Brojanje retikulocita u razmazu nakon bojenja posebnim bojama

Princip metode: Detekcija granularno-mrežaste supstance retikulocita tijekom supravitalnog bojenja alkalnim bojama s njihovim daljnjim brojanjem u krvnom razmazu.

Može se koristiti jedna od sljedećih boja: Azura otopina I; Azura otopina II;

Tijek određivanja: Bojanje se provodi na staklu ili u epruveti.

Bojanje retikulocita in vitro s Azur II

Stavite 0,05 ml otopine boje azure II i 0,2 ml krvi u epruvetu. Smjesa se temeljito izmiješa i ostavi 20 - 30 minuta. Ponovo promiješajte i pripremite tanke razmaze.

Bojanje retikulocita in vitro s azurom I

U epruvetu staviti 0,3 - 0,5 ml otopine azurne I boje i 5 - 6 kapi krvi pipetom iz aparata Panchenkov. Epruveta se zatvori gumenim čepom, smjesa se temeljito, ali lagano promiješa i ostavi 1-1,5 sati (retikulociti se bolje boje s izlaganjem od 1,5-3 sata). Pomiješajte i pripremite tanke poteze.

Pripremljeni razmazi se mikroskopiraju imerzijskom lećom. U razmazu, retikulociti i eritrociti obojeni su žućkasto-zelenkasto, zrnasto-filamentozna tvar u retikulocitima je plava (kada je obojena azurno II) ili plavkasto-ljubičasta (kada je obojena azurno I).

Retikulociti su važan pokazatelj regenerativne sposobnosti koštana srž. Njihovo povećanje u perifernoj krvi (retikulocitoza) primjećuje se kod hemolitičke anemije, kod hemolitičkih kriza, kod akutnog gubitka krvi, malarije i kod liječenja željezom. anemija uzrokovana nedostatkom željeza, s akutnim nedostatkom kisika. Dostupnost povećan iznos retikulociti omogućuju sumnju na okultno krvarenje (na primjer, u bolesnika s trbušnim tifusom, peptički ulkus).

Smanjenje broja ili odsutnost retikulocita (retikulocitopenija) opaža se kod regenerativnih aplastičnih i hipoplastičnih anemija; anemija uzrokovana nedostatkom željeza, vitamina B12, folna kiselina; s metastazama raka u kosti; bolest zračenja; radioterapija; liječenje citostaticima.

Tehnika Rivalta testa.

Rivalta test je biokemijski test za razlikovanje transudata i eksudata.

Tehnika je sljedeća: Eksudati sadrže seromucin (spoj globulinske prirode), koji daje pozitivan uzorak(denaturacija) sa slabo rješenje octena kiselina. U cilindar se ulije 100-150 ml destilirane vode, zakiseli se s 2-3 kapi ledene octene kiseline i dokapa se ispitna tekućina. Kap eksudata koja pada stvara zamućenje u obliku bijelog oblaka koji se spušta na dno posude. Kap transudata ne stvara zamućenje, ili je beznačajno i brzo se otapa. Unatoč tim razlikama između eksudata i transudata, u praksi ih nije uvijek lako razlikovati, budući da se ponekad mora raditi s nizom prijelaznih tekućina, kao i eksudatima, koji su bliski transudatima u smislu sadržaja proteina i relativnog gustoća.

Recenzije objavljene na ovoj stranici osobna su mišljenja osoba koje su ih napisale. Ne bavite se samoliječenjem!

Retikulociti (klinički značaj i laboratorijska dijagnoza)

(1) retikulociti koji imaju jezgru (eritronormoblasti), a njihova granularnost se nalazi u obliku gustog vjenčića oko jezgre;

(2) retikulociti koji imaju granularno-mrežastu tvar u obliku lopte ili grudice;

(3) retikulociti, koji imaju granularnost u obliku guste mreže;

(4) retikulociti, koji imaju granularno-mrežastu tvar u obliku pojedinačnih niti;

(5) retikulociti koji sadrže pojedinačne granule.

S hemolitičkom anemijom (broj retikulocita može doseći do 60% ili više (osobito se povećava tijekom hemolitičke krize);

U slučaju akutnog gubitka krvi (3.-5. dan nakon gubitka krvi dolazi do retikulocitne krize), uključujući porast retikulocita, moguće je posumnjati na skriveno krvarenje (npr. kod bolesnika s peptičkim ulkusom). gastrointestinalni trakt, trbušni tifus);

U liječenju anemije uzrokovane nedostatkom željeza željezom (nekoliko dana (3 - 10) nakon početka antianemijskog liječenja perniciozne anemije);

S akutnim nedostatkom kisika;

S metastazama tumora u koštanoj srži.

abnormalni oblik hemoglobina;

S regenerativnim aplastičnim i hipoplastičnim anemijama;

S anemijom uzrokovanom nedostatkom željeza, vitamina B12, folne kiseline (mikrocitno-hipokromna i megaloblastična anemija);

S sideroblastičnom anemijom;

S metastazama raka u kosti;

Uz bolest zračenja i terapiju zračenjem;

U liječenju citostaticima;

S autoimunim bolestima hematopoetskog sustava;

S bolestima bubrega;

S recidivom Addison-Birmerove anemije;

Pogrešan izbor antikoagulansa ili nedovoljno miješanje krvi s antikoagulansom;

Dugotrajno stiskanje ruke s podvezom;

Prijem sulfonamida (mogući su i podcijenjeni i precijenjeni rezultati);

Transfuzija krvi neposredno prije studije;

Hemoliza uzorka krvi.

Procjena aktivnosti eritropoeze u stanjima praćenim hemolizom ili gubitkom krvi;

Procjena sposobnosti regeneracije koštane srži nakon citotoksične terapije i transplantacije koštane srži;

Procjena obnove sinteze eritropoetina nakon transplantacije bubrega;

Doping kontrola kod sportaša (uzimanje eritropoetina);

Dijagnoza neučinkovite hematopoeze ili smanjene proizvodnje crvenih krvnih stanica;

Diferencijalna dijagnoza anemije;

Otkrivanje kršenja regenerativne sposobnosti koštane srži s nedostatkom željeza, vitamina B12, B6, folata, bakra i praćenje odgovarajuće terapije;

Procjena odgovora na terapiju eritropoetinom, eritrosupresorima.

Retikulociti s niskim sadržajem RNA, najzreliji (LFR%, frakcije retikulocita s niskom fluorescencijom, frakcije retikulocita s niskom fluorescencijom);

Retikulociti s prosječnim sadržajem RNA (MFR%, frakcije retikulocita srednje fluorescencije) - frakcija retikulocita srednje fluorescencije);

Retikulociti s visokim sadržajem RNA (HFR%, frakcije retikulocita visoke fluorescencije) - frakcija retikulocita s visokom fluorescencijom);

Frakcija nezrelih retikulocita (IRF%, frakcija nezrelih retikulocita).

Brojanje retikulocita u razmazu nakon bojenja posebnim bojama

Brojanje retikulocita u razmazu nakon bojanja posebnim bojama u praksi je najčešće korištena metoda za brojanje retikulocita. To je zbog činjenice da je metoda jednostavna, relativno jeftina i ne zahtijeva posebnu skupu opremu, te se stoga može koristiti u bilo kojem kliničkom dijagnostičkom laboratoriju.

Princip metode

Identifikacija granularno-mrežaste supstance retikulocita supravitalnim bojanjem alkalnim bojama uz njihovo daljnje brojanje u krvnom razmazu.

Reagensi

Možete koristiti jednu od sljedećih boja:

  1. Zasićena otopina briljantnog krezil plavog u apsolutnom alkoholu (za pripremu apsolutnog alkohola potrebno je izdržati 96% etanol u nekoliko izmjena kalciniranog praha bakrenog sulfata). Na 100 ml apsolutnog alkohola uzima se 1,2 g boje.
  2. Otopina Azur I: Azur I - 1 g, amonijev oksalat - 0,4 g, natrijev klorid - 0,8 g, etanol 96% - 10 ml, destilirana voda - 90 ml. Otopina boje u zatvorenoj boci stavlja se 2-3 dana u termostat na 37 °C i povremeno se snažno protrese. Zatim se ohladi na sobnu temperaturu i filtrira kroz filter papir. Otopina se čuva u posudi od tamnog stakla. Ako se pojavi talog, boju treba ponovno filtrirati.
  3. Otopina Azure II: Azur II - 1 g, natrijev citrat - 5 g, natrijev klorid - 0,4 g, destilirana voda - 45 ml. Otopina se ostavi u termostatu na 37 °C 2 dana, uz povremeno miješanje. Kako bi se ubrzalo otapanje, boja se može zagrijavati na laganoj vatri 15 do 20 minuta, bez dovođenja do vrenja. Ohladiti na sobnu temperaturu i filtrirati. Čuvati u tamnoj staklenoj posudi.

Posebna oprema

Napredak definicije

Bojanje retikulocita provodi se ili na staklu ili u epruveti.

Bojanje retikulocita na staklu

Kod bojenja retikulocita na staklu, dobro oprano i odmašćeno predmetno staklo zagrijava se na plamenu plamenika. Na staklo se staklenim štapićem nanese kap jednog od gore navedenih bojila i brušenim staklom se pripremi mrlja boje. Staklografom se označava strana stakla na koju se nanosi mrlja boje. U ovom obliku staklo se može pripremiti za buduću upotrebu i čuvati na suhom i tamnom mjestu. Prije analize priprema se vlažna komora. Obično se u tu svrhu koristi Petrijeva zdjelica s kolutima navlažene vate ili filter papira položenim uz rubove. Kap krvi se nanese na mrlju boje, od toga se pripremi tanak premaz i odmah stavi u vlažnu komoru na 3-10 minuta. Razmazi se zatim suše na zraku.

Bojanje retikulocita in vitro

Bojanje retikulocita in vitro razlikuje se pri korištenju različitih boja.

Metoda 1 - bojenje retikulocita in vitro s briljantnim krezil plavim.

Prije upotrebe u epruveti pripremite radnu otopinu briljantnog krezil plavog na bazi kapi 1% otopine kalijevog oksalata 4 kapi otopine briljantnog krezil plavog. U boju se doda 0,04 ml krvi (dvije pipete do oznake 0,02). Smjesa se temeljito, ali lagano promiješa i ostavi 30 minuta. Zatim ponovno promiješajte i pripremite tanke namazeve.

Metoda 2 - bojenje retikulocita in vitro s azurom II.

Stavite 0,05 ml otopine boje azure II i 0,2 ml krvi u epruvetu. Smjesa se temeljito izmiješa i ostavi 20 - 30 minuta. Ponovo promiješajte i pripremite tanke razmaze.

Metoda 3 - bojenje retikulocita in vitro s azurom I.

U epruvetu staviti 0,3 - 0,5 ml otopine azurne I boje i 5 - 6 kapi krvi pipetom iz aparata Panchenkov. Epruveta se zatvori gumenim čepom, smjesa se temeljito, ali lagano promiješa i ostavi 1-1,5 sati (retikulociti se bolje boje s izlaganjem od 1,5-3 sata). Pomiješajte i pripremite tanke poteze.

Trenutno su komercijalno dostupne gotove boje za retikulocite. Bojanje retikulocita uz njihovu pomoć provodi se prema priloženim uputama.

Broj retikulocita.

Razmazi pripremljeni jednom od gore navedenih metoda mikroskopiraju se imerzijskom lećom. U razmazu su retikulociti i eritrociti obojeni žućkasto-zelenkasto, zrnasto-filamentna tvar u retikulocitima je plava (kada se boje azurno II i briljantnim krezil plavim) ili plavkasto-ljubičasta (kada se boje azurno I).

Fotografije retikulocita:

Pronađite vidna polja gdje se eritrociti nalaze zasebno. U tim vidnim poljima potrebno je izbrojati najmanje 1000 eritrocita i među njima zabilježiti broj eritrocita koji sadrže zrnasto-nitastu tvar. Veća točnost se postiže kada se broji 2000 - 3000 eritrocita.

Zbog činjenice da je vidno polje veliki broj eritrocita, što otežava brojanje, potrebno je ograničiti (smanjiti) vidno polje. Da biste to učinili, možete koristiti ili poseban okular, u kojem možete smanjiti vidno polje na potrebnu veličinu, ili koristiti poseban "prozor" (krug promjera nešto manjeg od okulara izrezan je iz papira, u središtu kruga izreže se mali romb i dobiveni prozor umetne u okular).

Broj izbrojanih retikulocita izražava se na 100 (u postocima) ili na 1000 (u ppm) eritrocita.

Primjer: Kada se broji 1000 eritrocita u razmazu, otkriveno je da 15 eritrocita od 1000 ima granularnu mrežastu tvar jednog ili drugog stupnja, to jest, to su retikulociti. Dakle, broj retikulocita u ovom slučaju iznosi 1,5% ili 15‰.

Književnost:

Brojanje retikulocita pomoću fluorescentne mikroskopije

Metoda brojanja retikulocita pomoću fluorescentne mikroskopije jednostavna je i zahtijeva malo vremena, točnija je od konvencionalne metode, budući da fluorescentna mikroskopija otkriva najsitnija zrnca mrežasto-nitaste tvari.

Retikulociti

Retikulociti su mlade crvene krvne stanice nastale nakon gubitka jezgre od strane normoblasta. karakteristična značajka retikulocita je prisutnost u njihovoj citoplazmi granularno-filamentne tvari (retikulum), koja predstavlja agregirane ribosome i mitohondrije.

Patološke inkluzije u eritrocitima

Jollyjeva tjelešca (Howell-Jollyjeva tjelešca) su male okrugle ljubičasto-crvene inkluzije veličine µm, koje se nalaze 1 (rjeđe 2-3) u jednom eritrocitu. Oni su ostaci jezgre nakon uklanjanja njezinih RES. Otkrivaju se s intenzivnom hemolizom i "preopterećenjem" RES-a, nakon splenektomije, s megaloblastičnom anemijom.

Citokemijska studija lipida

Citokemijsko istraživanje lipida temelji se na upotrebi boja koje se otapaju u mastima (Sudan III, Sudan IV, crni Sudan itd.). Za identifikaciju neutralne masti koristi se Sudan III, koji oboji mast u narančasto. Lipoidi se bolje detektiraju sudanskim crnim (crno bojenje).

Analiza urina prema Nechiporenko

Nechiporenko metoda u domaćem laboratorijska dijagnostika je najčešća metoda kvantifikacije oblikovani elementi u mokraći. Ova metoda je najjednostavnija, dostupna svakom laboratoriju i prikladna u ambulantnoj praksi, a također ima niz prednosti u odnosu na druge poznate kvantitativne metode za proučavanje sedimenta urina. Prema metodi Nechiporenko, broj formiranih elemenata (eritrocita, leukocita i cilindara) određuje se u 1 ml urina.

©18 Laboratorijska dijagnostika

Retikulociti - što je to u testu krvi? Pokazatelji norme i oznaka

Retikulocit je prekursor eritrocita, odnosno eritrocit u mladom obliku. U krvi zdrave osobe njihov sadržaj je 0,2-1,2%. Ovaj omjer odražava sadržaj retikulocita u krvi u odnosu na eritrocite. Sazrijevaju 4-5 dana.

Osnovni koncepti

Karakteristična značajka mladih oblika eritrocita je da je u citoplazmi prisutna zrnasto-filamentna tvar, koja je agregirani ribosom i mitohondrij. Ova se tvar može otkriti posebnom metodom bojenja krvnih razmaza. Ovo bojenje retikulocita naziva se supravitalno, odnosno proizvodi se bez prethodne fiksacije stanica.

Skupine retikulocita

Ukupno, stručnjaci razlikuju pet glavnih skupina retikulocita. Razlikuju se po retikularnom retikulumu. Njegova gustoća i starost su u obrnutom odnosu: što su mreže deblje, to su mlađe. Hajde da shvatimo koji je najmlađi retikulocit.

Ovo je ćelija koja ima mrežicu u obliku guste lopte. Ove stanice pripadaju prvoj skupini. Retikulociti zrelijeg oblika pojavljuju se kao tvar koja ima jasno prepoznatljivu mrežicu. U četvrtoj i petoj skupini zastupljena je pojedinačnim nitima i zrnima. Najčešće u krvi zdravi ljudi sadrži retikulocite posljednjih skupina, odnosno zrelije. U pravilu, oni čine oko 80% ostatka. Uz pojačanu regeneraciju, koja je karakteristična za neke patologije, povećava se broj retikulocita prve tri skupine. Ove patologije uključuju:

Retikulocitna kriza koja prati anemiju nedostatka B12.

Funkcije koje obavljaju retikulociti

Retikulocit je također eritrocit. Karakterizira ga ista funkcija kao i eritrociti. Odnosno, stanice također prenose molekule kisika u različita tkiva i organe, ali učinkovitost ovaj proces znatno niži nego kad kisik prenose zreli eritrociti. Retikulociti mogu adsorbirati molekule željeza sadržane u hemoglobinu. To je moguće zahvaljujući receptorima koji su osjetljivi na transferin. Zašto se radi brojanje retikulocita? Više o ovome kasnije.

Mehanizam uzorkovanja krvi

Za određivanje ovog pokazatelja uzima se uzorak krvi u sklopu opće analize. Ako postoji potreba za određivanjem razine retikulocita, tada liječnik koji je propisao analizu ukazuje na potrebu dodatnog brojanja.

Ova analiza ne zahtijeva posebnu pripremu, već se tradicionalno uzima ujutro na prazan želudac. U isto vrijeme, ako postoji potreba, tada se može predati u bilo koje doba dana. Krv za analizu treba uzeti iz prsta, njegova studija se provodi u laboratoriju, na hematološkom odjelu.

Brojanje retikulocita provodi se u supravitalno obojenom razmazu. Koristi se mikroskopska metoda, odnosno jednostavno se broji njihov broj stavljanjem uzorka krvi pod mikroskop. Do danas postoji hardverska metoda brojanja. Koriste ga moderni laboratoriji.

Oznaka retikulocita u testu krvi je RET.

Provođenje analize

Postoji nekoliko metoda za provođenje takve studije:

  • Staklo se pere, suši i zagrijava posebnim plamenikom. Zatim se na njega nanese jedna od tri boje, zatim se doda kap krvi, nakon čega se napravi tanak razmaz. Staklo se stavlja u Petrijevu zdjelicu ili drugu komoru na određeno vrijeme, zatim se suši svježi zrak.
  • Ako se koristi epruveta, tada se u nju stavi tvar za bojanje i tamo se doda kap krvi. Smjesa se mora miješati. Vrijeme čekanja - od 20 minuta do 3 sata, ovisno o tome koji se reagens koristi. Zatim ponovno promiješajte tekućinu koja se nalazi u epruveti, iz nje se uzimaju razmazi.

Koja metoda određuje više točne rezultate, Teško je reći. Oboje su dobri na svoj način, ali liječnik može smatrati potrebnim provesti analizu na određeni način, tada je mora uputiti u smjeru.

Indikatori

Pri izračunavanju razine retikulocita, spolne razlike u normi bitne su tek nakon 12 godina. Do ove dobi, norma kod djece oba spola je ista. Otprilike u dobi od godinu dana djevojčice počinju imati menstruaciju, koja je redovita. Kao rezultat mjesečnog gubitka krvi, širi se raspon fluktuacija u eritroidnim stanicama.

1. U novorođenčadi norma je u rasponu od 0,15 do 1,5%.

2. U djece u dobi od dva tjedna - od 0,45 do 2,0%.

3. U djece od jednog do dva mjeseca - od 0,25 do 0,95%.

4. U djece od šest mjeseci - od 0,2 do 1,0%.

5. U djece od dvije do šest godina - od 0,25 do 0,75%.

6. U djece u dobi od šest do dvanaest godina - od 0,25 do 1,3%.

7. Kod muškaraca starijih od dvanaest godina - od 0,25 do 1,7%.

8. U žena starijih od dvanaest godina - od 0,12 do 2,1%.

Što znači situacija kada su retikulociti povećani?

Povećanje broja retikulocita u krvi

Uz anemiju različitih etimologija, određivanje broja retikulocita igra posebnu ulogu. Ako je njihov sadržaj povećan u krvi, tada se ova patologija naziva retikulocitoza. Ako je povećanje popraćeno povećanjem razine hemoglobina, to znači da koštana srž ima dobru regenerativnu sposobnost. To se može dogoditi ako su prisutni sljedeći čimbenici:

Hemolitička anemija različite etimologije. To je niz bolesti koje karakteriziraju uništavanje crvenih krvnih stanica. Ova pojava se naziva hemoliza. U ovom slučaju sadržaj retikulocita u krvi može doseći 60%. Ako dođe do hemolitičke krize, ova se brojka može pogoršati.

Otrovanje hemotoksinom koje uzrokuje hemolizu. Hemotoksini uključuju otrov zmija i neke lijekove koji se koriste za liječenje eritremije. Toksini malarije također mogu izazvati hemolizu.

Terapija levodopom za Parkinsonovu bolest.

Dugotrajna uporaba određenih protuupalnih i antipiretičkih lijekova.

Terapija droga"Eritropoetin" anemičnih bolesti.

Metastaze u koštanoj srži.

Razdoblje oporavka nakon zračenja ili kemijske terapije.

Retikulocitoza može biti lažna i istinita.

Zašto uzeti test retikulocita? Ovo se pitanje često postavlja.

Lažna i prava retikulocitoza

Pravu retikulocitozu karakterizira povećanje broja mladih retikulocita u krvi, što je popraćeno povećanjem njihovog broja u koštanoj srži.

Lažnu retikulocitozu karakterizira povećanje broja retikulocita isključivo u perifernoj krvi, dok u koštanoj srži njihova razina ostaje normalna ili blago smanjena.

Snižene stope

Uočava se proces smanjenja broja retikulocita uz inhibiciju eritropoeze. Nastaje kao posljedica sljedećih čimbenika:

Dugotrajna primjena sulfonamida.

Uzimanje određenih lijekova, poput kloramfenikola ili karbamazepina.

Kronične zarazne bolesti.

Neke teške bolesti bubrega koje utječu na eritropoezu.

Miksedem ili druga disfunkcija štitnjače.

Tumori u koštanoj srži.

Ispitali smo što je retikulocit. Ovo je mlado crveno krvno zrnce u ljudskoj krvi.

Razlozi povećanja retikulocita, kako odrediti funkcionalnost hematopoetskog sustava?

Ponekad, kada se propisuje klinički pregled, opći test krvi može zasebno označiti RTC ili RET - kratice koje pokazuju sadržaj retikulocita. One su stanice bez jezgre koje prethode eritrocitima (crvenim krvnim zrncima) tijekom njihova nastanka. Retikulociti u nalazu krvi, njihov broj i omjer s eritrocitima odražavaju stanje i reproduktivnu funkciju koštane srži, kao i cijelog hematopoetskog sustava.

Liječnička potvrda

Na taj način moguće je detaljno utvrditi što su retikulociti: to su stanice okruglog ili zvjezdastog oblika koje nastaju u koštanoj srži i pod utjecajem glikoproteinskog hormona eritropoetina pretvaraju se u crvene krvne stanice.

Boja retikulocita je obično ružičasta s plavom bojom. Ih razlikovna značajka iz kasnijeg oblika, postoji prisutnost u strukturi rezidualne RNA, mitohondrija i drugih organela koji izgledaju kao granularne i filamentozne formacije, čiji gubitak ukazuje na transformaciju u zrelu stanicu.

Funkcionalne dužnosti retikulocita podudaraju se s onima eritrocita - prijenos kisika, ali s mnogo manjom učinkovitošću zbog niskog sadržaja hemoglobina u njima. Uglavnom su koncentrirani u crvenoj koštanoj srži, ravnoj i cjevaste kosti, a samo zrele crvene stanice ulaze u krvotok. Ali mali dio nezrelih retikulocita također je dopušten u perifernom krvotoku, što ukazuje na aktivaciju procesa proizvodnje eritrocita (eritropoeze).

Proces stvaranja krvi

Eritropoeza počinje transformacijom eritroblasta, stanice koja sadrži jezgru, ali ne i hemoglobin, u pronormblast. Nadalje, u eritroidnoj seriji nastaje bazofilni eritroblast, koji već ima preduvjete za hemoglobinizaciju.

Kako eritrociti predaka nakupljaju tvar koja zadržava kisik (hemoglobin), stanica prolazi kroz stadije polikromatofilnog, a zatim oksifilnog normoblasta. Tijekom tog razdoblja jezgra je još uvijek očuvana, čija involucija dovodi do stvaranja izravno mladog eritrocita - retikulocita, koji već ima sposobnost zadržavanja i prijenosa kisika i ugljičnog dioksida.

Mlade crvene krvne stanice ostaju na mjestu svog nastanka do 40 sati, nakon čega manji dio njih pod utjecajem eritropoetina ulazi u krvne žile, gdje se slobodno kreće 1,5 ili 2 dana. Za to vrijeme stanica gubi retikulum (rezidualne nitaste tvorevine) i pretvara se u eritrocit.

Faze razvoja retikulocita

U krvi, retikulociti prolaze kroz pet faza sazrijevanja dok se retikulum involuira:

  1. nulta faza - kada bazofilna tvar (mrežasta intracelularna tvar) ima oblik jezgre, odnosno nakupljanje granularnosti izgleda kao neka vrsta vijenca;
  2. prva faza - bazofilna tvar (BS) dobiva mrežastu strukturu u obliku lopte;
  3. druga faza - zrnata mreža je ravnomjerno raspoređena po stanici;
  4. treća faza - BV izgleda kao zasebne niti;
  5. četvrti stupanj – BV je raspoređen u obliku sitnih zrnaca duž periferije stanice.

NA zdravo tijelo retikulocita u krvotok treba pojaviti samo III i IV faze sazrijevanja (80 posto), a 0 - II - u pojedinačnim primjercima. Ali prekomjerna smrt crvenih krvnih stanica ili gladovanje kisikom potiču povećanu proizvodnju eritropoetina u bubrezima, što dovodi do otpuštanja nezrelih stanica svih stadija, pa čak i normoblasta u krvne žile.

Test krvi za retikulocite

Brojanje retikulocita u krvnom razmazu nije potrebno. hematološki pregled, ali se odnosi na opću kliničku analizu. Tek kada se pojave određene sumnje, liječnik daje posebnu oznaku u analizi.

Razlozi za studiju

Razlozi za određivanje količine RTC u krvi su provjera rada koštane srži i bubrega u proizvodnji krvnih stanica i eritropoetina u takvim slučajevima:

  • sa sumnjom na anemiju različitog podrijetla;
  • ako je potrebno, kontrola terapije lijekovima za nedostatak željeza, vitamina B12 i folne kiseline;
  • za praćenje pri uzimanju lijekova koji sadrže eritropoetin, eritrosupresori;
  • s teškim vanjskim krvarenjem ili sumnjom na unutarnje;
  • zbog potrebe uzimanja lijekova koji neutraliziraju toksine kao rezultat ugriza otrovnih insekata ili zmija;
  • za kontrolu proizvodnje crvenih krvnih stanica tijekom transplantacije koštane srži ili bubrega;
  • za definiciju raka.

Posljednja točka povezana je s značajkama metastaza nekih kancerogenih tumora u krvotvorne organe.

Metoda otkrivanja

Ako je jezgra izgubljena, na krvne stanice mogu se primijeniti samo kisele boje. Bojenjem u krvnom razmazu indiciraju se elementi eritroidne serije koji se zatim otkrivaju svjetlosnim mikroskopom. Za izolaciju retikulocita iz ukupne mase eritrocita potrebno je koristiti posebne pripravke koji mijenjaju boju granularne strukture stanica.

Sam proces detekcije sastoji se u miješanju krvne plazme s briljantnom krezil plavom ili akridin narančastom bojom in vitro (in vitro) ili na staklu u omjeru: 1 dio krvi na 10 dijelova tvari.

Metode na staklu i in vitro su bitno različite. U prvom slučaju, miješani razmazi krvi s bojom uranjaju se u vlažnu okolinu 10 minuta, nakon čega se suše i stanice se broje pod mikroskopom. U drugoj varijanti sastav umiješan u epruveti ostavlja se do 3 sata, zatim se ponovno miješa, razmazuje i broji.

Kada zvjezdaste stanice retikulocita postanu vidljive, te se utvrdi stupanj njihove zrelosti (prema strukturi obojenog BV), mogu se dobiti podaci o stanju koštane srži.

Dopušteni pokazatelji

Normalna razina retikulocita odgovara procesu stvaranja krvi u zdravom tijelu. Za organiziranje podataka koristi se posebna tablica u kojoj su normalni rasponi razvrstani prema dobi i spolu osobe.

Norma retikulocita u krvi kod djece

Norma retikulocita kod djece varira ovisno o specifičnom razdoblju formiranja hematopoetskog sustava. Dakle, kod novorođenčadi do 14 dana prihvatljiva stopa je od 0,15 do 1,5 posto u odnosu na crvene krvne stanice. Normalne vrijednosti za bebe do dva mjeseca su od 0,45 do 2,1 posto, a do šest mjeseci - 0,25 - 0,9 posto. Kod djeteta od šest mjeseci do godinu dana zdravim se smatraju vrijednosti od 0,2 do 1 posto, a stabiliziraju se do šeste godine. Dalje, raspon se sužava: od 7 do 12 godina kreće se od 0,2 do 1,3 posto.

Retikulociti u krvi kod odraslih

Daljnji dopušteni sadržaj retikulocita u krvi više ovisi o spolu djeteta nego o dobi i odgovara pokazateljima za odrasle. Ima veze s početkom menstrualnog ciklusa kod djevojčica, što podrazumijeva mjesečni gubitak krvi i, sukladno tome, povećanje proizvodnje krvnih stanica u tom razdoblju. Normativni pokazatelji:

  • prihvatljiva razina mladih crvenih krvnih zrnaca u krvi žena i mladih djevojaka od 13 godina bit će od 0,12 do 2,05 posto (od 1,2 do 20 ppm);
  • broj retikulocita u muškaraca normalno se kreće od 0,24 do 1,7 posto ukupne eritroidne mase.

Dakle, kod odrasle osobe uspostavlja se konstantan raspon dopuštene koncentracije mladih krvnih stanica koje sadrže zrnastu mrežastu tvar. Istodobno, povećani rekulociti ili retikulocitna kriza ukazuju na određene poremećaje u funkcioniranju hematopoetskog sustava.

Povećanje retikulocita

Povišeni retikulociti (ili inače retikulocitoza) mogu biti pozitivni i negativni za subjekta. Povećani broj nezrelih krvnih stanica javlja se u slučajevima:

  • S pozitivnim rezultatima terapije pripravcima koji sadrže željezo, vitaminom B12 i folnom kiselinom, koji se obično javljaju nakon tjedan dana.
  • Prilikom nadopunjavanja volumena krvi nakon značajnog gubitka krvi.
  • Uz pozitivne rezultate liječenja onkološke bolesti lijekovima protiv raka ili terapijom zračenjem.

Važno! Retikulocitoza se opaža s nedostatkom kisika na znatnoj visini iznad razine mora.

Negativne vrijednosti retikulocitoze uključuju:

  • Posljedice bolesti kao što je trbušni tifus, koje izazivaju unutarnje krvarenje.
  • Retikulociti se povećavaju tijekom intoksikacije kemijskim otrovima ili stranim agensima.
  • Lažna retikulocitoza pokazuje prisutnost nezrelih stanica u krvi, ali ne i u koštanoj srži, što ukazuje na upalni procesi ili metastaze u tijelu.
  • Retikulocitoza se opaža kod malarije, hemolitičke anemije ili talasemije.

Povećani sadržaj nezrelih krvnih stanica u krvi (retikulocitoza) prepun je njenog zgušnjavanja, što može dovesti do tromboze, srčanog ili moždanog udara.

Retikulociti u krvi tijekom trudnoće

U trudnica se ukupni volumen krvi povećava zbog plazme, stoga se opaža njegovo razrjeđivanje i smanjenje razine crvenih krvnih stanica. Zbog činjenice da u krvi nema dovoljno hemoglobina, razvija se anemija, koja aktivira proces eritropoeze. Stoga su trudnice odlučne visok postotak sadržaj retikulocita. Klinika ovog fenomena zadovoljava normu s fiziološkom prilagodbom tijela na rađanje djeteta.

Retikulociti su sniženi

Retikulocitopenija (kada je smanjena razina retikulocita) često ukazuje na oštećenje bubrega i/ili koštane srži. Čimbenici koji smanjuju sadržaj mladih eritrocita su:

  • Anemija uzrokovana nedostatkom folne kiseline, vitamina B12 ili željeza, što dovodi do uništavanja crvenih krvnih stanica.
  • Bolesti bubrega, ali mogu malo sniziti razinu retikulocita.
  • Zlouporaba alkohola, koja će pokazati smanjenje RTC-a zbog inhibicije bubrežnih funkcija, supresije koštane srži i izravnog uništavanja stanica kao rezultat intoksikacije.

Važno! Maligni tumori također može sniziti razinu retikulocita u krvi. Ovisi o području koštane srži gdje je rak metastazirao.

Sam po sebi pokazatelj sadržaja retikulocita u krvi nije dijagnoza. Uz značajno odstupanje od dopuštenog raspona, postavlja opći smjer za dijagnostiku.

Retikulociti, čija norma varira zbog mnogih čimbenika, su neformirani oblici crvenih krvnih stanica, a nalaze se u koštanoj srži i perifernoj krvi. U pravilu retikulociti u krvi sazrijevaju za tri do pet dana, a zatim se te stanice pretvaraju u već zrele crvene krvne stanice. Štoviše, broj neformiranih eritrocita znatno je veći nego kod odraslih.

Razotkrivanjeretikulociti:

Pri identificiranju retikulocita, čija se norma određuje pomoću posebne tablice, potrebno je uzeti u obzir njihove razlike od zrelih eritrocita. Ova vrsta krvnih stanica ili sadrži cijelu jezgru, ili se njezini ostaci promatraju kao dio zrnasto-nitaste tvari. Da bi se odredio broj takvih stanica, potrebno je laboratorijski proučiti boju krvnog razmaza. Za to se koristi otopina plavog dijamanta koja se nanosi na odmašćeno i prethodno oprano staklo, a tek onda se napravi razmaz.

Kada se otkriju retikulociti, čija je norma drugačija, odmah nakon razmaza, korišteno staklo treba staviti u Petrijevu zdjelicu - posebnu vlažnu komoru, zatim držati pet minuta, temeljito osušiti na svježem zraku, a zatim mikroskopirati. Štoviše, tvar granularno-filamentnog tipa unutar retikulocita obično je obojena u ljubičasto-plavu nijansu, a pozadina eritrocita ističe se zbog plavkasto-zelene nijanse.

Ako se koristi Gel-Meyerova metoda, bojanje nezrelih krvnih stanica može se puno bolje vidjeti, ali za to je potrebna Vidalova cijev. U tu posudu se pomiješa par kapi krvi s briljantnom otopinom i natrijevim kloridom, zatim se epruveta zatvori poklopcem, a sam bris se obavi unutar sat vremena.

Broj retikulocita:

Prilikom izračunavanja broja nezrelih krvnih stanica, morate uzeti 1000 crvenih krvnih stanica kao osnovu, a zatim uzeti u obzir retikulocite, čija stopa obično varira na razini od 0,2% -1,2% od broja odraslih crvenih krvnih stanica. U prosjeku, kod većine ljudi, broj nezrelih eritrocita je obično 0,7%. ukupni broj potpuno sazrele krvne stanice. Ako je broj retikulocita veći od najveće dopuštene norme za 10% ili više, osoba razvija retikulocitozu, bolest popraćenu redovitim akutnim krvarenjem i hemolitičkom anemijom.

Prilikom brojanja retikulocita (norma kod djece je obično visoka), vrijedi paziti da njihov broj ne prelazi granične vrijednosti tipične za odrasle. Standardi također ovise o spolu, budući da se kod žena 2,07% nezrelih eritrocita još uvijek smatra prihvatljivim parametrom, a kod muškaraca ta brojka ne smije prelaziti 1,92%.

U slučajevima kada je razina retikulocita značajno povećana, to ukazuje na prisutnost takvih poremećaja u tijelu kao što su malarija i talasemija, policitemija i hipoksija, anemija, sve vrste hemolitičkih sindroma, ali takvi pokazatelji su mogući i kod liječenja cijanokobalaminom. Ako je razina nezrelih eritrocita snižena, kod osobe se mogu javiti aplastična i hipoplastična anemija, sve vrste bubrežnih bolesti i miksedema, kao i širenje tumorskih metastaza na kosti.

Za dijagnosticiranje težine anemije potrebno je izračunati "retikulocitni indeks", koji se izračunava kao omjer postotka retikulocita i normalnih vrijednosti hematokrita, pomnožen s brojem dana potrebnih da nezrele stanice uđu u perifernu krv. Ako dobiveni indeks ne prelazi dva, pokazatelj ukazuje na hipoproliferativnu komponentu anemije, a ako prelazi dva, pokazuje vjerojatnost povećanog stvaranja crvenih krvnih stanica.

Retikulociti - pokazatelj broja stanica, prekursora crvenih krvnih stanica, nastalih u koštanoj srži. Retikulociti - mlade crvene krvne stanice odražavaju regenerativnu sposobnost koštane srži. Za procjenu intenziteta hematopoeze koristi se broj retikulocita. Studija se provodi s: smanjenjem broja crvenih krvnih stanica, sumnjom na hemolizu, procjenom eritropoeze, u liječenju anemije s pripravcima željeza i vitamina B 12, eritropoetina.

Retikulociti su nenuklearni, nezreli eritrociti, čije se sazrijevanje događa unutar 24-48 sati nakon ulaska u perifernu krv iz koštane srži. Broj formiranih retikulocita odražava eritropoetsku aktivnost koštane srži. Drugim riječima, sadržaj retikulocita odražava brzinu stvaranja eritrocita i služi kao pokazatelj odgovora koštane srži na anemizaciju.

Uz općeprihvaćene parametre retikulocita - apsolutni i relativni (%) sadržaj retikulocita, pojava novih hematoloških analizatora (bojenje posebnim bojama za nukleinske kiseline) omogućila je dobivanje dodatnih parametara retikulocita:

Retikulociti s niskim sadržajem RNA, najzreliji (LFR%, frakcija retikulocita s niskom fluorescencijom);
retikulociti s prosječnim sadržajem RNA (MFR%, frakcija retikulocita s prosječnom fluorescencijom);
visoki RNA retikulociti (HFR%, frakcija retikulocita visoke fluorescencije);
frakcija nezrelih retikulocita (IRF%, frakcija nezrelih retikulocita).

Diferencijacija retikulocita, na temelju stupnja zrelosti i, sukladno tome, sadržaja nukleinskih kiselina odraz je hematopoetske aktivnosti koštane srži.


Vlasnici patenta RU 2612018:

Izum se odnosi na medicinu, odnosno na laboratorijsku dijagnostiku, i može se koristiti za automatsko brojanje broja retikulocita na analizatorima krvnog razmaza. Suština izuma: nakon početnog supravitalnog bojenja retikulocita briljantnim krezil plavim, razmazi se dodatno fiksiraju i boje May-Grunwald fiksativom 1 minutu, isperu tekućom vodom, osuše i broje retikulocite na automatskom krvnom razmazu. analizator. UČINAK: poboljšana točnost i ubrzanje brojanja retikulocita. 2 ilustr., 3 pr.

Izum se odnosi na medicinu, odnosno na laboratorijsku dijagnostiku, i može se koristiti za automatsko brojanje broja retikulocita na analizatorima krvnog razmaza.

Količina i kvalitativni sastav retikulocita jedan su od važnih pokazatelja koji karakteriziraju učinkovitost hematopoeze, a njihovo brojanje široko se koristi tijekom masovnih preventivnih pregleda i regulirano je nizom naloga. Korištenje automatskih analizatora razmaza krvi omogućuje automatiziranje procjene staničnog sastava razmaza krvi obojenog prema Romanovsky-Giemsi. Međutim, brojanje retikulocita u takvim razmazima je nemoguće, zbog činjenice da kada se boje prema Romanovsky-Giemsi, retikulofilamentarna tvar nije otkrivena.

Poznata metoda za brojanje broja retikulocita nakon supravitalnog bojenja u posebno pripremljenom razmazu krvi [Laboratorijske metode u klinici: priručnik / Menshikov VV, Delktorskaya LN, Zolotnitskaya RP i tako dalje.; ur. V.V. Menjšikov. - M.: Medicina, 1987, - 368 str.: ilustr., str. 118-119]. Da biste to učinili, krv uzeta s antikoagulansom (etilendiamidetetraacetat, heparin ili natrijev citrat) pomiješa se s otopinom briljantne krezilno plave boje (briljantno krezilno plavo), smjesa se inkubira 30 minuta i pripremi se tanki razmaz. Međutim, kada se koriste automatski analizatori razmaza krvi, ova metoda bojenja retikulocita daje netočne rezultate brojanja retikulocita. To je zbog činjenice da se ovom metodom bojenja eritrociti boje blijedo, u različitim nijansama žuto-plave boje, što otežava automatsko prepoznavanje stanica i identifikaciju retikulofilamentarne supstance, koja se također boji plavo-zeleno (slika 1).

UČINAK: poboljšana točnost i ubrzanje brojanja retikulocita.

Taj se rezultat postiže promjenom protokola bojenja i uporabom automatskih analizatora razmaza krvi.

Metoda je ilustrirana fotografijama, pri čemu prva fotografija (slika 1) prikazuje rezultat tradicionalnog bojenja retikulocita (prototip); eritrociti su obojeni u različite nijanse zelenkasto-plave boje, u dva je uočljiva plava retikulo-filamentna supstanca retikulocita. Druga fotografija prikazuje rezultat korištenja predložene metode za pripremu krvnog razmaza: eritrociti su obojeni svijetlo crveno na čijoj pozadini je retikulo-filamentarna supstanca retikulocita obojena svijetlo crveno. Plava boja(slika 2).

Metoda se provodi na sljedeći način.

Ispitaniku se uzima krv s antikoagulansom, na primjer, kalijevom soli etilendiamintetraoctene kiseline. Supravitalno bojenje retikulocita provodi se briljantnim krezil plavim (briljantno krezil plavim). Dodajte 0,4 ml otopine boje u 0,1 ml pune krvi i inkubirajte 30 minuta. Zatim se od dobivene smjese pripremi tanki premaz. Nakon što se namaz osuši, dodatno se fiksira i dorađuje May-Grunwald bojom za fiksiranje. Da biste to učinili, osušeni razmaz se stavlja na 1 minutu u posudu s fiksirajućom bojom, zatim se izvadi iz posude i ispere tekućom vodom. Nakon sušenja, lijek se ispituje na analizatorima razmaza krvi, na primjer, Vision Hema ® (FIRM MEDICA PRODUCT, Rusija). Eritrociti su obojeni crvenom bojom, nasuprot kojoj je u retikulocitima jasno vidljiva plava retikulo-filamentna tvar (slika 2). Prikupiti i analizirati eritrocite, najmanje 1000 komada. Broj eritrocita koji sadrže retikulofilamentnu tvar računa se u odnosu na sve prikupljene eritrocite. Rezultat se izražava u postocima.

Za bojenje krvnih razmaza koriste se sljedeće otopine:

1) otopina briljantnog krezil modrila u apsolutnom alkoholu. Za pripremu apsolutnog alkohola potrebno je izdržati 96% etanol u nekoliko izmjena kalciniranog bakrenog sulfata (sve dok prah bezvodnog bakrenog sulfata ne prestane plaviti). Za 100 ml apsolutnog alkohola uzima se 1,2 g boje (Medicinske laboratorijske tehnologije i dijagnostika: Priručnik. Medicinske laboratorijske tehnologije / Uredio prof. A.I. Karpishchenko. - St. Petersburg; Intermedica, 2002. - 408 str. Str. 284 ) .

2) May-Grunwald fiksirajuća boja - 1 g suhe boje potrebno je otopiti u 1 litri metilnog alkohola. (Medicinske laboratorijske tehnologije i dijagnostika: Priručnik. Medicinske laboratorijske tehnologije / Uredio prof. A.I. Karpishchenko. - St. Petersburg; Intermedica, 2002. - 408 str. S. 277).

Primjeri specifične implementacije:

Primjer 1. Pacijent I., 48 godina. Položen periodični pregled kao zaposlenik rafinerije nafte. Bolesnici je uzeta krv s antikoagulansom (kalijeva sol etilendiaminoctene kiseline) i pripremljena su 2 razmaza. Retikulociti u jednom razmazu bojani su tradicionalnom metodom, samo briljantnim krezil plavim. Retikulociti u drugom razmazu obojeni su prema predloženoj metodi. Da bi se to postiglo, 0,1 ml krvi pomiješano je s otopinom briljantnog krezil plavog i inkubirano 30 minuta. Zatim je uzet tanki krvni razmaz. Krvni razmaz je nakon sušenja dodatno fiksiran i obojan uranjanjem u May-Grunwald fiksativnu boju. U razmazima je broj retikulocita određen pomoću analizatora krvnih razmaza Vision Hema ® Pro (FIRM MEDICA PRODUCT, Rusija) i ručno pod svjetlosnim mikroskopom (Meiji, Japan).

Broj retikulocita izbrojan na analizatoru krvnog razmaza s tradicionalnim bojenjem bio je 1,5%, što je premašilo referentni raspon norme, au razmazu obojenom predloženom metodom iznosio je 0,9%, što odgovara normalnim vrijednostima za odrasla osoba. Pri ručnom brojanju retikulocita njihov broj u istim razmazima iznosio je 0,8%, odnosno 0,9%. To ukazuje na povećanje točnosti brojanja na analizatorima razmaza krvi pri korištenju predložene metode za pripremu razmaza. Istodobno, brzina proučavanja retikulocita na analizatoru krvnog razmaza bila je 48 i 54 sekunde, dok je ručno brojanje retikulocita trajalo 270 i 238 sekundi.

Dakle, ovaj primjer pokazuje da predloženo bojenje retikulocita pomoću analizatora razmaza krvi dovodi do povećanja točnosti rezultata i bržeg brojanja retikulocita.

Primjer 2. Pacijent Z. je hospitaliziran u hematološkom odjelu KMSCh 1 u Permu s dijagnozom aplastične anemije. U sklopu protokola pregleda učinjeno je brojanje retikulocita. Bolesnici je učinjeno vađenje krvi s antikoagulansom (kalijeva sol etilendiaminoctene kiseline) i pripremljena su 2 razmaza. Retikulociti u jednom razmazu bojani su tradicionalnom metodom, samo briljantnim krezil plavim. Retikulociti u drugom razmazu obojeni su prema predloženoj metodi. Da bi se to postiglo, 0,1 ml krvi pomiješano je s otopinom briljantnog krezil plavog i inkubirano 30 minuta. Zatim je uzet tanki krvni razmaz. Krvni razmaz je nakon sušenja dodatno fiksiran i obojan uranjanjem u May-Grunwald fiksativnu boju. U razmazima je broj retikulocita određen pomoću analizatora krvnih razmaza Vision Hema ® Pro (FIRM MEDICA PRODUCT, Rusija) i ručno pod svjetlosnim mikroskopom (Meiji, Japan).

Broj retikulocita izbrojan na analizatoru krvnog razmaza u tradicionalno obojenom razmazu bio je 0,3%, u razmazu obojenom modificiranom metodom - 0,2%. Kod ručnog izračuna rezultat je 0,2% i 0,2%. Istodobno, brzina brojanja retikulocita na analizatoru krvnog razmaza bila je 58 i 52 sekunde, dok je ručno brojanje retikulocita trajalo 302 odnosno 338 sekundi.

U ovom slučaju, zbog niskog sadržaja retikulocita, nisu pronađene značajne razlike u rezultatima, međutim, malo precijenjen rezultat dobiven na analizatoru krvnog razmaza pri pregledu obojenog razmaza na uobičajeni način. Kao iu prethodnom primjeru, pokazalo se značajno (gotovo 5-struko ubrzanje broja retikulocita).

Primjer 3. Pacijent K. Hospitaliziran na odjelu neonatalne patologije Dječje gradske kliničke bolnice br. 13 u Permu s dijagnozom hemolitička bolest novorođenčadi. U sklopu protokola pregleda učinjeno je brojanje OAK s brojanjem retikulocita. Bolesnici je učinjeno vađenje krvi s antikoagulansom (kalijeva sol etilendiaminoctene kiseline) i pripremljena su 2 razmaza. Retikulociti u jednom razmazu bojani su tradicionalnom metodom, samo briljantnim krezil plavim. Retikulociti u drugom razmazu obojeni su predloženom metodom. Da bi se to postiglo, 0,1 ml krvi pomiješano je s otopinom briljantnog krezil plavog i inkubirano 30 minuta. Zatim je uzet tanki krvni razmaz. Krvni razmaz je nakon sušenja dodatno fiksiran i obojan uranjanjem u May-Grunwald fiksativnu boju. U razmazima je broj retikulocita određen pomoću analizatora krvnih razmaza Vision Hema ® Pro (FIRM MEDICA PRODUCT, Rusija) i ručno pod svjetlosnim mikroskopom (Meiji, Japan).

Broj retikulocita izbrojan na analizatoru krvnih razmaza u tradicionalno obojenom razmazu bio je 30,3%, u razmazu obojenom modificiranom metodom - 21,2%. Ručnim izračunom rezultat je 20,6% i 22,4%. Istodobno, brzina brojanja retikulocita na analizatoru krvnih razmaza iznosila je 52 i 51 sekundu, dok je ručno brojanje retikulocita trajalo 298 odnosno 304 sekunde.

Ovaj primjer pokazuje smanjenje točnosti brojanja retikulocita na analizatorima razmaza krvi u staklenim preparatima obojenim tradicionalnom metodom, posebno s visokim sadržajem retikulocita. Primjenom nove metode bojenja razmaza postignuto je gotovo potpuno slaganje rezultata brojanja retikulocita na automatskom analizatoru i ručnog, dok se brzina brojanja retikulocita povećala za više od 5 puta.

Metoda pripreme krvnih razmaza za brojanje retikulocita supravitalnim bojenjem retikulocita briljantnim krezil plavim, naznačena time što se nakon bojenja briljantnim krezil plavim razmazi dodatno fiksiraju i boje bojom - May-Grunwald fiksativ 1 minutu, isperu tek. vode, osušeni i izbrojani retikulociti na automatskom analizatoru razmaza krvi.

Slični patenti:

Izum se odnosi na dijagnostiku, a posebno na metodu predviđanja razvoja gnojne komplikacije pankreasna nekroza. Metoda za predviđanje razvoja gnojnih komplikacija nekroze gušterače je da se u bolesnika sa sterilnom nekrozom gušterače, počevši od petog dana od početka bolesti, mjeri aktivnost alfa-amilaze u krvi, sadržaj ukupnih proteina, limfociti, monociti u krvi, omjer albumina i globulina u krvnom serumu određuju se, ozbiljnost stanja bolesnika prema sljedećim ljestvicama SAPS, SOFA, SIRS, prisutnost parapankreasnog infiltrata, pareza gastrointestinalnog trakta, akutna nakupljanje tekućine u omentalnoj vrećici ili retroperitonealnom tkivu i prema formuli izračunati indeks infekcije pankreasne nekroze (IPN).

SADRŽAJ: Skupina izuma odnosi se na određivanje koncentracije analita u biološka tekućina na temelju dobivenih ovisnosti trenutne vrijednosti o vremenu. Metoda za određivanje koncentracije analita u fiziološkoj tekućini uključuje stavljanje reagensa za interakciju s analitom u fiziološkoj tekućini između prve elektrode i druge elektrode, nanošenje fiziološke tekućine na reagens, pretvaranje analita u fiziološku tekućinu. i pobuda nestacionarne struje iz svake od prve i druge elektrode, određivanje vršne vrijednosti nestacionarne struje za svaku od prve i druge elektrode, mjerenje vrijednosti prijelazne struje u danom vremenskom pomaku od vršne vrijednosti svake prijelazna struja sa svake od prve i druge elektrode, dok vremenski pomak za prvu elektrodu sadrži prvi pomak u vremenu od vrha prijelazne struje prve elektrode i vremenski pomak od vrha nestacionarne struje druge elektrode uključuje drugi vremenski pomak koji se razlikuje od prvog vremenskog pomaka i izračun koncentracije analita na temelju izmjerenih vrijednosti struje prve i druge elektrode u koraku mjerenja renij.

Izum se odnosi na medicinu i predstavlja metodu za određivanje sindrom boli s polineuropatijom u bolesnika s vibracijskom bolešću, uključujući uzimanje uzoraka venske krvi, dobivanje krvnog seruma i određivanje kvantitativnog sadržaja serotonina u njemu.

Izum se odnosi na medicinu, odnosno na pulmologiju, a odnosi se na metodu za odabir trajanja terapije ceruloplazminom u bolesnika s Bronhijalna astma. Suština metode je u tome što se u bolesnika s bronhalnom astmom određuju sukroksid dismutaza (SOD) i malonski aldehid (MA) te njihovi omjeri MDA/SOD u krvi nakon liječenja Ceruloplazminom u dozi od 100 mg intravenozno 1 puta dnevno tijekom 7 dana.

Izum se odnosi na ihtiologiju i uzgoj ribe i predstavlja metodu za ispitivanje fiziološkog stanja jesetri, uključujući ispitivanje krvnog seruma riba, naznačen time što se krvni serum ispituje metodom rubne dehidracije u analitičkim ćelijama i morfološkom analizom. formiranih struktura izvodi se u načinu konvencionalne mikroskopije pri različitim povećanjima, pri U ovom slučaju, dendritični i prijelazni oblici pokazatelji su norme homeostaze, a prisutnost lamelarnih struktura ukazuje na promjene koje se događaju u tijelu ribe.

Izum se odnosi na medicinu, odnosno na transplantaciju organa i kliničku laboratorijsku dijagnostiku. 3-4 tjedna nakon transplantacije jetre u krvnoj plazmi djece mjeri se koncentracija transformirajućeg faktora rasta beta 1 (TGF-β1) u ng/ml.

Izum se odnosi na područje medicine i odnosi se na metodu za dijagnosticiranje težine napadaja u bolesnika s Crohnovom bolešću. Suština metode leži u činjenici da se određuje brzina sedimentacije eritrocita (ESR), koncentracija C-reaktivnog proteina (CRP), razina vaskuloendotelnog faktora (VEF) u serumu, broj deskvamiranih endoteliocita (DEC). u krvnoj plazmi izračunava se koncentracija mikroalbumina (MAU) u urinu.

Izum se odnosi na ventile koji se koriste za plinovite medije, a mogu se koristiti, posebno, u spremnicima za uzorkovanje. Plinonepropusni ventil sadrži bazu 1, kućište 2, najmanje četiri brtvena prstena 5, 6, 7 i 8 od polimernog elastičnog materijala i vreteno 3 s kalemom 3a.