinio tipo medžiaga retikulocito viduje dažniausiai nusidažo violetiniu-mėlynu atspalviu, o eritrocitų fonas išsiskiria melsvai žaliu atspalviu.

Jei naudojamas Gel-Meyer metodas, nesubrendusių kraujo ląstelių dažymas gali būti matomas daug geriau, tačiau tam reikia Vidal vamzdelio. Šiame inde pora lašų kraujo sumaišoma su brilianto tirpalu ir natrio chloridu, tada vamzdelis uždaromas dangteliu, o pats tepinėlis atliekamas per valandą.

Retikulocitų skaičius:

Apskaičiuojant nesubrendusių kraujo kūnelių skaičių, reikia paimti 1000 raudonųjų kraujo kūnelių, o tada atsižvelgti į retikulocitus, kurių dažnis paprastai svyruoja nuo 0,2% iki 1,2% suaugusiųjų raudonųjų kraujo kūnelių skaičiaus. Vidutiniškai daugumoje žmonių nesubrendusių eritrocitų skaičius paprastai yra 0,7%. iš viso visiškai subrendusios kraujo ląstelės. Jei retikulocitų skaičius viršija didžiausią leistiną normą 10% ir daugiau, žmogui išsivysto retikulocitozė – liga, kurią lydi reguliarus ūmus kraujavimas ir hemolizinė anemija.

Skaičiuojant retikulocitus (vaikų norma paprastai yra didelė), verta stebėti, kad jų skaičius neviršytų suaugusiems būdingų ribinių verčių. Standartai taip pat priklauso nuo lyties, nes moterims 2,07% nesubrendusių eritrocitų vis dar yra priimtinas parametras, o vyrams šis skaičius neturėtų viršyti 1,92%.

Tais atvejais, kai retikulocitų kiekis žymiai padidėja, tai rodo, kad organizme yra tokių sutrikimų kaip maliarija ir talasemija, policitemija ir hipoksija, anemija, visų rūšių hemoliziniai sindromai, tačiau tokie rodikliai galimi ir gydant cianokobalaminu. Sumažėjus nesubrendusių eritrocitų kiekiui, žmogui gali pasireikšti aplazinė ir hipoplastinė anemija, visokios inkstų ligos ir miksedemos, auglio metastazės išplitimas į kaulus.

Norint diagnozuoti anemijos sunkumą, reikia apskaičiuoti „retikulocitų indeksą“, kuris apskaičiuojamas kaip retikulocitų procento ir normalaus hematokrito dydžių santykis, padaugintas iš dienų skaičiaus, reikalingo nesubrendusioms ląstelėms patekti į periferinį kraują. Jei gautas indeksas neviršija dviejų, indikatorius rodo hipoproliferacinį anemijos komponentą, o jei jis viršija du, tai rodo padidėjusio raudonųjų kraujo kūnelių susidarymo tikimybę.

Retikulocitai – ląstelių, raudonųjų kraujo kūnelių pirmtakų, susidariusių kaulų čiulpuose, skaičiaus rodiklis. Retikulocitai – jauni raudonieji kraujo kūneliai atspindi kaulų čiulpų regeneracinį pajėgumą. Hematopoezės intensyvumui įvertinti naudojamas retikulocitų skaičius. Tyrimas atliekamas su: sumažėjus raudonųjų kraujo kūnelių skaičiui, įtariant hemolizę, įvertinus eritropoezę, gydant anemiją geležies preparatais ir vitaminu B 12, eritropoetinu.

Retikulocitai – tai nebranduoliniai, nesubrendę eritrocitai, kurių subrendimas įvyksta per 24-48 valandas nuo patekimo į periferinį kraują iš kaulų čiulpų. Susidariusių retikulocitų skaičius atspindi kaulų čiulpų eritropoetinį aktyvumą. Kitaip tariant, retikulocitų kiekis atspindi eritrocitų susidarymo greitį ir yra kaulų čiulpų reakcijos į anemizaciją rodiklis.

Be visuotinai priimtų retikulocitų parametrų - absoliutaus ir santykinio (%) retikulocitų kiekio, atsiradę nauji hematologiniai analizatoriai (dažymas specialiais nukleorūgščių dažais) leido gauti papildomų retikulocitų parametrų:

Retikulocitai, turintys mažą RNR kiekį, labiausiai subrendę (LFR%, mažos fluorescencijos retikulocitų frakcija);
retikulocitai, turintys vidutinį RNR kiekį (MFR%, retikulocitų frakcija su vidutine fluorescencija);
didelis RNR retikulocitų kiekis (HFR%, didelės fluorescencijos retikulocitų frakcija);
nesubrendusių retikulocitų frakcija (IRF%, nesubrendusių retikulocitų frakcija).

Retikulocitų diferenciacija, pagrįsta brandos laipsniu ir atitinkamai nukleorūgščių kiekiu, yra kaulų čiulpų kraujodaros veiklos atspindys.

Patento RU 2612018 savininkai:

Išradimas yra susijęs su medicina, būtent su laboratorine diagnostika, ir gali būti naudojamas automatiniam retikulocitų skaičiaus skaičiavimui kraujo tepinėlių analizatoriuose. Išradimo esmė: po pirminio supravitalinio retikulocitų dažymo briliantiniu krezilo mėlynu, tepinėliai papildomai fiksuojami ir 1 minutę dažomi May-Grunwald fiksatoriumi, nuplaunami tekančiu vandeniu, išdžiovinami ir automatiniu kraujo tepinėliu suskaičiuojami retikulocitai. analizatorius. POVEIKIS: pagerintas retikulocitų skaičiavimo tikslumas ir pagreitis. 2 iliustr., 3 pr.

Išradimas yra susijęs su medicina, būtent su laboratorine diagnostika, ir gali būti naudojamas automatiniam retikulocitų skaičiaus skaičiavimui kraujo tepinėlių analizatoriuose.

Retikulocitų kiekis ir kokybinė sudėtis yra vienas iš svarbių kraujodaros efektyvumą apibūdinančių rodiklių, o jų skaičiavimas plačiai taikomas atliekant masinius profilaktinius tyrimus ir reguliuojamas keletu įsakymų. Automatinių kraujo tepinėlių analizatorių naudojimas leidžia automatizuoti kraujo tepinėlio, nudažyto pagal Romanovsky-Giemsa, ląstelių sudėties įvertinimą. Tačiau retikulocitų skaičius tokiuose tepinėliuose neįmanomas dėl to, kad dažant pagal Romanovsky-Giemsa tinklinės filamentinės medžiagos neaptinkama.

Žinomas retikulocitų skaičiaus skaičiavimo metodas po supravitalinio dažymo specialiai paruoštame kraujo tepinėlyje [Laboratoriniai metodai klinikoje: vadovas / Menshikov VV, Delktorskaya LN, Zolotnitskaya RP ir kt.; Red. V.V. Menšikovas. - M.: Medicina, 1987, - 368 p.: iliustr., p. 118-119]. Tam kraujas, paimtas su antikoaguliantu (etilendiamido tetraacetatu, heparinu arba natrio citratu), sumaišomas su briliantinio krezilo mėlynojo dažo tirpalu, mišinys inkubuojamas 30 minučių ir paruošiamas plonas tepinėlis. Tačiau naudojant automatinius kraujo tepinėlių analizatorius, šis retikulocitų dažymo būdas duoda netikslius retikulocitų skaičiaus rezultatus. Taip yra dėl to, kad šiuo dažymo būdu eritrocitai nusidažo blyškiai, įvairiais geltonai mėlynos spalvos atspalviais, todėl sunku automatiškai atpažinti ląsteles ir identifikuoti tinklinę siūlinę medžiagą, kuri taip pat nusidažo mėlynai žaliai (1 pav.).

POVEIKIS: pagerintas retikulocitų skaičiavimo tikslumas ir pagreitis.

Šis rezultatas pasiekiamas pakeitus dažymo protokolą ir naudojant automatinius kraujo tepinėlių analizatorius.

Metodas iliustruotas nuotraukose, kur pirmoje nuotraukoje (1 pav.) matomas tradicinio retikulocitų dažymo rezultatas (prototipas); eritrocitai nusidažę įvairiais žalsvai melsvai atspalviais, dviejuose pastebima mėlyna retikulocitų tinklinė-gijinė medžiaga. Kitoje nuotraukoje parodytas siūlomo kraujo tepinėlio paruošimo metodo rezultatas: ryškiai raudonos spalvos eritrocitai, kurių fone retikulocitų tinklinė-gijinė medžiaga yra ryškiai raudona. Mėlyna spalva(2 pav.).

Metodas atliekamas taip.

Kraujas iš tiriamojo paimamas naudojant antikoaguliantą, pavyzdžiui, etilendiaminotetraacto rūgšties kalio druską. Supravitalinis retikulocitų dažymas atliekamas naudojant briliantinį krezilo mėlyną (brilliant cresyl blue). Į 0,1 ml viso kraujo įpilkite 0,4 ml dažų tirpalo ir inkubuokite 30 minučių. Tada iš gauto mišinio paruošiamas plonas tepinėlis. Tepiniui išdžiūvus, jis papildomai tvirtinamas ir apdailinamas May-Grunwald fiksuojančiais dažais. Norėdami tai padaryti, išdžiūvęs tepinėlis 1 minutei dedamas į indą su fiksuojančiais dažais, tada išimamas iš indo ir nuplaunamas tekančiu vandeniu. Po džiovinimo vaistas tiriamas kraujo tepinėlių analizatoriais, pavyzdžiui, Vision Hema® (FIRM MEDICA PRODUCT, Rusija). Eritrocitai nusidažo raudona spalva, prieš kurią retikulocituose aiškiai matoma mėlyna tinklinė-gijinė medžiaga (2 pav.). Surinkite ir ištirkite eritrocitus, ne mažiau kaip 1000 vnt. Eritrocitų, turinčių retikulofilamentinės medžiagos, skaičius skaičiuojamas visų surinktų eritrocitų atžvilgiu. Rezultatas išreiškiamas procentais.

Kraujo tepinėlių dažymui naudojami šie tirpalai:

1) briliantinio krezilo mėlynojo tirpalas absoliučiame alkoholyje. Norint paruošti absoliutų alkoholį, būtina atlaikyti 96% etanolį, kelis kartus keičiant deginto vario sulfatą (kol bevandenio vario sulfato milteliai nustos mėlynuoti). 100 ml absoliutaus alkoholio imama 1,2 g dažų (Medicinos laboratorijos technologijos ir diagnostika: vadovas. Medicinos laboratorijos technologijos / Redagavo prof. A.I. Karpishchenko. - Sankt Peterburgas; Intermedica, 2002. - 408 p. P. 284 ) .

2) May-Grunwald fiksuojantys dažai - 1 g sausų dažų turi būti ištirpintas 1 litre metilo alkoholio. (Medicinos laboratorijų technologijos ir diagnostika: vadovas. Medicinos laboratorijų technologijos / Redagavo prof. A.I. Karpiščenko. - Sankt Peterburgas; Intermedica, 2002. - 408 p. S. 277).

Konkretaus įgyvendinimo pavyzdžiai:

1 pavyzdys. Pacientas I., 48 m. Išlaikė periodinę apžiūrą kaip naftos perdirbimo gamyklos darbuotojas. Pacientui buvo paimtas kraujas su antikoaguliantu (etilendiamino acto rūgšties kalio druska) ir paruošti 2 tepinėliai. Retikulocitai viename tepinėlyje buvo nudažyti tradiciniu metodu, tik naudojant briliantinį krezilo mėlynumą. Retikulocitai antrajame tepinėlyje buvo nudažyti pagal siūlomą metodą. Norėdami tai padaryti, 0,1 ml kraujo buvo sumaišyta su briliantinio krezilo mėlynojo tirpalu ir inkubuojama 30 minučių. Tada buvo paimtas plonas kraujo tepinėlis. Po džiovinimo kraujo tepinėlis buvo papildomai fiksuotas ir nudažytas panardinant į May-Grunwald fiksuojamuosius dažus. Tepinėliuose retikulocitų skaičius buvo nustatytas naudojant Vision Hema ® Pro kraujo tepinėlių analizatorių (FIRM MEDICA PRODUCT, Rusija) ir rankiniu būdu šviesos mikroskopu (Meiji, Japonija).

Kraujo tepinėlio analizatoriuje su tradiciniu dažymu suskaičiuotas retikulocitų skaičius viršijo normos etaloninį diapazoną, o tepinėlyje, nudažytame siūlomu metodu, buvo 0,9%, o tai atitinka normalias vertes. suaugęs. Rankiniu būdu skaičiuojant retikulocitus, jų skaičius tuose pačiuose tepinėliuose buvo atitinkamai 0,8% ir 0,9%. Tai rodo, kad naudojant siūlomą tepinėlių ruošimo metodą, kraujo tepinėlių analizatorių skaičiavimo tikslumas padidės. Tuo pačiu metu retikulocitų tyrimo greitis kraujo tepinėlio analizatoriumi buvo 48 ir 54 sekundės, o rankinis retikulocitų skaičiavimas užtruko 270 ir 238 sekundes.

Taigi šis pavyzdys rodo, kad siūlomas retikulocitų dažymas naudojant kraujo tepinėlių analizatorius padidina rezultatų tikslumą ir greitesnį retikulocitų skaičių.

2 pavyzdys. Pacientas Z. buvo paguldytas į Permės KMSCh 1 hematologijos skyrių su aplazinės anemijos diagnoze. Kaip tyrimo protokolo dalis buvo atliktas retikulocitų skaičius. Pacientui buvo paimtas kraujo mėginys su antikoaguliantu (etilendiamino acto rūgšties kalio druska) ir paruošti 2 tepinėliai. Retikulocitai viename tepinėlyje buvo nudažyti tradiciniu metodu, tik naudojant briliantinį krezilo mėlynumą. Retikulocitai antrajame tepinėlyje buvo nudažyti pagal siūlomą metodą. Norėdami tai padaryti, 0,1 ml kraujo buvo sumaišyta su briliantinio krezilo mėlynojo tirpalu ir inkubuojama 30 minučių. Tada buvo paimtas plonas kraujo tepinėlis. Po džiovinimo kraujo tepinėlis buvo papildomai fiksuotas ir nudažytas panardinant į May-Grunwald fiksuojamuosius dažus. Tepinėliuose retikulocitų skaičius buvo nustatytas naudojant Vision Hema ® Pro kraujo tepinėlių analizatorių (FIRM MEDICA PRODUCT, Rusija) ir rankiniu būdu šviesos mikroskopu (Meiji, Japonija).

Tradiciškai dažytame tepinėlyje kraujo tepinėlio analizatoriumi suskaičiuotų retikulocitų skaičius buvo 0,3%, modifikuotu būdu nudažytame tepinėlyje - 0,2%. Skaičiuojant rankiniu būdu, rezultatas yra 0,2% ir 0,2%. Tuo pačiu metu retikulocitų skaičiavimo greitis kraujo tepinėlio analizatoriumi buvo 58 ir 52 sekundės, o rankinis retikulocitų skaičiavimas užtruko 302 ir 338 sekundes.

Šiuo atveju dėl mažo retikulocitų kiekio reikšmingų skirtumų rezultatuose nenustatyta, tačiau tiriant nudažytą tepinėlį kraujo tepinėlio analizatoriumi gautas šiek tiek pervertintas rezultatas. įprastu būdu. Kaip ir ankstesniame pavyzdyje, buvo parodytas reikšmingas (beveik 5 kartus pagreitėjęs retikulocitų skaičius).

3 pavyzdys. Pacientas K. Paguldytas į Permės miesto Vaikų miesto klinikinės ligoninės Nr. 13 naujagimių patologijos skyrių su diagnoze hemolizinė liga naujagimių. Kaip tyrimo protokolo dalis, buvo atliktas ĄŽUOLAUSAS su retikulocitų skaičiumi. Pacientui buvo paimtas kraujo mėginys su antikoaguliantu (etilendiamino acto rūgšties kalio druska) ir paruošti 2 tepinėliai. Retikulocitai viename tepinėlyje buvo nudažyti tradiciniu metodu, tik naudojant briliantinį krezilo mėlynumą. Retikulocitai antrajame tepinėlyje buvo nudažyti siūlomu metodu. Norėdami tai padaryti, 0,1 ml kraujo buvo sumaišyta su briliantinio krezilo mėlynojo tirpalu ir inkubuojama 30 minučių. Tada buvo paimtas plonas kraujo tepinėlis. Po džiovinimo kraujo tepinėlis buvo papildomai fiksuotas ir nudažytas panardinant į May-Grunwald fiksuojamuosius dažus. Tepinėliuose retikulocitų skaičius buvo nustatytas naudojant Vision Hema ® Pro kraujo tepinėlių analizatorių (FIRM MEDICA PRODUCT, Rusija) ir rankiniu būdu šviesos mikroskopu (Meiji, Japonija).

Tradiciškai dažytame tepinėlyje kraujo tepinėlių analizatoriumi suskaičiuotas retikulocitų skaičius buvo 30,3%, modifikuotu būdu nudažytame tepinėlyje - 21,2%. Skaičiuojant rankiniu būdu, rezultatas yra 20,6% ir 22,4%. Tuo pačiu metu retikulocitų skaičiavimo greitis kraujo tepinėlių analizatoriuje buvo 52 ir 51 sekundė, o rankinis retikulocitų skaičiavimas užtruko 298 ir 304 sekundes.

Šis pavyzdys rodo, kad sumažėjęs retikulocitų skaičiavimo tikslumas kraujo tepinėlių analizatoriuose stikliniuose preparatuose, nudažytuose tradiciniu metodu, ypač su dideliu retikulocitų kiekiu. Naudojant naują tepinėlio dažymo metodą, beveik visiškai sutapo retikulocitų skaičiavimo automatiniu analizatoriumi ir rankiniu būdu rezultatai, o retikulocitų skaičiavimo greitis padidėjo daugiau nei 5 kartus.

Kraujo tepinėlių, skirtų retikulocitams skaičiuoti, paruošimo, retikulocitų supravitaliniu būdu dažant briliantiniu krezilo mėlynu, paruošimo būdas, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad po dažymo briliantiniu krezilo mėlynu tepinėliai papildomai fiksuojami ir dažomi dažais - May-Grunwald fiksatoriumi 1 minutę, plaunami tekančiu vandeniu. vandens, išdžiovinti ir automatiniu kraujo tepinėlio analizatoriumi suskaičiuoti retikulocitai.

Panašūs patentai:

Išradimas yra susijęs su diagnostika ir ypač su vystymosi prognozavimo būdu pūlingos komplikacijos kasos nekrozė. Pūlingų kasos nekrozės komplikacijų atsiradimo prognozavimo metodas yra toks: paciento, sergančio sterilia kasos nekroze, nuo penktos dienos nuo ligos pradžios, alfa amilazės aktyvumas kraujyje, bendrojo baltymo kiekis, limfocitai, monocitai kraujyje, albumino ir globulinų santykis kraujo serume nustatomas, paciento būklės sunkumas pagal šias skales SAPS, SOFA, SIRS, parapankreatinio infiltrato buvimas, virškinimo trakto parezė, ūminis skysčių susikaupimą omentiniame maišelyje arba retroperitoniniame audinyje ir pagal formulę apskaičiuokite kasos nekrozės infekcijos indeksą (IPN).

MEDŽIAGA: išradimų grupė yra susijusi su analitės koncentracijos nustatymu biologinis skystis remiantis gautomis dabartinės vertės priklausomybėmis nuo laiko. Analitės koncentracijos fiziologiniame skystyje nustatymo metodas apima reagento, skirto sąveikai su analite fiziologiniame skystyje, įdėjimą tarp pirmojo elektrodo ir antrojo elektrodo, fiziologinio skysčio užtepimą ant reagento, analitės transformavimą į fiziologinį skystį. ir nestacionarios srovės sužadinimas iš kiekvieno iš pirmojo ir antrojo elektrodų, nustatant nestacionarios srovės piką kiekvienam iš pirmojo ir antrojo elektrodo, išmatuojant trumpalaikės srovės vertę tam tikru laiko poslinkiu nuo kiekvieno elektrodo piko. pereinamoji srovė iš kiekvieno iš pirmojo ir antrojo elektrodo, o pirmojo elektrodo laiko poslinkis apima pirmąjį laiko poslinkį nuo pirmojo elektrodo pereinamosios srovės piko ir laiko poslinkį nuo nestacionarios srovės piko. antrojo elektrodo poslinkis apima antrąjį laiko poslinkį, kuris skiriasi nuo pirmojo laiko poslinkio, ir analitės koncentracijos apskaičiavimą, pagrįstą išmatuotomis pirmojo ir antrojo elektrodo srovės vertėmis matavimo etape. renis.

Išradimas yra susijęs su medicina ir yra nustatymo metodas skausmo sindromas su polineuropatija pacientams, sergantiems vibracijos liga, įskaitant mėginių ėmimą veninio kraujo, gauti kraujo serumą ir nustatyti kiekybinį serotonino kiekį jame.

Išradimas yra susijęs su medicina, būtent su pulmonologija, ir yra susijęs su gydymo Ceruloplasmin trukmės pasirinkimo metodu pacientams, sergantiems bronchų astma. Metodo esmė slypi tame, kad pacientams, sergantiems bronchine astma, po gydymo Ceruloplasmin 100 mg doze į veną kraujyje nustatomas sukroksido dismutazės (SOD) ir malono aldehido (MA) santykis bei jų MDA/SOD santykis. kartą per dieną 7 dienas.

Išradimas yra susijęs su ichtiologija ir žuvų auginimu ir yra eršketų fiziologinės būklės tyrimo metodas, įskaitant žuvų kraujo serumo tyrimą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad kraujo serumas tiriamas ribinės dehidratacijos analitinėse ląstelėse metodu ir morfologine analize. susidariusių struktūrų atliekama įprastinės mikroskopijos režimu įvairiais padidinimais, esant Šiuo atveju dendritinės ir pereinamosios formos yra homeostazės normos rodikliai, o plokščių struktūrų buvimas rodo žuvų organizme vykstančius pokyčius.

Išradimas yra susijęs su medicina, būtent su organų transplantacija ir klinikine laboratorine diagnostika. Praėjus 3-4 savaitėms po kepenų transplantacijos, vaikų kraujo plazmoje matuojama transformuojančio augimo faktoriaus beta 1 (TGF-β1) koncentracija ng/ml.

Išradimas yra susijęs su medicinos sritimi ir yra susijęs su priepuolio sunkumo diagnozavimo metodu pacientams, sergantiems Krono liga. Metodo esmė slypi tame, kad nustatomas eritrocitų nusėdimo greitis (ESR), C reaktyvaus baltymo (CRP) koncentracija, vaskuloendotelio faktoriaus (VEF) lygis serume, desquamated endoteliocitų (DEC) skaičius. apskaičiuojama kraujo plazmoje, šlapime nustatoma mikroalbumino (MAU) koncentracija.

Išradimas yra susijęs su vožtuvais, naudojamais dujinėms terpėms, ir gali būti ypač naudojamas mėginių ėmimo talpyklose. Dujoms nepralaidus vožtuvas susideda iš pagrindo 1, korpuso 2, mažiausiai keturių sandarinimo žiedų 5, 6, 7 ir 8, pagamintų iš polimerinės elastinės medžiagos, ir veleno 3 su rite 3a.