Sifilio sukėlėjas. Sifilis yra užkrečiamas venerinė liga su odos pažeidimais Vidaus organai, kaulai, nervų sistema.

Patogeno ypatybės. Sifilio sukėlėjas Treponema pallidum (blyški treponema). Nurodo skyrių Gracilicutes , šeima Sprigochaetaceae.

Morfologija: plona spirališkai susisukusios bakterijos (4-14 mikronų) su vienodomis (vienodo ūgio) mažomis garbanomis. Jie juda ašinio sriegio, esančio tarp ląstelės sienelės ir CPM, pagalba (atlieka siūbavimo, transliacinius ir kitus kūno judesius). Sporos ir kapsulės neturi. Bakterijos gali būti kitokios formos: cistos, granulės, L formos.

Tinktoriaus savybės: sunkiai nudažytas, blyškiais tonais (pavadinimas blyški treponema), gramas "-". Pasak Romanovskio-Giemsos, jie nudažyti šiek tiek rausva spalva.

Kultūros vertybės: privaloma anaerobai, sunkiai auga specialiose maistinėse terpėse: ascitinis BCH su kepenų, inkstų, smegenų gabalėliais, galvijų širdies sultinys, pridedant cistino, natrio tioglikolato, 35 ° C temperatūroje (jie miršta 40 ° C temperatūroje).

Kultūrinės treponemos yra mažiau virulentiškos, tačiau jų antigenai panašūs į audinių treponemas, kurios naudojamos sifilio diagnostikai.

Antigeninė striktūra: yra keletas antigenai (polisacharidas, lipoidas, baltymas); blyškios treponemos antigeninės savybės yra panašios į kitų treponemų; patogeno lipoidinis antigenas yra identiškas lipoidiniam ekstraktui iš galvijų širdies, todėl sifilio serodiagnostikai naudojami alkoholiniai ekstraktai iš galvijų širdies (Sachs ir Kahn reakcija), iš arklio širdies (Meinike reakcija).

Atsparumas:šiek tiek stabilus aplinkoje, esant 55 ° Sulenkti po 15 minučių, jautrus džiūvimui, šviesai, gyvsidabrio druskoms, bismutui, arsenui, penicilinui. Patogeniškumas gyvūnams: natūraliomis sąlygomis, blyškus treponema yra patogeniška tik žmonėms; eksperimentinis sifilis gali būti sukeltas triušio sėklidėje ir odoje, beždžionių odoje (pirmą kartą eksperimentinį sifilį Mechnikovas ir Roux sukėlė 1903 m. šimpanzėse, todėl buvo galima išbandyti vaistų nuo sifilio salvarsano ir neosalvarsano poveikis).

Sifilio epidemiologija. Infekcijos šaltinis- sergantis žmogus; didžiausias pavojus reprezentuoja asmenis ankstyvosiose ligos stadijose, tretiniame laikotarpyje žmogus neužkrečiamas (vidutiniškai 4 metai po užsikrėtimo).

Perdavimo mechanizmas- kontaktas. Perdavimo maršrutai:

1) lytiniu būdu – vyraujantis perdavimo būdas; 2) galima infekcija per bučinį 3) per maitinančios motinos pieną; 4) per namų apyvokos daiktus (akinius, dantų šepetėlius, cigaretes) – labai retai; patogenas išlaiko užkrečiamumą ant namų apyvokos daiktų, kol išdžiūsta (buitinis sifilis);

5) sifiliu (transplacentiniu) arba per gimdymo kanalą (įgimtas sifilis) gali užsikrėsti vaisiaus infekcija, kurios sukėlėjas negali prasiskverbti pro placentą per pirmuosius 4 nėštumo mėnesius ir motinos gydymas per šiuos mėnesius. menstruacijos apsaugo nuo vaisiaus infekcijos; b) neatmetami infekcijos atvejai perpilant kraują iš donorų , pacientų, sergančių sifiliu.

Inkubacinis periodas: 3-4 savaites. Pasibaigus inkubaciniam laikotarpiui, sifilis tęsiasi cikliškai (su pokyčiais ligos periodai). Sifilio skirstymas į stadijas yra sąlyginis, nes. periodų kaitos seka stebima ne visais atvejais. Pirminis laikotarpis: įjungta formuojasi įgyvendinimo vieta (ant lytinių organų, ant lūpų). kietas šansas (staigiai ribotas sutankinimas, kurio paviršiuje atsiranda opa, kuri užgyja po 6-7 savaičių, o jos vietoje lieka žvaigždės formos randas), treponemos randamos ir padidėjusiems regioniniams limfmazgiams. Antrinis laikotarpis(po latentinio periodo b - 8 sav.): vystosi negydant, daugybiniai bėrimai ant odos, gleivinių, lytinių organų, pastebimas plaukų slinkimas, reikšmingi vidaus organų pakitimai. Trunka 3-4 metus. Žmogus jame laikas užkrečiama aplinkiniams. Šios apraiškos gali išnykti be gydymo, tačiau patogenas lieka organizme ir lėtai vystosi, sukeldamas dramatiškus organų ir audinių pokyčius. Tretinis laikotarpis: išsivysto negydant, dažniausiai po 3-4 metų, pastebimi odos, gleivinių, kaulų, sąnarių, vidaus organų, nervų sistemos pažeidimai, juose susidaro dantenos - sankaupos, linkusios į irimą ir išopėjimą. Trečiasis laikotarpis trunka metus. Negydant (vidutiniškai po 8–15 metų) gali išsivystyti neurosifilis - sunkus centrinės nervų sistemos pažeidimas(smegenų sifilis, paralyžius ir sausumas nugaros smegenys esant nuolatiniams judėjimo sutrikimams, sutrinka protinė veikla) ​​ir gali ištikti mirtis. Su įgimtu sifilis vaikų išberia, varva nosis, pakinta vidaus organai, paralyžiuoja galūnės. Jei tėvai sirgo sifiliu ir pasveiko, vaikas gali turėti ligos apraiškų - 30-60% - nervų sistemos pažeidimo. Su intrauterine infekcija sifiliu gali būti persileidimas.
Klinika šiuolaikinis sifilis pasikeitė. Inkubacinis laikotarpis pailgėjo (iki 4 mėn.) Antrinio sifilio metu gali būti stebimi keli atkryčiai (bėrimai atsiranda ir išnyksta kelis kartus). Atsirado ištrintų sifilio formų: vietoj šankro formuojasi erozijos, gimdos ertmėje randami šankrai, vyrams - šankrai lytinių organų pūslelinės pavidalu. Naujausi tyrimai rodo, kad pacientai nebūtinai patiria visą sifilio klinikinių apraiškų spektrą. Etiopijoje tretinis sifilis registruojamas tik širdies ir kraujagyslių pažeidimų forma. Tai. klinikinės sifilio apraiškos priklauso nuo žmogaus imuniteto būklės, kuri gali sustabdyti pažeidimų vystymąsi bet kurioje stadijoje.

Imunitetas. įgimtas imunitetas ne. Po ligos ir išgydymo imunitetas nesusiformuoja. Galimas pasikartojimas. Per laikotarpį liga- nesterilus imunitetas. Infekcinį imunitetą lydi alergijos, kurios išnyksta pasveikus. Galima superinfekcija – pakartotinė užsikrėtimas ligos metu. Tokiu atveju kietas šancras nesusidaro, o treponemos plinta visame kūne, dalyvaudamos proceso apibendrinimo procese.

Laboratorinė diagnostika. Naudojama medžiaga ir metodai priklauso nuo ligos laikotarpio. Patogeno išskyrimas paprastai neatliekamas, nes turimi kultūrų gavimo metodai nebuvo sukurti. pirminis laikotarpis. Tiriama medžiaga: audinių sultys kietojo šanko, taškinės iš limfmazgių.

Metodas – mikroskopinis: treponemos stebimos gyvai tamsiame lauke, kartais naudojamas Romanovskio-Giemsa dažymas. Antrinis ir tretinis laikotarpiai.

Ištirta medžiaga - paciento kraujo serumas. Metodas – serologinis antikūnų prieš sifilio sukėlėją nustatymas pacientų kraujo serume. Tam šie serologiniai reakcijos;

1) Wassermanno reakcija– RW(komplemento surišimo reakcija – RSK); šiame re- Naudojamas kaip antigenas kardiolipino antigenas(ištrauka iš jaučio širdies raumenų + alkoholio cholesterolio tirpalas). Šis antigenas yra nespecifinis.Ši reakcija pirmąsias 3 ligos savaites yra neigiama, antikūnai atsiranda nuo 4 savaitės (pirminio sifilio pabaiga, antrinio sifilio pradžia). Pastaraisiais metaisšis tyrimas tapo ne toks specifiškas ir duoda klaidingus rezultatus: 5 ligos savaitę jis gali būti neigiamas arba teigiamas sergant kitomis ligomis – sergant kepenų ligomis, kolagenoze, kitomis spirochetozėmis. Tikslesnei diagnozei nustatyti naudojami ir kiti tyrimai.

2) nuosėdų reakcijos: Kahn ir Sachs-Vitebsky reakcija, Meinike reakcija, citocholinis testas;šios reakcijos pagrįstos flokuliuojančių nuosėdų susidarymu po lipoidinių antigenų pridėjimo į paciento serumą;

3) Treponema pallidum imobilizacijos reakcija (RIBT)– specifiškiausias šiuolaikinis serologinis tyrimas – kai pridedamas paciento kraujo serumas ir priedas prie kultūrinio treponemamas (specifinis antigenas) jie praranda mobilumą.

Greitajai diagnostikai (su masinės apklausos). imunofluorescencinė reakcija (RIF)- mikroreakcija ant stiklo su kraujo lašeliu arba serumu su specialiu antigenu.

Gydymas. Naudojami antibiotikai. Veiksmingiausias yra penicilinas. Su jo netoleravimu naudojami tetraciklinai, chloramfenikolis. Naudojami bismuto preparatai – bijochinolis, bismoverolis, pentabizmolis. Ankstyvas gydymas, prasidėjęs pirmosiomis pirminio sifilio dienomis, per trumpą laiką išgydo ligą. Paprastai sifilis išgydomas taikant etapinę ir kombinuotą chemoterapiją, kuri atliekama keliais kursais per 2-3 metus. Sergant antriniu sifiliu, išgydoma ne daugiau kaip 25 % pacientų , 25% procesas pereina į latentinę fazę, o 50% pereina į tretinę fazę. Sergant tretiniu sifiliu, gydymas yra simptominis.
Prevencija. Specifinių profilaktikos priemonių nėra. specifinė prevencija - higienos taisyklių laikymasis, ankstyva diagnostika ir privalomas gydymas, atsitiktinio sekso pašalinimas.

63 psl. iš 91

PATOGENINIAI SPIROCHETAI
Spirochetai, skirtingai nei bakterijos, yra mažiau paplitusi mikroorganizmų grupė.
Visos spirochetos nesudaro sporų ar kapsulių. Jie nedažo pagal gramą (gramneigiami). Sunku auginti maistinėse terpėse. Spirochetai – saprofitai randami rezervuaruose, kuriuose gausu organinių atliekų, dumble, burnos ertmėje ir žmogaus žarnyne. Savomis morfologinės savybės patogeninės spirochetos skirstomos į tris grupes.

1. Treponema, turinti taisyklingos spiralės formą. Tai apima spirochetinį sifilį.
2. Borelijos, turinčios gofruoto sriegio formą su vingiais ir platesnėmis garbanomis. Šiai grupei priklauso spirochetai pasikartojantis karščiavimas ir Vincento spirocheta.
3. Leptospira, kuri turi daug mažų garbanų ir būdingų kabliuko formos galūnių (leptospira infekcinė gelta).

SIFILIS SPIROCHETAS
Sifilio sukėlėjas yra blyškioji spirocheta Spirochaeta pallida, kurią F. Shaudin ir E. Hoffmann pirmą kartą aprašė 1905 m. Prieš 2 metus, eksperimentuodamas su beždžionėmis, D. K. Zabolotny atrado sifilio spirochetą.
Morfologija ir tinctorinės savybės. Blyški spirocheta – labai gležnas, plonas siūlas, silpnai laužantis šviesą su mažais, vienodai, taisyklingais vingiais (104 ir 105 pav. ant įdėklo).

Ryžiai. 104. Treponema pallidum tamsiame lauke.
Vidutiniškai jis yra nuo 6 iki 14 mikronų ilgio ir 0,25 mikronų storio. Ji gavo pavadinimą blyškiai dėl prasto dažymo anilino dažais ir prasto matomumo gyvoje būsenoje. Šias savybes lemia mažas nukleoproteinų kiekis ir lipoidų gausa spirochetos kūne. Beicuoti reikia Romanovskio metodu (105 pav.) arba beicuoti, prieš tai paveikus kokiu nors kandikliu. geriausias metodas pallidum spirochete aptikimas yra tyrimas tamsiame regėjimo lauke. Šviežioje medžiagoje, kai tiriama ultramikroskopu su patamsėjusiu matymo lauku, blyški spirocheta rodo aktyvius judesius aplink išilginę ašį, taip pat transliacinius ir sukamuosius judesius.
Auginimas. Įprastose maistinėse terpėse sifilio spirochetas nesidaugina. V. M. Aristovskis ir A. A. Geltseris sėkmingai panaudojo skystą maistinę terpę, susidedančią iš triušio serumo, pridedant prie jos smegenų audinio gabalėlį. Terpės paviršius po sėjos užpildomas vazelinu. Kultūrose spirochetos yra stambesnės, trumpesnės ir skiriasi polimorfizmu. Gautos kultūros neturi patogeninių savybių ir yra vadinamos „kultūrinėmis“, priešingai nei „audiniai“, kurios išlaiko patogenines savybes.
ypatybes ir yra paremtos laboratorijose ištraukomis ant triušių.
pasipriešinimas. Blyški spirocheta nėra labai atspari džiūvimui ir aukštos temperatūros. Įkaitinus iki 45-48°, jis žūva per valandą, iki 55° per 15 minučių. Mažiau jautrus žemai temperatūrai. 10° temperatūroje jis išlieka gyvybingas iki kelių dienų. Dezinfekavimo priemonės yra kenksmingos. Nuo cheminių medžiagų stipriausią poveikį turi 1-2% fenolio tirpalas.
Patogeniškumas gyvūnams. I. I. Mechnikov ir D. K. Zabolotny pirmą kartą sugebėjo užsikrėsti sifiliu beždžionėms. Triušiai gali užsikrėsti patekę patologinės medžiagos į rageną, priekinę akies kamerą, odą, gleivinę ir kt. Tokiu atveju gyvūnams atsiranda pirminis pažeidimas tipinės sklerozės (šankro) forma. vakcinacijos vieta.
Sifilio patogenezė ir klinika. Vienintelis infekcijos šaltinis yra sifiliu sergantis žmogus. Liga gali būti perduodama tiek tiesioginio kontakto (dažniausiai lytiniu būdu), tiek per daiktus, užterštus sifilio išskyromis. Valgymas iš bendrų indų, dalijimasis šaukštu ir pan. (netiesioginis kontaktas) gali prisidėti prie buitinio sifilio plitimo.
Blyški spirocheta patenka į organizmą per pažeistas gleivines ir odą. Po 3-4 savaičių įėjimo vartų vietoje atsiranda pirminė sklerozė - kietasis šankras (opa tankiais kraštais ir dugnu; iš čia ir kilęs pavadinimas kietasis šankras), apibūdinantis pirminį sifilio periodą.
Ateityje mikrobas į organizmą patenka limfos ir kraujotakos takais ir pasklinda po visą organizmą – prasideda antrasis periodas. Šiam periodui būdingi odos ir gleivinių pažeidimai, ant kurių atsiranda rozeolės, papulės, pūslelės ir pustulės – sifilidai. Antrasis laikotarpis trunka nuo 2-3 mėnesių iki kelerių metų. Jei sifilis nebuvo gydomas pakankamai, prasideda trečiasis laikotarpis – guminis. Gumos (granulomos) yra ląstelių sankaupos, susidedančios iš limfocitų, epitelioidinių ir plazminių ląstelių. Jie gali būti odos storio, gleivinių, vidinių
organai ir tt Gummos kartais pasiekia dideli dydžiai, šalia jų esantys maži indai palaipsniui mažėja spindyje ir galiausiai užsidaro. Šiuo atžvilgiu sutrinka dantenų ląstelių mityba, o jos giliai sunaikinamos, kai bet kuriuose audiniuose ir organuose susidaro opos ir randai.
Kai kuriais atvejais sifilis pereina į ketvirtąjį periodą, kuriam būdingi centrinės nervų sistemos pažeidimai progresuojančio paralyžiaus ir nugaros skilčių pavidalu. Klinikinės apraiškos sifilis išsiskiria tuo, kad daugeliu atvejų atsirandantys odos ir gleivinių pažeidimai yra neskausmingi, išnyksta net ir be medicininės intervencijos, kartojasi ir galiausiai sukelia sunkius trečiojo ir ketvirtojo periodo pažeidimus.
Imunitetas. Žmonėms nėra įgimto imuniteto sifiliui. Perduota liga taip pat nepalieka įgyto imuniteto tipo, būdingo daugumai infekcinių ligų. Sergant sifiliu antriniu būdu užsikrėtus, spirochetos nežūva, o išlieka ir išplinta visame kūne, kartu su likusiomis pirminės infekcijos spirochetomis užkrėsdamos organus ir audinius. Tačiau antrinei užsikrėtus sifiliu pirminės reakcijos formos – šanko – nėra. Ši imunologinė būklė vadinama „kankerio imunitetu“.
„Imunitetu“ sergant sifiliu suprantamas imunologinis organizmo restruktūrizavimas, susijęs su patologinių pokyčių pobūdžiu ir klinikinis vaizdas. Kalbant apie šio „imuniteto“ mechanizmą, tai ne dėl humoralinių faktorių, nors pacientų serume randama antikūnų (lizinai, agliutininai).
Laboratorinė diagnostika. Pirmuoju sifilio periodu diagnozė nustatoma atlikus bakterioskopinį tyrimą tamsiame lauke arba dėmėtus medžiagos tepinėlius iš kietojo šanko.
Tyrimams būtina išskirti audinių skystį iš gilių pažeidimo dalių, kuriose yra daugiau spirochetų. Šiuo tikslu pirmiausia atsargiai nuvalykite šankrao paviršių steriliu tamponu, pamirkytu fiziologiniame fiziologiniame tirpale, tada švelniai išspaudžiant iš jo išspaudžiamas opos dugnas. didelis skaičius audinių skystis. Jei tai nepavyksta, opos dugnas dirginamas šiek tiek pabraukiant skalpeliu ar aštriu šaukštu. Gautas skystis išsiurbiamas Pasteur pipete.
Skysčio lašą geriausia ištirti tamsiame lauke, kur aiškiai matoma ryškiai apšviestų spirochetų morfologija ir joms būdingi judesiai.
Saprofitinės spirochetos, aptinkamos ant lytinių organų ir burnos ertmėje (ant lytinių organų - Sp. refringens, burnos ertmėje - Sp. microdentium) skiriasi nuo blyškios spirochetos savo morfologija ir judesio pobūdžiu. sp. refringens yra stambesnio kūno su dideliais ritiniais, neturi judėjimo į priekį, Sp. microdentium skiriasi nuo blyškios spirochetos savo judėjimo pobūdžiu.
Taip pat galima paruošti Burri rašalo tepinėlius (žr. 51 psl.), kur juodame fone aiškiai matoma pilkšvai baltų spirochetų forma ir jų sūkuriai.
Beicuotam preparatui tirti ruošiami ploni tepinėliai: ant stiklelio uždėjus skysčio lašelį, antros stiklinės kraštu paskirstyti ant paviršiaus (kaip ruošiant tepinėlį iš kraujo lašo). Tepinėliai džiovinami ore, fiksuojami metilo alkoholyje ir dažomi 12-15 valandų pagal Romanovskį (p. 52): blyški spirocheta nusidažo rausva spalva, todėl ją galima atskirti nuo kitų mėlynuojančių saprofitinių spirochetų (žr. pav. 105).

Ryžiai. 105. Šankro išskyros blyški spirocheta. Dažymas pagal Romanovskį.

Toks ilgas preparato dažymas paaiškinamas tuo, kad blyški spirocheta blogai suvokia anilino dažus.
Antruoju sifilio periodu, kai ant odos ir gleivinių atsiranda sifilidų, iš pažeistų vietų taip pat paimamos audinių sultys ir tiriama, ar nėra spirochetų.
Praėjus 4-5 savaitėms nuo užsikrėtimo, galima atlikti serologinį tyrimą, kuris yra labiausiai paplitęs sifilio diagnostikos metodas.
Sifilio serodiagnozė pagrįsta Wasserman reakcijos ir nuosėdų reakcijų formulavimu.
Wassermano reakcija. Wassermann reakcijos technika nesiskiria nuo komplemento fiksavimo reakcijos technikos. Reikšmingas skirtumas yra antigenų paruošimo būdas, taip pat jų titravimas.
Lipoidų ekstraktai iš patologinių ar normalių audinių naudojami kaip antigenai Wasserman reakcijai. Aktyvesni yra vadinamieji specifiniai antigenai, paruošti iš sifilinių organų, dėl kurių jų titras dažniausiai siekia tūkstantąsias mililitro dalis (titras 0,007, 0,05 1 ml ir kt.). Nespecifiniai antigenai yra mažiau aktyvūs, todėl jų titras yra mažesnis ir yra mililitro šimtosiose dalyse (pavyzdžiui, titras 0,01, 0,02 1 ml).
Nustatant Wasserman reakciją, naudojami 3 antigenai (Nr. 1, 2 ir 3 kardiolipinas). Specifinis antigenas Nr. 1. Jame yra sifilinės spirochetos lipidų, gautų ekstrahuojant iš sifiliu užsikrėtusio triušio sėklidžių audinio. 2 ir 3 antigenai yra nespecifiniai ir juose yra normalių audinių lipidų (galvijų širdies raumenų alkoholiniai ekstraktai su 0,25-0,3 % cholesterolio priedu). Kardiolipino antigenas yra išgrynintas preparatas, jį reikia greitai atskiesti, o praskiedus turi būti šiek tiek opalinis, bet ne drumstas. Antigeno titras – tai kiekis, kurio turi būti 1 ml fiziologinio tirpalo ir kuris nestabdo hemolizės, kai yra hemolizinė sistema ir komplementas.
Pavyzdžiui, jei ant ampulės nurodytas 0,05 ml antigeno titras, tai reiškia, kad veikimo metu antigenas turi būti praskiestas fiziologiniu tirpalu taip, kad ml skysčio būtų 0,05 ml antigeno.

Dėl to, kad antigenai gali turėti skirtingas antikomplementines savybes, prieš Wasserman reakciją komplementas titruojamas ne tik gryna forma, bet ir esant antigenams. Kadangi Wasserman reakcija nustatoma naudojant 3 antigenus, komplementas turi būti titruojamas su kiekvienu antigenu atskirai.
Wassermano reakcijos modifikacija – Grigorjevo-Rapoporto reakcija (25 lentelė). Ši reakcija pagrįsta tiriamo serumo papildomo aktyvumo naudojimu. Reakcijai naudojamas (ne vėliau kaip per 36 valandas po gavimo) aktyvus (nekaitintas) paciento serumas. Reakcijai atlikti reikalingi antigenai, hemolizinis serumas ir defibrinuotas, neplautas avies kraujas, perfiltruotas per du sluoksnius marlės.

Reakcijos schema Grigorjevas – Rapoportas

Tais atvejais, kai serumo kontrolėje hemolizės nėra, reakcija kartojama, o į 0,2 ml tiriamojo serumo pridedama 0,2 ml akivaizdžiai aktyvaus neigiamo serumo, todėl atitinkamai mažėja įpilamo fiziologinio tirpalo tūris.
Į eksperimento rezultatus atsižvelgiama iš karto pasibaigus reakcijai, remiantis pirmųjų dviejų mėgintuvėlių, kuriuose yra antigeno, rodmenys. Teigiamas rezultatas pasižymi visišku hemolizės uždelsimu, neigiamam – visiška hemolizė. Serumo kontrolė (3-asis mėgintuvėlis be antigeno) turi turėti visišką hemolizę.

Be šių reakcijų, sifilio serodiagnostikai plačiai naudojamos nuosėdinės reakcijos, kurių esmė – inaktyvuoto paciento serumo sąveika su antigenu, dėl kurios mėgintuvėlyje nusėda nuosėdos. Iš jų labiausiai pritaikytos Kahno ir Sachso-Vitebskio reakcijos.
Kahno reakcija. Kahno reakcijai nustatyti reikalingi šie ingredientai: 1) inaktyvuotas sergančio žmogaus kraujo serumas, 2) specialus Kahno antigenas ir 3) fiziologinis tirpalas.
Kana antigenas yra lipoidų ekstraktas iš avies širdies raumens, į kurį buvo pridėta cholesterolio. Prieš eksperimentą, priklausomai nuo etiketėje nurodyto titro, antigenas skiedžiamas taip. Į vieną švarų ir sausą mėgintuvėlį pilamas antigenas, o į kitą – etiketėje nurodytas kiekis fiziologinio tirpalo (1; 1.1; 1.2). Tada fiziologinis tirpalas iš antrojo mėgintuvėlio greitai supilamas į pirmąjį mėgintuvėlį, kuriame yra antigenas (o ne atvirkščiai). Gautas mišinys maišomas, pilant iš mėgintuvėlio į mėgintuvėlį 6-8 kartus ir paliekamas 10 minučių kambario temperatūroje bręsti.
Patirties nustatymas. Šeši agliutinacijos vamzdeliai dedami į stovą. Pirmieji trys mėgintuvėliai (1, 2 ir 3) yra eksperimentiniai, kiti trys (4, 5 ir 6) yra kontroliniai (antigenų kontrolė). Atskiestas antigenas po jo subrendimo mikropipete įvedamas į 3 eksperimentinius ir 3 kontrolinius mėgintuvėlius. Mikropipetė su antigenu turi būti nuleista į sauso mėgintuvėlio dugną, neliečiant jo sienelių; taip pasiekiamas antigeno matavimo tikslumas. Į 1 mėgintuvėlį pilama 0,5 ml, į 2 - 0,025 ml, o į 3 - 0,0125 ml antigeno; tiek pat antigeno supilama atitinkamai į 3 kontrolinius mėgintuvėlius. Į visus bandomuosius mėgintuvėlius įpilama 0,15 ml tiriamojo serumo, į kontrolinius mėgintuvėlius įpilama tiek pat fiziologinio tirpalo. Stovas su mėgintuvėliais energingai kratomas 3 minutes, kad serumas susimaišytų su antigenu, ir 10 minučių įdedamas į 37° temperatūros termostatą. Ištraukus iš termostato, į pirmąjį eksperimentinį ir pirmąjį kontrolinį mėgintuvėlį įpilkite 1 ml fiziologinio tirpalo, į antrą ir trečią eksperimentinį, kontrolinį mėgintuvėlį – 0,5 ml fiziologinio tirpalo. Mėgintuvėlių turinys vėl sukratomas ir atsižvelgiama į reakcijų rezultatus (Cahno reakcijos schema pateikta 26 lentelėje).
Pastaba. Išbandžius bet kokį serumų skaičių, dedama viena antigeno kontrolė. Esant teigiamai reakcijai, dedama serumo kontrolė. Šiuo tikslu į mėgintuvėlį supilama 0,1 ml, įpilama 0,3 ml fiziologinio tirpalo ir tris minutes purtoma.
Reakcija registruojama plika akimi, naudojant padidinamąjį stiklą arba agliutinoskopą.
26 lentelė
Cahno reakcijos schema

Atsižvelgiant į reakciją plika akimi, kiekvienas mėgintuvėlis nuimamas nuo stovo ir šiek tiek pakreiptas laikomas šiek tiek aukščiau akių lygio priešais šviesos šaltinį. Dribsnių (nuosėdų) nusodinimas mėgintuvėliuose su tiriamuoju serumu rodo teigiamą Kahno reakciją ir nurodomas pliusais. Ryškiai teigiamą reakciją rodo keturi pliusai (+ + + +); jam būdingas aiškiai matomų dribsnių nusodinimas visuose mėgintuvėliuose ir šiek tiek opalinis skystis. Teigiama reakcija žymima trimis pliusais (+ + +) ir jai būdingas ne toks ryškus flokuliavimas visuose mėgintuvėliuose. Silpnai teigiama reakcija, žymima dviem pliusais (++), pasižymi silpnesniu nusėdimu ir mažų dalelių buvimu drumstame skystyje. Labai mažų suspenduotų dalelių susidarymas drumstame skystyje žymimas vienu pliusu (+). Nuosėdų ir laisvai suspenduotų dalelių nebuvimas skystyje yra neigiamos reakcijos rodiklis ir rodomas minusu (-). Kontroliniuose mėgintuvėliuose neturėtų būti dribsnių.
CITOCHOLINĖ NUODŲ REAKCIJA (27 lentelė), Zaks-Vitebsky. Šiai reakcijai būtinas inaktyvuotas tiriamasis serumas ir Zaks-Vitebsky citocholio antigenas, kuris yra lipoidų ekstraktas iš stambios širdies raumenų. galvijai prie kurių pridedama cholesterolio.
27 lentelė
Sachso citocholinės reakcijos schema - Vitebskis

Pakratykite 1 minutę ir palikite kambario temperatūroje 30 minučių
Fiziologinis tirpalas I 0,5 I 0,5 I 0,5
Jei antigene nusėda cholesterolio kristalai, jis turi būti kaitinamas vandens vonioje 55-56 ° temperatūroje arba termostate. Antigeno titras nurodytas ant ampulės. Antigenas skiedžiamas fiziologiniu tirpalu pagal nurodytą titrą, 1 ml antigeno greitai pipete įpilama į 2 ml fiziologinio tirpalo, ta pačia pipete gerai išmaišoma ir paliekama 10 minučių kambario temperatūroje brandinti.
Patirtis trijuose agliutinacijos mėgintuvėliuose. Į pirmąjį mėgintuvėlį išmatuojama 0,1 ml tiriamų išrūgų ir įpilama 0,05 ml praskiesto antigeno, į antrąjį mėgintuvėlį pilama 0,05 ml atskiesto antigeno ir 0,1 ml fiziologinio tirpalo, o 0,1 ml tiriamo serumo ir 0,05 ml. etilo alkoholis. Visi mėgintuvėliai vieną minutę purtomi ir paliekami 30 minučių kambario temperatūroje. Tada į kiekvieną iš jų įpilama 0,5 ml.
fiziologinio fiziologinio tirpalo, dar kartą suplakite ir atsižvelkite į rezultatus. Viso eksperimento metu antigeno kontrolė dedama į vieną mėgintuvėlį. Į Sachs-Vitebsky reakciją atsižvelgiama taip pat, kaip ir į Kahno reakciją.
Blyškių treponemų imobilizacijos reakcija. Šiuo metu treponemos imobilizacijos reakcija naudojama ir sifiliui diagnozuoti, kurio esmė! slypi sifiliu sergančio paciento kraujo serumo gebėjime sustabdyti spirochetų judėjimą. Šios reakcijos antigenas yra gyva treponema, gauta iš užkrėsto triušio sėklidžių audinio. Antigenas laikomas tinkamu, jei mikroskopu randama daug judrių treponemų. Likus trims savaitėms iki reakcijos, pacientas neturėtų vartoti antibiotikų ar kitų antisifilinių vaistų. Ši reakcija yra specifiškesnė ir jautresnė nei Wasserman ir nuosėdų reakcijos.

Chemoterapija. Sifiliui gydyti sėkmingai naudojami gyvsidabrio, bismuto, arseno (salvarsano, novarsenolio, miarsenolio) ir penicilino preparatai.

Bendrosios spirochetų charakteristikos.

Spirochetozės - ši grupė užkrečiamos ligos sukelia spiralinės bakterijos, kurioms būdingas bendras apsinuodijimas ir rūšių ciklinis vystymasis.

Taksonomija:

Užsakymas: Spirochaetales (iš graikų speira – garbanė, chaite – plaukai)

Šeima: Spirochaetaceae, Leptospiraceae

Gentis: Spirochaeta Leptospira

Morfologija: ilgi, ploni, spiraliai išlenkti mikroorganizmai, dydžiai 0,1-0,3x5-250 mikronų. Centrinė struktūra yra protoplazminis cilindras, kuriame yra citoplazma, nukleoidas, 70 S ribosomos ir fermentai, apsuptas citoplazminės membranos ir ląstelės sienelės. Protoplazminis cilindras turi nuolatinę spiralinę formą dėl peptidoglikano, sudarančio pirminius ritinius. Jų skaičius, tipas, žingsnis, pasvirimo kampas skiriasi skirtingi tipai. Antrinės garbanos, atsirandančios dėl viso kūno išlinkimo. Aplink spiralinį citoplazminį cilindrą išsidėsčiusi periplazminė žiogelė (flagella), kurios vienas galas pritvirtintas prie vieno iš protoplazminio cilindro polių, o kitas prie pastarojo maždaug ląstelės viduryje, žvynelių skaičius nuo 2-100 (viena pusė pritvirtinta prie vieno stulpo, o kita - prie kito). Periplazminės žvyneliai spirale apsivynioja aplink protoplazminį cilindrą, sudarydami ašinį siūlą, kurio viršuje yra daugiasluoksnė išorinė membrana (išorinis spirochetos apvalkalas); tarp jo ir cilindro yra žiogelis (periplazminis žvynelis arba endoflagelum).

Skirtumai nuo enzoflagelos:

nuolat apvyniokite ląstelės kūną;

visiškai išsidėstę ląstelės viduje;

sumažinami sukantis aplink savo ašį transliaciniu ir lenkimo būdu;

išlaikyti mobilumą santykinai didelio klampumo terpėje.

Sporos ir kapsulės nesusidaro. Esant nepalankioms sąlygoms, susilenkus į rutulį, susidaro cistos.

Tinktoriaus savybės: prastai nudažyti anime dažais, išskyrus borelijas, gramneigiamas, naudokite Morozovo sidabravimo metodą.

Kultūrinės savybės: reiklus maistinėms terpėms, būtina pridėti natūralių baltymų, angliavandenių, riebalų rūgštis. Pagal energijos kaupimo būdą išskiriami anaerobai, fakultatyviniai anaerobai, mikroaerofilai ir aerobai. Optimali leptospirų ir borelijų temperatūra yra 28-30 ?C.

Biocheminės savybės : katalazės-, ureazės-, oksidazės-neigiamas, Voiges-Proskauer reakcija "-", neredukuoja nitratų.

Atsparumas: priklauso nuo genties ir rūšies.

Vaidmuo patologijoje .

Treponema yra sifilio, yaws, pint, bejel sukėlėjai;

Borelijos– epideminė ir endeminė erkių platinama recidyvuojanti karštligė, Laimo boreliozė;

Leptospira- leptospirozė.

Bendrieji spirochetozės požymiai:

ciklinis srautas;

patogeno nustatymas kraujyje ir audiniuose;

pagrindiniai metodai mikrobiologinė diagnostika: bakterioskopinis ir serologinis.

2. Sifilio mikrobiologija.

Sifilis - lėtinė infekcinė venerinė liga, kuriai būdinga banguota eiga, besikeičiantys klinikinio ligos pasireiškimo periodai su ilgais latentiniais laikotarpiais.

Atradimų istorija.

Sifilio sukėlėją 1905 m. nustatė Shaudin ir Hoffman ir pavadino spirochete pallidum. Wassermanas kartu su Keisseriu ir Brooku pasiūlė serologinį tyrimą sifiliui diagnozuoti.

Taksonomija.

Užsisakykite Spirochaetales

Šeima: Spirochaetaceae

Gentis: Treponema

Rūšis: Treponema pallidum

Morfologija: 6-14x0,2-0,3 mikronų spiralės formos bakterijos, pirminių garbanų skaičius yra nuo 8 iki 12, esančių vienodu atstumu viena nuo kitos; trys periplazminės žvyneliai tęsiasi nuo ląstelės galų. Jie nesudaro sporų ar kapsulių, tačiau eksperimentinių gyvūnų organizme gali susintetinti mukopolisacharidinį kapsulės pavidalo apvalkalo pobūdį. Nepalankiomis sąlygomis jie gali virsti cistomis, granuliuotais ir į cistas panašiais sferiniais kūnais.

Tinktoriaus savybės: prastai nudažytas anilino dažais, gramneigiamas, pagal Romanovsky-Giemsa - šiek tiek rausvos spalvos (pallidum - blyškus), atlikite sidabravimo metodą pagal Morozovą ir neigiamą kontrastą pagal Burri, veiksmingiausias tyrimas tamsoje -lauko arba fazinio kontrasto mikroskopas.

kultūros vertybių : obligatiniai anaerobai, chemoorganoheterotrofai, optimali temperatūra 35°C, aukštesnėje nei 40°C temperatūroje jie praranda savo gyvybingumą. Labai reiklus maistinėms terpėms; būtina pridėti inkstų, smegenų audinio arba ascito skysčio. Mitybinėse terpėse išaugintos treponemos („kultūrinės“ padermės) tampa stambesnės, trumpesnės, polimorfinės, praranda imunogeniškumą ir patogeniškumą. Treponemai gerai auga neprarasdami imunogeninių ir patogeninių savybių triušių sėklidėse, viščiukų embrionuose – „audinių“ padermėse, kurios naudojamos patogenui išsėti ir tirti iš pacientų.

Biocheminės savybės : neaktyvus, skaido gliukozę, galaktozę, sacharozę, maltozę, manitolį, susidarant rūgštims; sudaryti indolą ir vandenilio sulfidą, suskystinti želatiną; sidabro nitratą sumažinti iki metalinio sidabro, kuris suteikia audiniams juodą arba tamsiai rudą spalvą.

Antigeninė struktūra : kompleksiniai, išorinės membranos baltymai (termolabilūs, griūvantys 76–80 °C temperatūroje, polisacharidai (termostabilūs); lipoproteinai, kurie yra kryžmiškai reaguojantys žmonėms ir galvijams būdingi antigenai, pvz., kardiolipino antigenas yra lipoproteinų ekstraktas iš kūno širdies bulius, naudojamas serologinėse reakcijose diagnostikoje.

patogeniškumo veiksniai :

a) toksinai:

Endotoksinas (ląstelės sienelės LPS);

b) nebuvo aptikti patogeniškumo fermentai;

c) struktūriniai ir cheminiai ląstelės komponentai:

judrumas dėl žvynelių;

adhezinai;

išorinės membranos baltymai.

Atsparumas: jautrūs aplinkos veiksniams, UV spinduliuotei, džiūvimui, aukštai temperatūrai (40°C temperatūroje 1 val. praranda patogenines savybes, 48°C temperatūroje žūva po 10 min.); dez. darbinės koncentracijos tirpalai turi žalingą poveikį; atlaikyti žemos temperatūros(iki 50 dienų šaltyje, iki 1 metų sušalus), visame kraujyje ir serume 4°C temperatūroje išlieka gyvybingi 24 valandas; jautrus sunkiųjų metalų druskoms ir antibiotikams (penicilinui, eritromicinui, karbenicilinui ir kt.)

Epidemiologija.

Infekcijos šaltinis – sergantis žmogus. Bakterijų nešiotojas sergant sifiliu neatsiranda.

Perdavimo būdas:

1) susisiekti: a) tiesiogiai; b) netiesioginis.

2) transplacentinis (nuo motinos iki naujagimio);

3) perpylimas.

Įėjimo vartai: lytinių organų gleivinės, burnos ertmė ir tt, pažeista oda.

Vaidmuo ir patologijos

Sifiliu serga tik žmonės. Eksperimentiniu būdu galite užkrėsti beždžiones, triušius, žiurkėnus. Beždžionėms susidaro kietas šankras, triušiams ir žiurkėnams – generalizuota lėtinė infekcija.

Sifilis yra cikliškai pasireiškianti lytiniu keliu plintanti žmonių liga, kurią sukelia spirochete pallidum; I stadija pasireiškia kietuoju šankru (fr. chancre- opa), II stadija - kraujagyslių sienelių pažeidimai ir įvairūs bėrimai, III - dantenos įvairūs kūnai su nervų sistemos pažeidimu. Guma (lot. . gummi- guma) - lėtinis infiltratas mazgo pavidalu, linkęs į irimą ir išopėjimą. Sifilinė guma ( sin.: sifilinė granuloma, guminis sifilis, tretinė sifiloma) yra neskausminga pusrutulio formos guma, kuri yra tretinio aktyvaus sifilio pasireiškimas. Patogenas - Blyški treponema– 1905 metais atrado F. Shaudin ir E. Hoffmann.

T. pallidum- spiralės formos mikroorganizmas, kurio matmenys 0,09 - 0,18 x 6 - 20 mikronų. Spiralės garbanų skaičius yra nuo 8 iki 12, garbanos yra vienodos, išsidėsčiusios tuo pačiu atstumu viena nuo kitos apie 1 μm, aukštis mažėja link galų. Elektroniniame mikroskope jis atrodo kaip gyvatė ar sliekas. Abiejuose treponemos galuose yra blefaroplastai su prie jų prisitvirtinusios žvyneliais, kurių skaičius svyruoja nuo dviejų iki kelių, jie suformuoja ašinį siūlą, susuktą aplink protoplazminį spirochetos cilindrą. Esant nepalankioms sąlygoms, gali susidaryti cistos. Gyvūnams gali susidaryti į kapsulę panašus mukopolisacharidinio pobūdžio apvalkalas.

Treponema blogai nusidažo anilino dažais, todėl sifilio sukėlėjas vadinamas blyškia spirocheta. Sumažina sidabro nitratą iki metalinio sidabro, kuris nusėda ant mikrobo paviršiaus ir tampa matomas audiniuose: dažant pagal Morozovą, treponemos atrodo rudos arba beveik juodos. Beicuojant pagal Romanovsky - Giemsa, jie įgauna šviesiai rausvą spalvą.

Treponemos dažniausiai dauginasi skersiniu dalijimusi, o suskilusios ląstelės tam tikrą laiką gali susijungti viena su kita. Padalinimo laikas yra apie 30 valandų.

Gyvos treponemos yra labai judrios, jos atlieka judesius aplink savo išilginę ašį, taip pat lenkimo, banginius ir transliacinius judesius.

Iki šiol nėra tokio metodo, kuriuo būtų galima nuosekliai gauti treponemos kultūras. Treponema pallidum, patogeniška žmonėms, niekada nebuvo auginama dirbtinėse maistinėse terpėse, vištienos embrionuose ar ląstelių kultūrose. Tos jų padermių atmainos, kurios auga anaerobinėmis sąlygomis, tikriausiai yra saprofitinės spirochetos, artimos sifilio sukėlėjui. Jų fiziologija tebėra mažai ištirta. Treponemos yra chemoorganotrofai, neturi katalazės ir oksidazės, gali fermentuoti angliavandenius. Jie auga labai turtingoje terpėje, kurioje yra iki 11 aminorūgščių, vitaminų, druskų ir serumo albumino. geriausiu būdu patogeninių spirochetų auginimas – tai triušio užkrėtimas sėklidėje (eksperimentinis orchitas). Buvo pasiūlyta, kad yra T. pallidum gyvavimo ciklas, įskaitant, be spiralės formos, granuliuotą stadiją ir į cistą panašių sferinių kūnų stadiją. Būtent granuliuotos šių mikroorganizmų formos gali prasiskverbti per bakterijų filtrus.

Treponemos antigenai yra menkai suprantami. Nustatyta, kad treponemoje yra baltymų, polisacharidų ir lipidų kompleksų. Kultūrinių ir audinių treponemų antigeninė sudėtis yra tokia artima, kad iš kultūrinių treponemų pagaminti antigenai gali būti naudojami CSC diagnozuojant sifilį. Žmogaus organizme treponemos skatina antikūnų, sukeliančių gyvų judrių treponemų imobilizaciją ir mirtį, gamybą, suriša komplementą esant suspensijai. T. pallidum arba susijusios spirochetos, taip pat aptinkamos netiesioginiame RIF.

Sifilio sukėlėjas nesudaro egzotoksinų. Blyškios treponemos yra gana nestabilios išoriniam poveikiui. Džiūdami jie greitai miršta ir pakilusios temperatūros(55 °C temperatūroje 15 min.). 0,3 - 0,5% HCl tirpale jie akimirksniu praranda judrumą; jie taip pat greitai jį praranda ir miršta esant arseno, bismuto ir gyvsidabrio preparatams. Visame kraujyje arba serume 4 °C temperatūroje jie išlieka gyvybingi 24 valandas, į tai reikia atsižvelgti perpilant kraują.

Epidemiologija. Sifilis yra tipiška lytiniu keliu plintanti liga. Infekcijos šaltinis – sergantis žmogus, dažniausiai užkrečiamas 3–5 metus; sergančiųjų vėlyvomis sifilio formomis nėra užkrečiami. Infekcija daugeliu atvejų atsiranda per įvairius lytinius ir buitinius kontaktus, retai per placentą nuo sergančios motinos iki vaiko (įgimtas sifilis) arba kaip profesinė infekcija kontaktuojant su medicinos personalu. Natūraliomis sąlygomis sifiliu serga tik žmogus, eksperimente galima užkrėsti beždžiones, žiurkėnus ir triušius. Beždžionėms treponemų injekcijos vietoje susidaro kietas šankras, triušiams ir žiurkėnams infekcija yra besimptomė.

Patogenezė ir klinika.Įgyto sifilio inkubacinis periodas svyruoja nuo 2 iki 10 savaičių, dažniausiai nuo 20 iki 28 dienų. įėjimo vartai infekcijos dažniausiai būna lytinių organų gleivinės, rečiau – burnos ertmė, taip pat pažeista oda. Įvedimo vietoje patogenas dauginasi, susidaro pirminė sifiloma (kietas šankras) - erozija arba opa sutankintu pagrindu. Toliau patogenas patenka Limfinė sistema išsivysto limfangitas ir regioninis limfadenitas. Tai tipiška pirminio sifilio klinika, kuri trunka 1,5 – 2 mėnesius. Tada šie ženklai išnyksta. Antrinis sifilio laikotarpis yra susijęs su proceso apibendrėjimu, kai padidėja daug limfmazgių, atsiranda bėrimų ant odos ir gleivinių; galima pastebėti vidaus organų ir nervų sistemos pažeidimus. Yra antrinis šviežias ir antrinis pasikartojantis sifilis. Su kiekvienu paskesniu atkryčiu bėrimo intensyvumas tampa ne toks ryškus, o laikotarpiai tarp atkryčių didėja. Bėrimo elementuose yra daug gyvų treponemų, šiuo laikotarpiu pacientas yra labiausiai užkrečiamas. Antrinio sifilio trukmė yra iki 4 metų ir daugiau. Toliau liga pereina į ilgą besimptomį laikotarpį, po kurio po kelerių metų išsivysto tretinis sifilis. Tuo pačiu metu pastebimi stambūs organiniai vidaus organų pažeidimai, širdies ir kraujagyslių sistemos, formuojasi centrinė nervų sistema, kaulai, dantenos, lydimas audinių irimo ir degeneraciniai pokyčiai. charakteristika klinikinis požymis sifilis – tai subjektyvių paciento nusiskundimų (skausmo, niežėjimo, deginimo ir kt.) nebuvimas.

Imunitetas. Nuo sifilio neatsiranda nei natūralus, nei dirbtinis imunitetas; yra tik infekcinis imunitetas, o kol jis egzistuoja, žmogus praktiškai nėra imlus naujai infekcijai. Infekcinis imunitetas susidaro praėjus 10–11 dienų po kietojo šanko atsiradimo (imunitetas su kietuoju šanku), per šį laikotarpį pakartotinio užsikrėtimo arba nepastebima, arba susiformavęs naujas šankas persiduoda nevaisingai (superinfekcija). Ateityje esant superinfekcijai, atsiradusių pažeidimų pobūdis atitinka ligos stadiją pakartotinio užsikrėtimo metu. Superinfekcija paaiškinama laikinu infekcinio imuniteto susilpnėjimu arba „suirimu“. Nuo superinfekcijos būtina atskirti pakartotinę užsikrėtimą, t. y. naują, pakartotinį užsikrėtimą asmeniui, kuris anksčiau sirgo sifiliu (išsigydė) ir dėl to prarado infekcinį imunitetą. Aprašyti net tris kartus susirgimo sifiliu atvejai. Tokiems ligoniams inkubacinis periodas trumpesnis, dažniau išsivysto daugybiniai opiniai šankrai su limfadenitu, anksčiau būna teigiamos serologinės reakcijos. Antriniu laikotarpiu papulės ant odos dažnai išardomos. Tai paaiškinama tuo, kad sergant sifiliu išsivysto uždelsto tipo padidėjusio jautrumo reakcija, po gydymo įjautrinti limfocitai organizme išlieka ilgą laiką. Infekcinis imunitetas yra nesterilaus pobūdžio ir atsiranda dėl humoralinių veiksnių: paciento serume randami G, A ir M klasių imunoglobulinai.

Laboratorinė diagnostika. Sifilio diagnozei optimalus yra integruotas požiūris, kai vienu metu naudojami keli metodai. Jie tradiciškai skirstomi į tiesioginius, kurie leidžia įrodyti patogeno buvimą tiriamojoje medžiagoje (gyvūnų infekcija, Skirtingos rūšys mikroskopija ir molekuliniai genetiniai metodai DNR aptikimui T. pallidum- PGR ir DNR zondavimas), ir netiesioginiai - serologiniai tyrimai antikūnams nustatyti. Savo ruožtu serologinius tyrimus sudaro netreponeminis ir treponeminis.

Bandomoji medžiaga treponemai aptikti tiesioginiais metodais yra kietojo šanko išmetimas arba jo taškas, taškas limfmazgis, rozeolės grandymas, smegenų skystis. Gimtojoje medžiagoje ligų sukėlėjas geriausiai aptinkamas tamsaus lauko (žr. 111.4 pav.) arba fazinio kontrasto mikroskopija, leidžiančia stebėti skirtingus gyvo patogeno judėjimo tipus. Jei gydymas antibiotikais jau buvo pradėtas, patogeno patologinėje medžiagoje aptikti nepavyksta. Jei reikia, atliekamas tiesioginis (arba netiesioginis) RIF arba preparatas dažomas pagal Romanovsky-Giemsa. Šie metodai naudojami tik ankstyva diagnostika sifilis.

Serologiniai tyrimai gali būti naudojami įvairiose ligos stadijose, išskyrus seronegatyvų pirminį sifilį. Paprastai naudojamas kompleksas serologinės reakcijos. Į netreponeminis testai su vizualiu rezultatų nustatymu apima: komplemento fiksavimo reakciją (Wassermano reakcija \u003d RSKk \u003d RW) su jaučio širdies raumens kardiolipino antigenu (kryžmiškai reaguojantis antigenas), mikroprecipitacijos reakciją (MR arba RMP) - mikroreakcija su plazma ir inaktyvuotu serumu; RPR – greitas plazmos atkūrimo testas ir kitos reakcijos. Ekspertai mano, kad masiniam tyrimui geriausia naudoti du testus: RPR ir RPHA arba ELISA, nes RPR yra jautresnis pirminis sifilis, RPHA – vėlesnėse ligos stadijose, o ELISA – visose stadijose. Mikroskopiškai nuskaitomi ne treponeminiai testai apima VDRL testą ir USR testą. Ne treponeminiai testai naudojami kaip atrankos testai, nes jie gali duoti klaidingai teigiamus rezultatus. AT treponeminis tyrimams naudojami treponeminės kilmės antigenai. Jie naudojami ne treponeminių tyrimų rezultatams patvirtinti (klaidingai teigiami?), esant klinikiniam, epidemiologiniam ir anamneziniam įtarimui dėl sifilio, latentinės ir vėlyvosios formos diagnostikai, retrospektyviai diagnostikai. Treponeminiai tyrimai apima: RSKt (RSK su treponeminiu antigenu), RIBT (arba RIT) - blyškios treponemos imobilizacijos reakcija, RIF (viena geriausių reakcijų), RPHA, ELISA, imunoblotavimas.

Vadovėlis susideda iš septynių dalių. Pirmoje dalyje – „Bendroji mikrobiologija“ – pateikiama informacija apie bakterijų morfologiją ir fiziologiją. Antroji dalis skirta bakterijų genetikai. Trečioje dalyje – „Biosferos mikroflora“ – nagrinėjama aplinkos mikroflora, jos vaidmuo medžiagų cikle gamtoje, taip pat žmogaus mikroflora ir jos reikšmė. Ketvirta dalis – „Infekcijos doktrina“ – skirta mikroorganizmų patogeninėms savybėms, jų vaidmeniui infekciniame procese, taip pat pateikiama informacija apie antibiotikus ir jų veikimo mechanizmus. Penktoje dalyje – „Imuniteto doktrina“ – yra šiuolaikinės idėjos apie imunitetą. Šeštoje dalyje – „Virusai ir jų sukeliamos ligos“ – pateikiama informacija apie pagrindines virusų biologines savybes ir jų sukeliamas ligas. Septintoje dalyje – „Privati ​​medicinos mikrobiologija“ – pateikiama informacija apie daugelio infekcinių ligų sukėlėjų morfologiją, fiziologiją, patogenines savybes, taip pat apie šiuolaikiniai metodai jų diagnostika, specifinė profilaktika ir gydymas.

Vadovėlis skirtas studentams, magistrantams ir aukštosios medicinos dėstytojams švietimo įstaigų, universitetai, visų specialybių mikrobiologai ir praktikai.

5-asis leidimas, pataisytas ir padidintas

Knyga:

Blyški treponema – sifilio sukėlėjas

Sifilis yra cikliškai pasireiškianti lytiniu keliu plintanti žmonių liga, kurią sukelia spirochete pallidum; I stadija pasireiškia kietuoju šankru (fr. chancre- opa), II stadija - kraujagyslių sienelių pažeidimai ir įvairūs bėrimai, III - įvairių organų dantenos su nervų sistemos pažeidimais. Guma (lot. . gummi- guma) - lėtinis infiltratas mazgo pavidalu, linkęs į irimą ir išopėjimą. Sifilinė guma ( sin.: sifilinė granuloma, guminis sifilis, tretinė sifiloma) yra neskausminga pusrutulio formos guma, kuri yra tretinio aktyvaus sifilio pasireiškimas. Patogenas - Blyški treponema– 1905 metais atrado F. Shaudin ir E. Hoffmann.

T. pallidum- spiralės formos mikroorganizmas, dydžiai 0,09 - 0,18? 6 - 20 µm. Spiralės garbanų skaičius yra nuo 8 iki 12, garbanos yra vienodos, išsidėsčiusios tuo pačiu atstumu viena nuo kitos apie 1 μm, aukštis mažėja link galų. Elektroniniame mikroskope jis atrodo kaip gyvatė ar sliekas. Abiejuose treponemos galuose yra blefaroplastai su prie jų prisitvirtinusios žvyneliais, kurių skaičius svyruoja nuo dviejų iki kelių, jie suformuoja ašinį siūlą, susuktą aplink protoplazminį spirochetos cilindrą. Esant nepalankioms sąlygoms, gali susidaryti cistos. Gyvūnams gali susidaryti į kapsulę panašus mukopolisacharidinio pobūdžio apvalkalas.

Treponema blogai nusidažo anilino dažais, todėl sifilio sukėlėjas vadinamas blyškia spirocheta. Sumažina sidabro nitratą iki metalinio sidabro, kuris nusėda ant mikrobo paviršiaus ir tampa matomas audiniuose: dažant pagal Morozovą, treponemos atrodo rudos arba beveik juodos. Beicuojant pagal Romanovsky - Giemsa, jie įgauna šviesiai rausvą spalvą.

Treponemos dažniausiai dauginasi skersiniu dalijimusi, o suskilusios ląstelės tam tikrą laiką gali susijungti viena su kita. Padalinimo laikas yra apie 30 valandų.

Gyvos treponemos yra labai judrios, jos atlieka judesius aplink savo išilginę ašį, taip pat lenkimo, banginius ir transliacinius judesius.

Iki šiol nėra tokio metodo, kuriuo būtų galima nuosekliai gauti treponemos kultūras. Treponema pallidum, patogeniška žmonėms, niekada nebuvo auginama dirbtinėse maistinėse terpėse, vištienos embrionuose ar ląstelių kultūrose. Tos jų padermių atmainos, kurios auga anaerobinėmis sąlygomis, tikriausiai yra saprofitinės spirochetos, artimos sifilio sukėlėjui. Jų fiziologija tebėra mažai ištirta. Treponemos yra chemoorganotrofai, neturi katalazės ir oksidazės, gali fermentuoti angliavandenius. Jie auga labai turtingoje terpėje, kurioje yra iki 11 aminorūgščių, vitaminų, druskų ir serumo albumino. Patogenines spirochetas geriausias būdas užkrėsti triušiu sėklidėje (eksperimentinis orchitas). Buvo pasiūlyta, kad yra T. pallidum gyvavimo ciklas, įskaitant, be spiralės formos, granuliuotą stadiją ir į cistą panašių sferinių kūnų stadiją. Būtent granuliuotos šių mikroorganizmų formos gali prasiskverbti per bakterijų filtrus.

Treponemos antigenai yra menkai suprantami. Nustatyta, kad treponemoje yra baltymų, polisacharidų ir lipidų kompleksų. Kultūrinių ir audinių treponemų antigeninė sudėtis yra tokia artima, kad iš kultūrinių treponemų pagaminti antigenai gali būti naudojami CSC diagnozuojant sifilį. Žmogaus organizme treponemos skatina antikūnų, sukeliančių gyvų judrių treponemų imobilizaciją ir mirtį, gamybą, suriša komplementą esant suspensijai. T. pallidum arba susijusios spirochetos, taip pat aptinkamos netiesioginiame RIF.

Sifilio sukėlėjas nesudaro egzotoksinų. Blyškios treponemos yra gana nestabilios išoriniam poveikiui. Džiovinami ir aukštesnėje temperatūroje (15 minučių 55 °C temperatūroje) greitai žūva. 0,3 - 0,5% HCl tirpale jie akimirksniu praranda judrumą; jie taip pat greitai jį praranda ir miršta esant arseno, bismuto ir gyvsidabrio preparatams. Visame kraujyje arba serume 4 °C temperatūroje jie išlieka gyvybingi 24 valandas, į tai reikia atsižvelgti perpilant kraują.

Epidemiologija. Sifilis yra tipiška lytiniu keliu plintanti liga. Infekcijos šaltinis – sergantis žmogus, dažniausiai užkrečiamas 3–5 metus; sergančiųjų vėlyvomis sifilio formomis nėra užkrečiami. Infekcija daugeliu atvejų atsiranda per įvairius lytinius ir buitinius kontaktus, retai per placentą nuo sergančios motinos iki vaiko (įgimtas sifilis) arba kaip profesinė infekcija kontaktuojant su medicinos personalu. Natūraliomis sąlygomis sifiliu serga tik žmogus, eksperimente galima užkrėsti beždžiones, žiurkėnus ir triušius. Beždžionėms treponemų injekcijos vietoje susidaro kietas šankras, triušiams ir žiurkėnams infekcija yra besimptomė.

Patogenezė ir klinika.Įgyto sifilio inkubacinis periodas svyruoja nuo 2 iki 10 savaičių, dažniausiai nuo 20 iki 28 dienų. Infekcijos įėjimo vartai dažniausiai yra lytinių organų gleivinės, rečiau – burnos ertmė, taip pat pažeista oda. Įvedimo vietoje patogenas dauginasi, susidaro pirminė sifiloma (kietas šankras) - erozija arba opa sutankintu pagrindu. Toliau patogenas patenka į limfinę sistemą, išsivysto limfangitas ir regioninis limfadenitas. Tai tipiška pirminio sifilio klinika, kuri trunka 1,5 – 2 mėnesius. Tada šie ženklai išnyksta. Antrinis sifilio laikotarpis yra susijęs su proceso apibendrėjimu, kai padidėja daug limfmazgių, atsiranda bėrimų ant odos ir gleivinių; galima pastebėti vidaus organų ir nervų sistemos pažeidimus. Yra antrinis šviežias ir antrinis pasikartojantis sifilis. Su kiekvienu paskesniu atkryčiu bėrimo intensyvumas tampa ne toks ryškus, o laikotarpiai tarp atkryčių didėja. Bėrimo elementuose yra daug gyvų treponemų, šiuo laikotarpiu pacientas yra labiausiai užkrečiamas. Antrinio sifilio trukmė yra iki 4 metų ir daugiau. Toliau liga pereina į ilgą besimptomį laikotarpį, po kurio po kelerių metų išsivysto tretinis sifilis. Tuo pačiu metu stebimi stambūs organiniai vidaus organų, širdies ir kraujagyslių sistemos, centrinės nervų sistemos, kaulų pažeidimai, formuojasi dantenos, lydi audinių irimas ir degeneraciniai pokyčiai. Būdingas klinikinis sifilio požymis yra subjektyvių paciento nusiskundimų (skausmo, niežėjimo, deginimo ir kt.) nebuvimas.

Imunitetas. Nuo sifilio neatsiranda nei natūralus, nei dirbtinis imunitetas; yra tik infekcinis imunitetas, o kol jis egzistuoja, žmogus praktiškai nėra imlus naujai infekcijai. Infekcinis imunitetas susidaro praėjus 10–11 dienų po kietojo šanko atsiradimo (imunitetas su kietuoju šanku), per šį laikotarpį pakartotinio užsikrėtimo arba nepastebima, arba susiformavęs naujas šankas persiduoda nevaisingai (superinfekcija). Ateityje esant superinfekcijai, atsiradusių pažeidimų pobūdis atitinka ligos stadiją pakartotinio užsikrėtimo metu. Superinfekcija paaiškinama laikinu infekcinio imuniteto susilpnėjimu arba „suirimu“. Nuo superinfekcijos būtina atskirti pakartotinę užsikrėtimą, t. y. naują, pakartotinį užsikrėtimą asmeniui, kuris anksčiau sirgo sifiliu (išsigydė) ir dėl to prarado infekcinį imunitetą. Aprašyti net tris kartus susirgimo sifiliu atvejai. Tokiems ligoniams inkubacinis periodas trumpesnis, dažniau išsivysto daugybiniai opiniai šankrai su limfadenitu, anksčiau būna teigiamos serologinės reakcijos. Antriniu laikotarpiu papulės ant odos dažnai išardomos. Tai paaiškinama tuo, kad sergant sifiliu išsivysto uždelsto tipo padidėjusio jautrumo reakcija, po gydymo įjautrinti limfocitai organizme išlieka ilgą laiką. Infekcinis imunitetas yra nesterilaus pobūdžio ir atsiranda dėl humoralinių veiksnių: paciento serume randami G, A ir M klasių imunoglobulinai.

Laboratorinė diagnostika. Sifilio diagnozei optimalus yra integruotas požiūris, kai vienu metu naudojami keli metodai. Jie tradiciškai skirstomi į tiesioginius, kurie leidžia įrodyti patogeno buvimą tiriamojoje medžiagoje (gyvūnų infekcija, įvairių tipų mikroskopija ir molekuliniai genetiniai DNR aptikimo metodai). T. pallidum- PGR ir DNR zondavimas), ir netiesioginiai - serologiniai tyrimai antikūnams nustatyti. Savo ruožtu serologinius tyrimus sudaro netreponeminis ir treponeminis.

Tirta medžiaga treponemai aptikti tiesioginiais metodais yra kietojo šanko ar jo taškinio išmetimas, limfmazgio taškas, rozeolės įbrėžimas, smegenų skystis. Gimtojoje medžiagoje ligų sukėlėjas geriausiai aptinkamas tamsaus lauko (žr. 111.4 pav.) arba fazinio kontrasto mikroskopija, leidžiančia stebėti skirtingus gyvo patogeno judėjimo tipus. Jei gydymas antibiotikais jau buvo pradėtas, patogeno patologinėje medžiagoje aptikti nepavyksta. Jei reikia, atliekamas tiesioginis (arba netiesioginis) RIF arba preparatas dažomas pagal Romanovsky-Giemsa. Šie metodai naudojami tik ankstyvai sifilio diagnostikai.

Serologiniai tyrimai gali būti naudojami įvairiose ligos stadijose, išskyrus seronegatyvų pirminį sifilį. Paprastai naudojamas serologinių reakcijų kompleksas. Į netreponeminis testai su vizualiu rezultatų nustatymu apima: komplemento fiksavimo reakciją (Wassermano reakcija \u003d RSKk \u003d RW) su jaučio širdies raumens kardiolipino antigenu (kryžmiškai reaguojantis antigenas), mikroprecipitacijos reakciją (MR arba RMP) - mikroreakcija su plazma ir inaktyvuotu serumu; RPR – greitas plazmos atkūrimo testas ir kitos reakcijos. Specialistai mano, kad masiniam tyrimui geriausia naudoti du tyrimus: RPR ir RPHA arba ELISA, nes esant pirminiam sifiliui RPR yra jautresnis, RPHA – vėlesnėse ligos stadijose, o ELISA – visose stadijose. Mikroskopiškai nuskaitomi ne treponeminiai testai apima VDRL testą ir USR testą. Ne treponeminiai testai naudojami kaip atrankos testai, nes jie gali duoti klaidingai teigiamus rezultatus. AT treponeminis tyrimams naudojami treponeminės kilmės antigenai. Jie naudojami ne treponeminių tyrimų rezultatams patvirtinti (klaidingai teigiami?), esant klinikiniam, epidemiologiniam ir anamneziniam įtarimui dėl sifilio, latentinės ir vėlyvosios formos diagnostikai, retrospektyviai diagnostikai. Treponeminiai tyrimai apima: RSKt (RSK su treponeminiu antigenu), RIBT (arba RIT) - blyškios treponemos imobilizacijos reakcija, RIF (viena geriausių reakcijų), RPHA, ELISA, imunoblotavimas.

Specifinė profilaktika ir gydymas. Specifinė profilaktika nebuvo sukurta. Nespecifinė profilaktika apima susilaikymą nuo atsitiktinių lytinių santykių, ankstyvą pacientų nustatymą, ypač su paslėpta forma ligų, o jų laiku ir efektyvus gydymas. Sifiliui gydyti naudojami antibiotikai: penicilinas ir jo dariniai (vandenyje tirpios ir durantinės formos), kartais eritromicinas. Taip pat naudojami bismuto, arseno, gyvsidabrio preparatai.